Outils et méthodes Flashcards
(18 cards)
Qu’est-ce qu’un artéfact?
structure artificielle apparaissant lors de la préparation de l’échantillon pour son observation au microscope
Qu’est-ce que le grossissement efficace?
Grossissement permettant de distinguer clairement les détails de l’objet observé
Qu’est-ce que la limite de résolution?
Expression quantitative de la capacité de grossissement efficace d’un appareil (d)
Pourquoi faire le vide dans la chambre d’un microscope électronique?
Cela permet au faisceau d’électrons de voyager en ligne droite
Comment vérifier si nous sommes en présence d’artéfacts?
Préparations différentes d’un même échantillon
Fonctionnement d’un MET
Faisceau d’électrons accéléré par l’anode et maintenu par des bobines déflectrices
électrons sont déviés ou passent au travers du spécimen
le contraste de l’image observée correspond à la différence d’électrons atteignant le film (noir et blanc)
Préparation d’un tissu pour microtome
Fixation
Déshydratation (alcool)
Intermédiaire (xylène, toluène)
Inclusion (paraffine)
Technique de cryodécapage
Congélation dans l’azote liquide
Fracture avec microhache
Décapage par sublimation
Ombrage avec mélange platine-carbone
Différence entre coupe ultramicrotome et cryodécapage?
Coupe ultramicrotome = coupe mince sans relief
Cryodécapage = fracture avec relief
Quelle est la différence entre la longueur d’onde de la lumière d’émission et celle d’excitation?
La lumière d’excitation porte généralement plus d’énergie (plus courte longueur d’onde)
En quoi consiste la cytoenzymologie?
Technique de détection des enzymes in situ qui les révèle par leur activité et non leur présence
Réaction de Gomori
Précipitation d’électrons avec l’action de la phosphatase
peut mettre en évidence les lysosomes
Imprégnation métallique
Dépôt de métaux lourds sur les membranes
Coloration négative
Coloration du contour met en évidence ce qu’on veut voir grâce au contraste
Microscopie à contraste de phase
Amplification de petites variations de phase (par interférence), ce qui augmente le contraste de l’image
Microscopie à champ sombre
Production d’un cône de lumière qui ne parvient à l’objectif que lorsqu’il est diffusé par l’échantillon, ce qui renforce le contraste de l’image
Technique d’autoradiographie
Émulsion radioactive de coupes
Coupes transférées dans un milieu non radioactif
Coupes fixées sur support et recouvertes de sels d’argent, ensuite développement en chambre noire
Rayonnement radioactif imprime l’image sur un film
Microscopie à balayage électronique
Faisceau d’électrons sur spécimen
On peut reconstituer la topographie de la surface en détectant la variation du nombre d’électrons diffusés
