Laboratorio 4 SDS - PAGE Flashcards
(12 cards)
Cual es el objetivo del laboratorio?
Realizar una electroforesis en gel de poliacrilamida de las alicuotas
Qué es la electroforesis?
Es la migración de una partícula cargada a través de un medio de dispersión bajo la influencia de un campo eléctrico.
En qué campo es mas utilizada la electroforesis?
En el campo de las proteínas
Para que se usa el SDS?
Es un detergente que permite denaturar las proteínas y que queden lineales y con la misma relacion carga/masa, permitiendo que se separen de acuerdo a su peso molecular
Cuales son los monomeros a polimerizar?
Acrilamida y bisacrilamida
Que pasa si aumento el porcentaje de monomero?
Haces que los tamaños a separar sean mayores en el rango.
Que significa que los geles de poliacrilamida sean restrictivos?
Que evitan la convección y difusión de proteínas en el gel
Cual es el nombre del sistema a utilizar para los geles de poliacrilamida?
MINI PROTEAN II de BIO-RAD
Cuales son los 6 componentes del sistema a utilizar?
- Soporte para preparar el gel.
- Soporte porta vidrios.
- Peinetas.
- Vidrios.
- Guía de carriles.
- Soporte para correr el gel.
Son peligrosos los monomeros a utilizar?
Sí, son neurotoxicos.
Que son el TEMED y PSA y cuando hay que agregarlos?
Son los reactivos que inician la reacción de polimerización, por lo que se deben agregar al final.
Para que se utilizan 2 geles? Como se llaman?
- Gel separador: gel que permite la separacion de las proteínas en la electroforesis. Tiene un mayor porcentaje de poliacrilamida para garantizar la separacion adecuada.
- Gel concentrador: esta al inicio del trayecto de las proteínas, el cual tiene un menor porcentaje de acrilamida. Se usa para concentrar las proteínas y que se preparen para ingresar en el gel separador. Tiene un menor porcentaje de acrilamida porque en el inicio del trayecto hay una mayor resistencia eléctrica lo que realientiza su migración.
