Le système du complément Flashcards

Question

Quel est le rôle de C4BP dans la voie classique?

Answer 1

Le C4BP est une protéine sérique qui, en présence d'une convertase à la surface cellulaire, induit sa dissociation, permettant ainsi le relargage d'un fragment de la convertase dans la circulation (dégradation / inactivation complète). L’autre fragment restant à la surface cellulaire devient alors une cible pour la dégradation par le Facteur I. Ce processus est amplifié par des molécules régulatrices du soi présentes à la surface cellulaire, telles que CR1, MCP et DAF.

Answer 2

Le facteur H reconnaît la C3 convertase de la voie alterne et induit la dissociation du facteur Bb à la surface cellulaire. Le fragment restant devient alors une cible pour la dégradation par le Facteur I. Ce processus est renforcé par des molécules régulatrices du soi présentes à la surface cellulaire, telles que CR1, MCP et DAF.

Answer 3

Défait le complexe C1q, C1r et C1s. Dissocie C1r et C1s, perdant ainsi la fonction du C1q

Answer 4

Peuvent inhiber la cascade ou la favoriser (voir facteur néphritique) Inhibiteur de C1 : Se lie à C1rc et C1s actives, les retirant de C1q C4BP : Se lie à C4b, le déplaçant de C2b ; cofacteur pour le clivage de C4b par I CR1 (récepteur du complément 1) : Se lie à C4b, le déplaçant de C2b, ou se lie à C3b pour déplacer Bb ; cofacteur de I Facteur H (H) : Se lie à C3b pour déplacer Bb ; cofacteur de I Facteur (I) : Sérine protéase qui clive C3b et C4b ; aidé par H, MCP, C4BP ou CR1 Facteur d'accélération de la dissociation (DAF) : Protéine membrane qui déplace Bb de C3b et C2b de C4b Protéine de cofacteur membranaire : protéine membrane qui promu l’inactivation de C3b et C4b par I CD59 (protectin) : Empêche la formation de complexe d’attaque membrane sur les cellules autologues ou allogènes. Très exprimé sur les membranes., Facteurs néphritiques : Stabilize la convertase C3 (va donc amplifier la cascade d’activation du complément)

Answer 5

* Méthodes fonctionnelles pour l’activité totale * Méthodes immunologiques pour doser un élément en particulier * Activité spécifique d’un facteur * Analyse des produits d’activation * Dosage des autoanticorps anti-complément * Expression des marqueurs de surface et identification de la déposition du complément à la surface cellulaire (cytométrie de flux) * Séquençage génétique * Monitoring de l’éculizumab (Sainte-Justine le fait au Québec)

Answer 6

* Activité totale d’une voie -CH50, AH50, ELISA * Activité d’un élément d’une voie -Reconstruire l’activité hémolytique d’un sérum déficient * Activité de C1-INH -Essai chromogénique * Compétition entre C1-INH et substrat chromogénique pour la liaison du C1s activé lié à un support

Answer 7

* Activation totale de la voie classique * GR de mouton sensibilisé (Ac anti-GR de mouton) + sérum du patient * Détermine la dilution du sérum qui donne 50% d’hémolyse * Variantes: CH100, relâche de marqueur, utilisation de liposomes, cinétique

Answer 8

* Activation totale de la voie alternative * GR de hamster + sérum de patient * Détermine la dilution du sérum qui donne 50% d’hémolyse * EDTA pour chélater le calcium et inactiver la voie classique * Ajout de magnésium pour favoriser la voie alternative * Variantes: AH100, GR de lapin, de poulet

Answer 9

* Alternative aux essais hémolytiques (CH50 et AH50) * Dosage de facteurs qui se déposent suite à l’activation par des substances immobilisées sur un support * Voie classique: IgM lié + Ac anti-C9 * Voie alternative: LPS lié + Ac anti-properdine * Voie des lectines: Mannose lié + Ac anti-C4 *activité totale car Ac vise C9

Answer 10

* Reconstruire l’activité hémolytique d’un sérum déficient * 2 façons Sérum patient + sérum déficient + CH50 Sérum patient + protéine du complément + CH50

