Unidad 23 proteínas recombinantes

Question 1

Biofarmaco

Answer 1

Molécula biológica con fines terapéuticos obtenida a partir de un organismo vivo

Question 2

Ventajas d ebiofarmacos

Answer 2

Mayor acción terapeutica
Menos reacciones secundarias
Tratamientos eficaces y seguros

Question 3

Por que los biofarmacos tienen menos reacciones secundarias

Answer 3

Son homolgas a las producidas por el organismo

Question 4

La gran mayoria de biofarmaso son

Answer 4

proteínas recombinantes

Question 5

Obtención de proteínas recombinantes

Answer 5

Inserción de gen de proteína de interes en organismo diferente

Question 6

Ventajas de proteínas recombinantes

Answer 6

Permite obtener altas cantidades de proteína
Bajos costos de producción
Alta pureza

Question 7

Las proteínas recombinantes son especificas contrapadecimientos que antes se condieraban incurables

Answer 7

Si, como el interferon beta con la esclerosis multiple

Question 8

Sistemas procariotes

Answer 8

Expresan proteínas solubles, en forma de agregados intracelulares o cuerpos de inclusión
Sin estructuración in vitro

Question 9

Sistemas ecuariotes

Answer 9

Realizan modificaciones postraduccionales
Hace que se asemejen a las versiones endógenas

Question 10

Uno de los modles mas simples para producción de proteínas recombinantes es

Answer 10

Escherichia coli

Question 11

Ventajas de escherichia coli

Answer 11

Alcanzan los más altos niveles de productivifad de proteínas de interés

Question 12

Desventajas de escherichis coli

Answer 12

La selección de oriteína a producir
No pueden hacer la amyor parte de modificaciones postraduccionales

Question 13

Que bacterias son usualmente seleccionadas

Answer 13

cepas derivadas E. coli K12

Question 14

Cepas con baja producción de subproductos

Answer 14

Populares por su capacidad de cercer en altas densidades y con altas productividades

Question 15

Levaduras más usadas

Answer 15

Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha y Pichia pastoris

Question 16

Caracteristicas de levaduras como sistema bacteriano

Answer 16

Alta velocidad de crecimiento
Adaptibilidad
Alcanza altas concentarciones celulares
Alta productividad
No produce endotoxinas
Pueden hacer glicosilaciones

Question 17

Proteínas recombinantes de células de mamifero

Answer 17

Ovarios de hamster chino
Riñon de hamster bebé

Question 18

Desventajas de proteínas recombinantes de células de mamiferos

Answer 18

Mas costoso

Question 19

Ventajas de proteínas recombinantes de células de mamiferos

Answer 19

Producen proteínas bien plegadas y modificaciones postraduccionales para ser similares a endogenas

Question 20

Inteferon beta 1-b

Answer 20

Producido en E.coli
Versión ligeramente modificada de la proteína natural humana
Serina en vez de cisteína
Sin glicosilación y metionina N-terminal

Question 21

Interferon beta 1-a

Answer 21

Producido en líneas celulares de mmifero
Glicosilada
Visualmente igual que proteínaa nativa humana

Question 22

Interferones beta

Answer 22

1-a y 1-b
Mismas carcateristicas fisico estructurales y fisico quimicas

1-a tiene mayor actividad antiviral, antiproliferativa e inmunomoduladora

Question 23

Proceso de producción de proteínas recombinantes

Answer 23

-Selección e identificación de gen
-Colocar gen en plásmido
-Insertar plásmido en hospedero
-Aislar copias
-Hospededors con mayor producción son subcultivadas, se colocan en crioviales y se refrigeran a -80°C (banco maestro)

Question 24

Banco maestro

Answer 24

Colección de viales criopreservados
de hospedadores que producen proteínas recombinantes

Permite iniciar el proceso de producción en cualquier momento

Question 25

Banco de trabajo

Answer 25

Conjunto de células derivadas del banco maestro Utilizadas específicamente para la producción a corto y mediano plazo

Question 26

cuantos viales contiene un banco maestro

Answer 26

100

Question 27

Como se conserva un banco maestro

Answer 27

Con nitrogeno liquido o -80°C

Question 28

Cuantos viales salen de un banco mestro en total

Answer 28

De vial de banco maestro sale un banco de trabajo de 100 viales En total de un banco maestro pueden salir 10,000 lotes

Question 29

Para que son muestrados los bancos

Answer 29

Analizar la viabilidad, pureza e identidad celular, estabilidad genética y fenotipica Caracterizar profucto obtenido

Question 30

La mayoria de los biofarmaceuticos son producidos a

Answer 30

Bajas cantidades

Question 31

Estabilidad de clona

Answer 31

Cantidad de plásmidos disminuye al aumentar producción Se ven afectados la productividad y costos

Question 32

Estudios para determinar cual es numero minimo de duplicaciones donde la productividad se mantiene constante

Answer 32

Para asegurar producción estable y eficiente y prevención de problemas de rendimiento

Question 33

Que puede afectar el volumen de cultivo

Answer 33

Por niveles de expresión de las proteínas en diferentes hospederos Complejidad de proteínas al ser expresadas

Question 34

E. coli produce proteínas complejas

Answer 34

No, tiene alta producción de protinas con baja complejidad

Question 35

Las células animales producen proteínas complejas

Answer 35

Si, tienen baja producción de rpoteínas complejas

Question 36

Purificación

Answer 36

Busca obtener mayor cantidad de producto del original con menor desperdicio posible y con la pureza exigida Aspecto más costoso

Question 37

Procesos de separación y purificación de productos

Answer 37

Separación de insolubles por filtración Centrifugación Separaciones primarias por extracción

Question 38

Pureza final de proteínas terapeuticas

Answer 38

90%

Question 39

Purificación de proteinas producidas de forma intracelular

Answer 39

Por centrifugación para desechar sobrenadante Después ruptura celular para recuperar proteínas

Question 40

Metodo de purificación mas usado

Answer 40

Cromatografico por su facilidad en escalamiento, reproducibilidad y facil validación

Question 41

Proteína heterologa

Answer 41

Expresada en un organismo, pero que es originaria de otro organismo diferente

Question 42

Por que es importante la caracterización analitica y bioquimica de proteínas producidas

Answer 42

Para determinar y comprobar la indetidad molecular lote por lote

Question 43

Carcaterización analitca de proteínas en farmacopeas

Answer 43

Determinación de peso molecular Determinación de punto isoeléctrico Analisis de pureza por cromatografia Determinación de isoformas

Question 44

Para que se implementa la proteomica

Answer 44

-Determinar similitudes entre biofarmacos y su identidad -Secuenciación de aminoácidos -Fragmentación de aminoácidos por espectrometria de mesas -Determinación de peso molecular y propiedades biofisicas