TP 3 Flashcards

1
Q

Comment obtient-on la quantité de matière de lysozyme à partir de l’absorbance du cristal?

A

En utilisant la loi Beer-Lambert.

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2
Q

Pourquoi pouvons nous mesurer l’absorbance à 230nm du cristal ici?

A

Car le cristal n’est constitué que d’une seule espèce de molécule.

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3
Q

Pour les protéines absorbent-elles à 230nm?

A

A cause des acides aminés possédants un cycle aromatique dans leur chaîne latérale.

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4
Q

Qu’est-ce que le diagramme de phase?

A

Un diagramme de phase est une représentation graphique représentant les domaines de l’état physique d’un système.

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5
Q

Quelle est la concentration en agent cristallisant du réservoir par rapport à celle dans la goutte?

A

Elle est plus élevé.

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6
Q

Où trouve-t-on naturellement la BSA?

A

Dans le sérum bovin.

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7
Q

A quoi correspond le rendement?

A

Le rendement correspond au pourcentage d’enzyme conservé dans la fraction finale par rapport à la fraction de départ.

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8
Q

Qu’est-ce que le lysozyme? Quel est son rôle?

A

Le lysozyme est une enzyme aux propriétés antibactérienne.

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9
Q

Qu’est-ce qu’une maille?

A

Une unité élémentaire qui forme le cristal. Elle est constitué de plusieurs molécules.

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10
Q

Quelle forme géométrique à la maille ici?

A

Un pavé droit.

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11
Q

Quelles informations peuvent être apportées par la résolution de la structure d’une macromolécule?

A
  • Son activité
  • Sa taille
  • Son organisation tridimensionnelle
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12
Q

Comment peut-on calculer le nombre de molécules à partir du nombre d’Avogadro?

A

En multipliant le nombre de mole par le nombre d’Avogadro.

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13
Q

Comment appelle-t-on une expérience où nous mesurons une donnée en fonction du temps?

A

Une cinétique.

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14
Q

Quel(s) test(s) déjà mis en œuvre précédemment (TP1-2) est à nouveau utilisé ici?

A
  • Le test de Bradford

- Le test enzymatique

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15
Q

Comme pour le TP2, nous observons à nouveau l’action du lysozyme sur les bactéries. Qu’est-ce qui change dans notre expérience par rapport à celle réalisée au TP2?

A

Nous regardons l’action du lysozyme au cours du temps.

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16
Q

A quoi correspond l’enrichissement?

A

Il correspond à la proportion de la protéine d’intérêt dans la fraction finale par rapport aux protéines totales initiales.

17
Q

A quoi sert l’obtention d’un cristal?

A

L’organisation régulière des molécules dans un cristal permet de déterminer leur structure tridimensionnelle par cristallographie …

18
Q

Qu’est-ce que l’électrophorèse?

A
  • Une technique de séparation des molécules qui se fait en fonction de la charge électrique et de la taille de ces dernières.
  • C’est une technique permettant de séparer des fragments d’ADN en fonction de leur taille et de leur encombrement.
19
Q

Quel est le principe du test de Bradford?

A

Le rest de Bradford est dosage colorimétrique reposant sur le changement de couleur du bleu de Coomassie après liaisons avec les AA basiques et hydrophobe des protéines.

20
Q

Pourquoi cherchons-nous à calculer le rendement et l’enrichissement?

A

Ces 2 valeurs nous permettent de conclure sur l’efficacité de notre purification.

21
Q

Quelles informations peuvent être apportées par la résolution de la structure d’une macromolécule?

A
  • Son organisation tridimensionnelle
  • Sa saille
  • Son activité
22
Q

Pour calculer le rendement de quelles valeurs ai-je besoin?

A
  • De l’activité enzymatique et du volume des fractions F0 et E1.
  • Des valeurs d’activités totales des fractions F0 et E1.