Answer 11

* Complément très sensible à l’activation in vitro -Chaleur -Exposition longue à température ambiante -Complexes immuns ou agglutinines froides * Sérum frais et réfrigéré < 48 h ou congelé à - 70°C

Answer 12

* Néphélémétrie, ELISA, Luminex (avantage = multiplex), RID, Western blot * C3, C4, facteur B, C1-INH, MBL, properdine, facteur H, etc

Answer 13

* Ac monoclonaux très spécifiques (ELISA) * Fragments d’activation, complexes * In vivo = très faible quantité Activation in vitro = faux positif Ratio avec le produit natif

Answer 14

* ELISA → mettre antigène au fond du puit -Ac Anti-C1-INH (angio-oedème acquis) (EXAM) -C3NeF, C4NeF (MPGN) (EXAM) -Ac anti-C1q (LED, LES)

Answer 15

Dans certaines pathologies, les CIC sont mal éliminés et se déposent au niveau de l’endothélium vasculaire provoquant des lésions par activations du système du complément * Méthodes : -Basées sur la fixation des CIC sur le C3 (cellules de Raji ou test conglutinine) -ELISA basées sur la liaison au C1q * Indications (augmentation) : Polyarthrite rhumatoïde, Lupus érythémateux systémique, Glomérulonéphrites, Néoplasies, Infections *Interprétation: Analyses peu spécifiques ; Nombreuses interférences ; CIC pathogènes ou non? ; CIC ne corrèlent pas avec les CI des dépôts ; Orientation clinique dans un contexte précis ; Dans l’exploration d’une pathologie à CIC, la recherche de marqueurs spécifiques de la maladie est préférable

Answer 16

* Peu de méthodes normalisées (maison et RUO) * Peu de standardisation * Peu de ressources en assurance qualité (CQE, CQI de tiers) * Initiatives : International Complement Society (ICS) ; Standardization and Quality Assessment of Complement Measurements ; IUIS Quality Assessment and Standardization Committee ;European Complement Network

Answer 17

Une amplification du complément peut entraîner une augmentation du nombre de cellules T et de plaquettes, favorisant ainsi la thrombose et une inflammation accrue, ce qui accentue les dommages cellulaires. Ces dommages peuvent à leur tour augmenter le nombre de cellules altérées, qui seront alors ciblées par l'opsonisation

Answer 18

Rénales : néphrite lupique, glomérulonéphrite membranoproliférative, néphrite membraneuse, néphropathie à IgA, syndrome de Goodpasture Hématologique : anémie hémolytique, hémoglobinurie paroxystique froid et hémoglobinurie paroxystique nocturne

Answer 19

* Acquise ou héréditaire Acquise : maladie cause la consommation du complément Héréditaire : la déficience en complément prédispose à la maladie * Prédisposition à des infections sévères et/ou répétées ou à des maladies autoimmunes Infection : diminution de la phagocytose et de la lyse Auto-immune: persistance des complexes auto-immuns

Answer 20

Glomérulonéphrite Voie classique : Déficience en C1q, C1r, C1s, C4 et C2 Voie commune : Déficience en C3 Régulateurs en circulation : Déficience en facteur H Tous des maladies autosomales récessives Syndrome hémolytique et urémique atypique : Régulateurs en circulation : Déficience en Facteur I et H Régulateurs cellulaires : Déficience en MCP Autosomales récessives Hémoglobinurie paroxystique nocturne : Régulateurs cellulaires : Déficience en DAF/CD59 Acquis

Answer 21

* Infectieuses -Bactériennes -Virales * Maladies rhumatologiques * Maladies rénales * Maladies hématologiques

Answer 22

* Déficience en C3 Infections bactériennes sévères et répétées * Déficience en C5-C9 Neisseria meningitidis * Déficience en properdine Neisseria meningitidis * Déficience en MBL Augmentation du risque d’infection * Bilan de base CH50, AH50, C3, C4, (properdine)

Answer 23

Certains virus ont des homologies avec la voie du complément, ce qui permet de la contourner. D’autres virus utilisent le système du complément pour rentrer à l’intérieur des cellules. (passer inaperçu ou contourner activation du complément)

