Theorie 1

Question 1

Sterilwerkbank

Answer 1

• KeinPersonenschutz
• Produktschutz
• Nicht für steriles Arbeiten geeignet

Question 2

Sicherheitswerkbank Klasse 1

Answer 2

• Personenschutz
• Kein Produktschutz
• Für steriles Arbeiten nicht geeignet

Question 3

Sicherheitswerkbank Klasse 2

Answer 3

• Personenschutz
• Produktschutz
• Für steriles Arbeiten geeignet

Question 4

Sicherheitswerkbank Klasse 3

Answer 4

• Personenschutz
• Produktschutz
• Räumliche Trennung von Produkt und Person
• Arbeiten mithochpathogenen Organismen
• Für steriles Arbeiten geeignet

Question 5

Regel sterilbank

Answer 5

PSA: Kittel, Schutzbrille, Handschuhe
- Möglichst wenig Materialien mit unter die Sicherheitswerkbank zu nehmen, um den Luftstromnicht zu stark zu verändern und alles vorher desinfizieren
-Möglichst schnelle Bewegungen mit Armen und Händen vermeiden
- Nicht über offene Behälter/Deckel greifen
- Luftschlitzt nicht zustellen
- Arme nicht in der Sicherheitswerkbank / auf den Luftschlitzen ablegen
- Nicht in die Sicherheitswerkbank sprechen oder niesen
- Sicherheitswerkbank nach der Arbeit aufräumen, reinigen und desinfizieren

Question 6

CO2-Brutschränke

Answer 6

37°C
Co2 wichtige rolle im Puffersystem, trägt dazu bei, dass der ph wert stabil bleibt

Question 7

Mikroskope: Folgende Dinge können mikroskopisch betrachtet werden

Answer 7

:- Wie konfluent/gut sind die Zellen gewachsen?- Liegt eineKontamination vor?- Wie ist die Morphologie der Zellen? Sehen alle Zellen gleich aus? Gibt es großeUnterschiede?

Question 8

Inverse Durchlicht-Mikroskope

Answer 8

Lichtquelle von oben
Objektivrevolver unten
Okulare (invers)
Ablagefläche für Zellkulturgefäß
Phase Kontrast

Question 9

Zellkulturflaschen

Answer 9

Faustregel zur Einsaat der Zellen:- Adhärente Zellen: 105 Zellen pro cm2 Wachstumsfläche- Suspensionszellen: 1-2 x 106 Zellen/mL

Question 10

Massenzellkulturen

Answer 10

Hohe ausbeuten erlangen

Question 11

Spinnerflaschen (Suspensionszellen)

Answer 11

• Teflonrührer im Zentrum der Flasche (Gasaustausch der Zellen wird positivbeeinflusst; ca. 30 Umdrehungen/Minute)
• 250 mL bis 20 L
• Ausbeute: 1-2 x 106 Zellen/mL

Question 12

Rollerflaschen (Adhärente Zellen)

Answer 12

• Wachstumsfläche ca. 2000 cm2
• Wird um Längsachse gedreht während Kultivierung (ca. 2 Umdreheungen/Stunde)
• Ausbeute: 1-2 x 105 Zellen pro cm2

Question 13

Wannenstapel (Cell factory; Adhärente Zellen)

Answer 13

• Bis zu 10 Ebenen möglich
• Wachstumsfläche von 660 cm2 bis zu 4000 cm2
• Ausbeute: 1-2 x 105 Zellen pro cm2

Question 14

Micro Carrier (Suspendierte adhärente Zellen)

Answer 14

• Kleine Kugeln, die im Medium schwimmen
• Bis zu 10.000 cm2 Fläche/g
• Bestehen z.B. aus Dextran

Question 15

Bioreaktoren / Fermenter (Suspensionszellen)

Answer 15

0,5 L bis 20.000 L
- Können sich selbst regulieren durchangeschlossene pH-Elektroden und Zugabe-Schläuche (frisches Medium etc.)

Question 16

Kryokonservierung

Answer 16

Dabei ist jedoch darauf zu achten, dass Zellen im richtigenMedium eingefroren werden. Es wird dem Medium eine Art „Frostschutzmittel“ (=Kryoprotektiva) zugesetzt, sonst: eiskristalle, welche die Zelle zum platzen bringen würden (sterben)

Verwendet wird: DMSO oder Glycerin

Im Gefrierebehälter, äußere wand mit Iso-propanol, schonendes Einfrieren

Ca. 24h bei -80°C -> dann bei -152°C