Unidad 23 proteínas recombinantes Flashcards

1
Q

Biofarmaco

A

Molécula biológica con fines terapéuticos obtenida a partir de un organismo vivo

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2
Q

Ventajas d ebiofarmacos

A

Mayor acción terapeutica
Menos reacciones secundarias
Tratamientos eficaces y seguros

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3
Q

Por que los biofarmacos tienen menos reacciones secundarias

A

Son homolgas a las producidas por el organismo

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4
Q

La gran mayoria de biofarmaso son

A

proteínas recombinantes

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5
Q

Obtención de proteínas recombinantes

A

Inserción de gen de proteína de interes en organismo diferente

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6
Q

Ventajas de proteínas recombinantes

A

Permite obtener altas cantidades de proteína
Bajos costos de producción
Alta pureza

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7
Q

Las proteínas recombinantes son especificas contrapadecimientos que antes se condieraban incurables

A

Si, como el interferon beta con la esclerosis multiple

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8
Q

Sistemas procariotes

A

Expresan proteínas solubles, en forma de agregados intracelulares o cuerpos de inclusión
Sin estructuración in vitro

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9
Q

Sistemas ecuariotes

A

Realizan modificaciones postraduccionales
Hace que se asemejen a las versiones endógenas

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10
Q

Uno de los modles mas simples para producción de proteínas recombinantes es

A

Escherichia coli

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11
Q

Ventajas de escherichia coli

A

Alcanzan los más altos niveles de productivifad de proteínas de interés

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12
Q

Desventajas de escherichis coli

A

La selección de oriteína a producir
No pueden hacer la amyor parte de modificaciones postraduccionales

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13
Q

Que bacterias son usualmente seleccionadas

A

cepas derivadas E. coli K12

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14
Q

Cepas con baja producción de subproductos

A

Populares por su capacidad de cercer en altas densidades y con altas productividades

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15
Q

Levaduras más usadas

A

Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha y Pichia pastoris

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16
Q

Caracteristicas de levaduras como sistema bacteriano

A

Alta velocidad de crecimiento
Adaptibilidad
Alcanza altas concentarciones celulares
Alta productividad
No produce endotoxinas
Pueden hacer glicosilaciones

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17
Q

Proteínas recombinantes de células de mamifero

A

Ovarios de hamster chino
Riñon de hamster bebé

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18
Q

Desventajas de proteínas recombinantes de células de mamiferos

A

Mas costoso

19
Q

Ventajas de proteínas recombinantes de células de mamiferos

A

Producen proteínas bien plegadas y modificaciones postraduccionales para ser similares a endogenas

20
Q

Inteferon beta 1-b

A

Producido en E.coli
Versión ligeramente modificada de la proteína natural humana
Serina en vez de cisteína
Sin glicosilación y metionina N-terminal

21
Q

Interferon beta 1-a

A

Producido en líneas celulares de mmifero
Glicosilada
Visualmente igual que proteínaa nativa humana

22
Q

Interferones beta

A

1-a y 1-b
Mismas carcateristicas fisico estructurales y fisico quimicas

1-a tiene mayor actividad antiviral, antiproliferativa e inmunomoduladora

23
Q

Proceso de producción de proteínas recombinantes

A

-Selección e identificación de gen
-Colocar gen en plásmido
-Insertar plásmido en hospedero
-Aislar copias
-Hospededors con mayor producción son subcultivadas, se colocan en crioviales y se refrigeran a -80°C (banco maestro)

24
Q

Banco maestro

A

Colección de viales criopreservados
de hospedadores que producen proteínas recombinantes

Permite iniciar el proceso de producción en cualquier momento

25
Q

Banco de trabajo

A

Conjunto de células derivadas del banco maestro
Utilizadas específicamente para la producción a corto y mediano plazo

26
Q

cuantos viales contiene un banco maestro

A

100

27
Q

Como se conserva un banco maestro

A

Con nitrogeno liquido o -80°C

28
Q

Cuantos viales salen de un banco mestro en total

A

De vial de banco maestro sale un banco de trabajo de 100 viales
En total de un banco maestro pueden salir 10,000 lotes

29
Q

Para que son muestrados los bancos

A

Analizar la viabilidad, pureza e identidad celular, estabilidad
genética y fenotipica
Caracterizar profucto obtenido

30
Q

La mayoria de los biofarmaceuticos son producidos a

A

Bajas cantidades

31
Q

Estabilidad de clona

A

Cantidad de plásmidos disminuye al aumentar producción
Se ven afectados la productividad y costos

32
Q

Estudios para determinar cual es numero minimo de duplicaciones donde la productividad se mantiene constante

A

Para asegurar producción estable y eficiente y prevención de problemas de rendimiento

33
Q

Que puede afectar el volumen de cultivo

A

Por niveles de expresión de las proteínas en diferentes hospederos

Complejidad de proteínas al ser expresadas

34
Q

E. coli produce proteínas complejas

A

No, tiene alta producción de protinas con baja complejidad

35
Q

Las células animales producen proteínas complejas

A

Si, tienen baja producción de rpoteínas complejas

36
Q

Purificación

A

Busca obtener mayor cantidad de producto del original con menor desperdicio posible y con la pureza exigida
Aspecto más costoso

37
Q

Procesos de separación y purificación de productos

A

Separación de insolubles por filtración
Centrifugación
Separaciones primarias por extracción

38
Q

Pureza final de proteínas terapeuticas

A

90%

39
Q

Purificación de proteinas producidas de forma intracelular

A

Por centrifugación para desechar sobrenadante
Después ruptura celular para recuperar proteínas

40
Q

Metodo de purificación mas usado

A

Cromatografico por su facilidad en escalamiento, reproducibilidad y facil validación

41
Q

Proteína heterologa

A

Expresada en un organismo, pero que es originaria de otro organismo diferente

42
Q

Por que es importante la caracterización analitica y bioquimica de proteínas producidas

A

Para determinar y comprobar la indetidad molecular lote por lote

43
Q

Carcaterización analitca de proteínas en farmacopeas

A

Determinación de peso molecular
Determinación de punto isoeléctrico
Analisis de pureza por cromatografia
Determinación de isoformas

44
Q

Para que se implementa la proteomica

A

-Determinar similitudes entre biofarmacos y su identidad
-Secuenciación de aminoácidos
-Fragmentación de aminoácidos por espectrometria de mesas
-Determinación de peso molecular y propiedades biofisicas