Answer 24

* Lupus érythémateux disséminé et systémique (LED, LES) -Complexes immuns responsables des dommages de plusieurs organes --Peau et surface des muqueuses, parois séreuse des poumons, du cœur, des reins, du système nerveux, érythrocytes -Déficience dans la voie classique -C1q > C4 > C1r/s > C2 -Dosages du complément comme indication de l’activité de la maladie et pour suivi du traitement * Bilan de base: CH50, C3, C4

Answer 25

* Glomérulonéphrites membranoprolifératives (GNMP ou MPGN) -Hypocomplémentémie (C3 bas) -Facteurs néphrétiques (NeF) sont des Ac anti-convertases --NFa ou C3NeF: Ac anti-C3bBb qui stabilise la C3 convertase alternative --NFc ou C4NeF: Ac anti-C4b2a qui stabilise la C3 convertase classique --NFt: Ac qui stabilise les C3 et C5 convertases et le MAC * Syndrome urémique hémolytique (HUS) Le facteur H est déficient * Néphrite lupique Manifestions du LED au niveau rénal avec Ac anti-C1q

Answer 26

*Secondaire (SLE, HCV, etc.) ou Idiopathique *Caractéristiques : -Dépôts sous-endothéliaux dans les parois capillaires -Prolifération cellulaire mésangiale -Présence en immunofluorescence de dépôts granuleux le long des parois capillaires et dans le mésangium. *Classification histologique fondée sur la localisation et la nature des dépôts définissant les GNMP (ancienne classification) -Types I, II et III. *Classification selon les mécanismes physiopathologiques (nouvelles classifications) -GNMP associées à des complexes immuns -GNMP associées à des anomalies du complément

Answer 27

* Type I -Complexes immuns circulants et dépôts -C4NeF (Nfc): stabilise la C3 convertase -Activation de la voie classique (diminution des C3, C4, C2, C1q, B) * Type II ou la maladie des dépôts denses (Dense Deposit Disease [DDD]) -Pas de complexes immuns circulants -Dépôts de C3 (dépôts denses activeraient le complément) -C3NeF (NFa): stabilise la C3 convertase -Déficience en facteur H (nombre, fonction ou anti-facteur H) -Activation de la voie alternative : (diminution des C3, H) * Type IIIG -Dépôts de C3, C5 et properdine -NFt: stabilise les C3 et C5 convertases et le MAC -Activation de la voie alternative et du MAC: (diminution des C3, C5, MAC) * Analyses dosées : CH50, C3, C4, C5, AH50, C1q, C2, Facteur B, Facteur H et Facteurs néphritiques

Answer 28

* Triade: Anémie hémolytique microangiopathique, trombocytopénie, insuffisance rénale aiguë * + Diarrhée (maladie du hamburger) -E.coli (sécrétion de verotoxine ou shigatoxine). Cette toxine endommage les cellules endothéliales des vaisseaux, déclenchant la cascade du complément et la formation de microthrombus. * - Diarrhée (atypique) → complément impliqué ici Mutation dans le gène du Facteur H > -Facteur I ou MCP --Entraine une activité suboptimale et/ou concentration diminuée de ces régulateurs --Entraîne une activation incontrôlée du complément = microthrombus rénaux ---Diminution du C3 et du Facteur H (C4 normal) puisqu’il y a une consommation excessive de ces facteurs vu l’activation incontrôlée du complément ---Un C4 normal suggère une activation spécifique de la voie alterne du complément

Answer 29

Vu qu’il y a augmentation de la cascade du complément, on va y retrouver plus de C5a et C5b dans la circulation sanguine. Ce sont des anaphylatoxines de la C5 convertase Rôles C5a : Anaphylatoxine potente, chimiotactise, proinflammatoire, activation endothéliale et prothrombotique -Engendre une thrombose, inflammation et anaphylaxie Rôles de C5b : Lyse cellulaire, proinflammatoire, activation plaquettaire, activation endothéliale et prothrombotique -Engendre une hémolyse, inflammation, thrombose et dommage tissulaire -*dommage aux vaisseaux, coag, anémie

