Označevanja!! Flashcards

(49 cards)

1
Q

mikrotubuli

A

imunooznačevanje na alfa in beta tubulinu

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

intermediarni filamenti

A

imunooznačevanje proti keratinu

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

aktinski filamenti

A

imunooznačevanje proti G-aktinu
faloidin

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

jedro (9)

A

hematoksilin (modro)
azansko (rdeče)
feulgenova rkc
barvanje po giemsi
barvanje z acetokarminom
in situ hibridizacija
tripansko modrilo
imunooznačevanje
ISH

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

jedrna ovojnica

A

podaljšano osmiranje
imunooznačevanje

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

plazmalema

A

osmijev tetroksid za lipide, imunooznačevanje za proteine
PAS za glikokaliks

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

citoplazma

A

eozin (roza)
azansko (rumeno)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

ER

A

podaljšano osmiranje
encimska histokemija (dokaz za KDEL)
imunooznačevanje (dokaz za KDEL)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

GA

A

imunooznačevanje rezidencnih proteinov,
genski konstrukti z GFP

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

cis mrežje

A

podaljšano osmiranje
avtoradiografija (označimo monosaharide)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

cis cisterne

A

podaljsano osmiranje
avtoradiografija (označimo monosaharide)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

medialne cisterne

A

encimska histokemija (dokaz za NADPazo)
avtoradiografija

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

trans cisterne

A

encimska histokemija (dokaz za TPP)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

trans mrežje

A

encimska histokemija (dokaz za KF)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

mitohondrij

A

encimska histokemija (sukcinska dehidrogenaza, ATPaza)
imunooznačevanje za proteine dihalne verige, sukcinsko dehidrogenazo ali ATPazo
Janusovo zelenilo
Feulgenova rkc
In situ hibridizacija
citokrom oksidaza

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

peroksisom

A

encimska histokemija ali imunozonačevanje (dokaz aktivne katalaze)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

lizosom

A

encimska histokemija za dokaz KF ali imunooznačevanje za dokaz KF
transfekcija celic z rekombinantno DNA

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

kisli proteoglikani

A

alciansko modrilo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

nevtralni proteoglikani in enostavni polisahardi

A

PAS

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

nenasičene maščobne kisline

A

osmijev tetroksid

21
Q

maščobne kaplje

A

sudan, sudan barvila

22
Q

DNA

A

Feulgenova rkc
In situ hibridizacija
avtoradiografija (timidin, za podvojevanje)
imunooznaevanje proti Brdu, za podvojevanje)

23
Q

kromosomi

A

barvanje po Giemsi (g proge), acetokarmin, reverzno barvanje (r proge), barvanje s kvinakrinom (q proge)
in situ hibridizacija (DNA sonde na celoten kromosom)

24
Q

nekroza

A

tripansko modrilo (jedra celic s poškodovano plazmalemo se obarvajo modro)

25
apoptoza
metoda TUNEL, imunooznačevanje proti aktivnim hidrolitičnim encimom kaspaz
26
jedrna lamina
imunooznačevanje proti lamininu
27
bazalna lamina
PAS reakcija imunooznačevanje proti kolagen IV, laminin, perlekan, nidogen, GAG, proteoglikani
28
encimska histokemija + kakšna fiksacija
substrat za encim, nastane primarni rkc produkt (neobarvan), po rkc z reagentom nastane končni rkc produkt ki je obarvan šibka fiksacija z formaldehidom ali glutaraldehidom, poveča permeablinost membran)
29
imunooznačevanje, kaj so označevalci
protitelesa se vežejo na antigen inkubiramo v primarnih protitelesih in nato še v označnih sekundarnih protitelesih fluorokrom, encim, koloidno zlato pri el. mkr. fiksacija
30
avtoradiografija (kako pri dna)
molekule z radioaktivnimi izotopi tkivo fiksiramo, narežemo, fotografksa emulzija beta delci ki se emitirajo reducirajo srebrove ione v elementarno srebro dna podvajanje, označen timidin (čeprav boljše IO proti BrdU)
31
in situ hibridizacija
verigi se ločita, inkubacija v mediju z enojnimi verigami, sonda, na sondi označevalec (radioaktivni izotop, encim, fluorokrom, antigen)
32
TUNEL
pri apoptozi pride do fragmentacije DNA, označimo proste konce s TdT vežemo molekule označene s fluorokromom, biotinom ali digoksigeninom na proste konce dna, potem to pokažemo z IO
33
rekombinantna DNA
izoliran gen vnesemo v celico, sestavljena iz reporterskega gena GreenFluorecenceProtein in regulatorne regije v celici se izrazi fluorescenlni protein lahko vnesemo tudi siRNA ali protitelesa
34
kemijska fiksacija + barvanje
fiksacija izpiranje s pufrom dehidracija v etanolih ksilol tekoč parafin rezanje z mikrotomom prenos v ksilol, odstranitev parafina prenos v etanol hidracija barvanje izpiranje z destilirano vodo ksilol kanadski balzam ali smola krovnik
35
fizikalna fiksacija
rahla kemijska fiksacija prekritje z OCT zamrznjene rezine (kriomikrotom) dotaknemo z objektnikom na sobni T
36
debelina parafinske rezine
3-10 mikrometrov
37
debelina poltanke rezine
1 mikrometer
38
debelina ultraranke rezine
50-100 nanometrov
39
priprava ultratankih rezin
ultramikrotom, kadička z vodo 1. primarna fiksacija (glutaraldehid ali formaldehid) 2. izpiranje s pufrom 3. sekundarna fiksacija s osmijevim tetroksidom 4. dehidracija z etanoli 5. vklop v epon
40
feulgenova rkc
NUKLEINSKE KISLINE inkubacija v HCL, proste aldehidne skupine, veže se gor schiffov reagent jedra in mitohondriji so rdeče vijolični
41
PAS
OGLIJIKOVI HIDRATI jodova kislina, nastanek prostih aldehisnih skupin, schiffov reagent proteoglikani, glikogen, škrob, celuloza so rdeče vijolični
42
alciansko modrilo
OGLJIKOVI HIDRARI kisli proteoglikani v modro
43
osmijev tetroksid
LIPIDI dvojne vezi nenasč mašč kislin, reducira se na nižje črno obarvane osmijeve okside tudi fiksira, težka kovina
44
sudan
LIPIDI bolje se topijo v maščobah kot v etanolu, zato difundirajo v mašč kaplje
45
ABC
vrsta IO, biotin ima afiniteto do vezave na acvidin na avidin je vezana tudi peroksidaza, potem to z substratom DAB obarvamo, prej je treba se inkubirat v Hcl
46
kaj se sintetizira na gER
proteini gER, GA, lizosomov in plazmaleme
47
kaj se sintetizira na prostih ribosomih
citosol, citoskelet, mitohondrij, peroksisom
48
toluidinsko modrilo obarva
kisle strukture, nukleinske kisline z modro, polisaharidne z vijolično, barvanje kromosomov
49
debelina zamrznjene rezine
100-500nm