Técnica do Patch Clamp - Tipos Flashcards
Técnica do Patch Clamp - Tipos 4
On-Cell
Inside-Out
Whole-Cell
Outside-Out
Técnica do Patch Clamp - On-Cell 2
Sucção → até formar o patch (retalho) de membrana
Você pode registrar a corrente que passa pelo canal succionado
Técnica do Patch Clamp - Inside-Out 2/*
O selo é tão forte → que quando você puxa a micropipeta → ela arrebenta a membrana
Lado de dentro da membrana → forma um patch (retalho de membrana)
*Ao arrebentar a membrana → fica somente o retalho preso na micropipeta
Técnica do Patch Clamp - Inside-Out
Vantagem → ?
Desvantagem → ?
Técnica do Patch Clamp - Inside-Out
Vantagem → permite controlar o potencial do patch de membrana
Desvantagem → se eu quiser estudar uma droga que age do lado de dentro do eletrodo, é mto difícil colocar a droga lá (limitando a técnica)
Técnica do Patch Clamp - Whole-Cell 2/*
A partir do On-Cell → faz mais sucção → de forma a arrebentar o retalho de membrana → mantendo a célula inteira grudada à micropipeta (sem perder o selo)
O patch → é a célula inteira
*como o empalamento só q sem arrebentar a membrana
Whole-Cell - Vantagem 1/2/*
Permite registrar:
→ potencial de membrana
→ corrente iônica da membrana total
*o mais utilizado no mundo (pois é o modo fisiológico)
Técnica do Patch Clamp - Outside-Out 2
A partir do Whole-Cell → ao puxar agora o eletrodo → o pedaço de membrana vai sendo esticado até arrebentar a membrana
Quando arrebenta → ela re-sela com o lado de fora olhando pra fora
Outside-Out - Vantagem
Imita o citoplasma (permite jogar droga etc → e age do lado certo)
On-Cell → ?
Inside Out → ?
Whole-Cell → ?
Outside-Out → ?
On-Cell → sucção até formar patch (retalho) de membrana
Inside Out → puxa micropipeta e arrebenta a membrana (lado de dentro do canal ta olhando pra fora da pipeta)
Whole-Cell → sucção de forma que arrebenta o retalho de membrana (lado de dentro do canal olhando pra dentro da pipeta)
Outside-Out → puxar o eletrodo até esticar e arrebentar a membrana (lado de fora do canal olhando pra fora)
Whole-Cell → sucção de forma que arrebenta o retalho de membrana: 2
Permite medir corrente iônica e potencial de membrana
Deve usar solução iônica que se assemelha ao citoplasma
Técnica do Patch Clamp - Registro de Canal Unitário
Todos os 3 → On-Cell / Inside-Out / Outside-Out
Técnica do Patch Clamp - Registro de Célula Completa
Whole-Cell
