Theorie 1 Flashcards
(35 cards)
G1-Phase
Folgt auf Mitose-
Zellwachstum-
ErgänzungfehlenderKompartimente
- Zelle können in G0-Phaseübergehen,wenn keine weitereVermehrung vonZellenvorgesehenist-
Bei Menschen ca. 8Stunden
S-Phase
Synthesephase
Replikation derDNA im Zellkern
Chromosomen bestehen am Ende aus 2Chromatiden
Beim Menschenca. 6 Stunden
G2-Phase
Vorbereitung aufZellteilung-
Synthese von RNAMolekülen undzellteilungsspezifischenProteinen
- Kontakt zu Nachbarzellenwird gelöst
- Zelle rundet sich ab undvergrößert sich durchFlüssigkeitsaufnahme
- Kontrollpunkt: Wurde dieDANN vollständig undrichtigrepliziert?
Prophase
- Chromatinkondensiert, Chromosomen werdensichtbar
- Spindelapparat bildet sich
Metaphase
- Anlagerung der Spindelfasern
- Positionierung an der Äquatorialebene
Anaphase
- Spindelfasern verkürzen sich
- Chromatide wandern zu den Polen
Extrazelluläre Matrix
Wenn Zellen dicht im Gewebe aneinander liegen
Besteht aus 2:
- Formgebenden kollagene, retikuläre und elastische Fasern
- Lose ungeformte amorphe Grundsubstanz, bestehend aus Proteoglykankomplexenund/oder Glykoproteinen
Viabilitäts-Färbung von Zellen
Mit: Kristallviolett( färbt Lebendezellen), Trypanblau (sauer, gelangt durch tote Zellen da dort die Membranen kaputt ist, färbt das cytosol, tot und lebenden können gut Unterschieden werden)
Apoptose und Nekrose
Diese Zelle existiert am Ende nicht mehr.
Apoptose
-Programmierer zelltod
Ablauf der Apoptose:
- Zelle schrumpft
- Kondensation und Degradierung der DNA
- Zelle zersetzt sich in Kleinteile und schließt diese in Membranhüllen (Apoptosekörper)
Nekrose
-irreversibler Ausfall der Zellfunktion un dann morphologische Veränderung
Ablauf der Nekrose:
- Zelle wird irreversibel geschädigt
- Zellwand bricht auf
- Zellinhalt tritt aus
- (Immunreaktion wird ausgelöst)
Sterbliche und permanente Zellkulturen
Hayflickgrenze (Max.50 teilungen) (telomere verkürzen sich mit jeder teilung)
Tumorzellen: Eigenschaften unendlich oft teilen
Adhärente Zellkulturen (4 Phasen)
adsorbieren
Kontakt
heftet
ausbreiten und proliferieren
Wachsen: Monolayer, Multilayer, Sphäroid (dreidimensional)
Müssen beim Passagieren abgelöst werden von der Oberfläche = Detachment
Detachment
Trypsin:
Serinprotease und katalysiert somit die hydrolytische Spaltung von Proteinenund Peptiden innerhalb des zu spaltenden Moleküls.
Mit pns waschen um Wirkung zu neutralisieren
Beschleunigen: Kombination mit EDTA (bindet die zweiwertigen Kationen (Mg2+, Ca2+), welchefür dieAdsorption derZellen an die Substratoberfläche essentiell sind.)
-Nur mit PBS Stoppbar wenn EDTA im Spiel ist (PBS stoppt EDTA Wirkung)
- reines Trybisn stoppen mit Medium
Accutase:
Enzym besteht aus einer Mischung aus proteolytischen undkollagenolytischen Enzymen.
-Schonender als Trypsin(schädigt keine Oberflächenproteine auf dauer)
-muss nicht Inaktiviert werden (verdünnen mit PBS oder Medium)
Suspensionszellen
Schwimmen als Suspension im Medium (z.b Lympozyten)
Zellkultur Inhalte
Proteine
Puffer
Aminosäuren
pH-Indikato
rAnorganische Salze
Lipide
Serum
Vitamine
Spurenelemente
Puffersysteme in Zellkulturmedien
- PH wert verschiebt sich durch anfallende Stoffwechselprodukte
- puffersystem damit ph wert stabil bleibt (verhindert cytotoxischen PH-Wert)
- Bsp. Kohlensäure-BicarbonatPuffersystem ( Bicarbonat -> zu starken Anstieg des pH-Wert , weshalb
Jemehr desto höher die CO2 Begasung im Brutschrank - ohne co2 ist das Puffersystem nicht möglich
- Hohe Proliferationsrate = Mehr NaHCO3 = höhere CO2 Begasung
PH-WERT
7,2 und 7,4.
Phenolrot=> gibt an wo der Ph-Wert liegt und wie verbraucht das Medium ist
Gelb=6,5
Orange =7
Rot=7,4
Pink=7,6
Lila=7,8
Aminosäuren
essentielle: Lebensnotwendig,können nicht vom Körperselbst hergestellt werden (müssen zugefügt werden)
nicht essentielle (NEAA) : Lebensnotwendig,können vom Körperselbstherstellen, zusetzen; begünstigt Zellwachstum
Serum
Wachstumsfaktoren, Vitaminen, Co-Faktoren, Lipiden, Proteinen,…
Seren aus Rindern, Föten FCS= Fetal Calf Serum)
Beinhaltet über 1000 unterschiedliche Proteinen
Jeälter desto mehr Antikörper enthalten (könnte störend sein) -> Hitzeinaktivierung 30min bei 56°
Vitamine +Antioxidation
Katalysierende Wirkung, Bestandteile von co-Enzyme
Antioxidative V. Sind in der Lage freie Radikale zu binden -> positiverEfekt auf das Zellwachstum
L-Glutamin
Wichtige Aminosäure
Vorallem Zellen mit einer hohen Proliferationsrate benötigen viel Glutamin für das Wachstum
Abbauprodukt: Ammoniak, regelmäßig wechsel vom Medium nötig
Alternative: Dipeptide, müssen erst spalten um Glutamin zu erhalten
Spurenelemente
Eisen, Kupfer, Zink, Mangan, Kobalt,Iod, Fluor
Lipide
Wichtige für Entstehung neuer Zellen
Wichtige rolle bei der Signalübertragung
Energiespeicher