Answer 30

nick ajouter photo

Answer 31

* 3 types : -Type I héréditaire : concentration en C1-INH diminuée -Type II héréditaire : activité de C1-INH diminuée -Type acquis : Ac anti-C1-INH * Œdème sous-cutané et sous-muqueux -Enflure près de la bouche -Mort par œdème au niveau du larynx ou par hypovolémie secondaire à œdème intestinal si non traité * CH50, C3, C4, C1-INH (dosage et activité), Ac anti-C1-INH * Exploration du complément -CH50 diminué (pendant la crise) -C3 normal -C4, C1q et C2 abaissées -C1-inh: --Type I: Dosage Ag abaissé --Type II: Activité fonctionnelle abaissée --Type III: Variable

Answer 32

* Clinique : -Mutation du gène PIG-A qui code pour le glycosyl phosphatydyl inositol (GPI) --GPI sert d’ancrage pour le DAF et CD59 (Protectine) -Poussées nocturnes d’hémolyse et d’hémoglobinurie par activation du complément -À la faveur de la baisse nocturne du pH sanguin -Conséquences : anémie, thrombose sévère, insuffisance rénale chronique, hypertension pulmonaire, ischémie intestinale, insuffisance hépatique et organique --Processus similaire à HUS pour le développement des maladies (accumulation de C5 anaphylatoxines) -Atteinte à la survie des patients

Answer 33

1- Normal : L'oxyde nitrique produit par les cellules endothéliales diffuse dans la circulation sanguine et dans les cellules musculaires lisses situées autour des vaisseaux sanguins, contribuant à leur relaxation et à la régulation de la pression sanguine. 2- Hémolyse : Chez les patients atteints de la maladie, les globules rouges et les plaquettes ne sont pas protégés contre une activation chronique du complément. Cela entraîne la lyse des globules rouges et l'activation des plaquettes. 3- Manifestations de la maladie : --Maladies chroniques du rein : La lyse des globules rouges libère de l'hémoglobine et du fer, qui peuvent entraîner des dysfonctionnements rénaux et provoquer des dépôts extensifs d'hémoglobine dans les reins. --Hypertension pulmonaire : L'hémoglobine libre réagit avec l'oxyde nitrique (NO), le convertissant en NO3-, ce qui réduit la disponibilité de NO. Cette diminution de NO affecte les muscles lisses des vaisseaux sanguins, entraînant une vasoconstriction et une hypertension pulmonaire. --Thromboembolisme : La réduction de NO favorise l'activation des plaquettes, ce qui conduit à leur adhérence à l'endothélium et à la formation de thromboses.

Answer 34

* Test de Ham-Dacie + Sucrose (hyper hémolyse des érythrocytes du patient in vitro en présence de solutions acides) -Historique -Seulement les érythrocytes * Cytométrie de flux pour CD16, CD14, DAF et CD59 (dépendent du GPI) -Remplace le test Ham-Dacie -D’autres cellules que les érythrocytes -Les anticorps utilisés ne lient pas avec une forte affinité -Petites populations de cellules « HPN » ne peuvent pas être détectées (raison de préférer le FLAER) -Dépistage de l’absence d’une protéine spécifique plutôt que l’absence de l’ancre GPI -Risque de faux-positifs * « FLAER »

Answer 35

* “Fluorescently Labelled Aerolysin” * Variant de l’aérolysine -Protéine d’origine bactérienne qui lie spécifiquement et avec beaucoup d’affinité l’ancre GPI --« Aeromonas hydrophila » ---Protéine native lie l’ancre GPI, s’oligomérise et cause la lyse des cellules --Plus sensible que le CD59 ---Petites populations de cellules HPN peuvent être détectées : Détection de populations de granulocytes anormaux à des taux aussi bas que 0.5% -Couplé au “Alexa fluor® 488” (semblable à la fluorescéine) --Signal stable et fort

Answer 36

-Eculizumab = Anti-C5 -Traitement pour HPN et SHUa, et potentiellement GNMP? -Fait par ELISA (dosage Ste-Justine)