BM16 Flashcards

(41 cards)

1
Q

EN ABSENCE DE PROTÉINES RÉGULATRICES,
CHAQUE GÈNE A UN NIVEAU D’EXPRESSION FIXE, Par quoi est-il déterminé?

A

PAR L’AFFINITÉ DU PROMOTEUR AU FACTEUR D’ INITIATION sigma70

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2
Q

À quel stade se fait majoritairement la régulation (transcription bactéries)?

A

Au stade de l’initiation (mais existe aussi pendant les phases d’élongation et de terminaison

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3
Q

Combien y a-t-il de gènes à l’initiation?

A

Un seul gène, un seul promoteur à inhiber

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4
Q

Que sont les signaux extracellulaires?

A

MOLÉCULES PRÉSENTES DANS LE MILIEU DE
CROISSANCE DE LA BACTÉRIE ; FACTEURS
ABIOTIQUES

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5
Q

Par quoi sont transmis les signaux extracellulaires?

A

DES PROTÉINES DE RÉGULATION :
ACTIVATRICES / INHIBITRICES

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6
Q

Que font les protéines de régulation activatrices/inhibitrices?

A

CELLES-CI SE LIENT À L’ADN,
SUR (INHIBITRICES) LA RÉGION PROMOTRICE
OU PRÈS (ACTIVATRICES) DE LA R. P.
OU MÊME À PROXIMITÉ DU GÈNE CIBLÉ.

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7
Q

Liaison ARN-Pol/promoteur en absence de protéines activatrices

A

LA LIAISON DE L’ARN POLYMÉRASE / s À DE NOMBREUSES
RÉGIONS PROMOTRICES EST ASSEZ RARE / TROP RARE

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8
Q

MÉCANISME COURANT EN ABSENCE
D’UN OU PLUSIEURS DES ÉLÉMENTS
DU PROMOTEUR

A

NIVEAU BASAL DE TRANSCRIPTION

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9
Q

LA LIAISON D’UNE PROTÉINE INHIBITRICE SUR LA RÉGION DE LIAISON DE L’ARN POLYMÉRASE / s

A

L’OPÉRATEUR,
SUFFIT POUR EMPÊCHER LA TRANSCRIPTION.

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10
Q

POUR DÉCLENCHER LA TRANSCRIPTION, LA FONCTION D’UNE PROTÉINE
ACTIVATRICE…

A

D’AIDER L’ARN POLYMÉRASE / s À SE LIER EFFICACEMENT
AU PROMOTEUR
= RECRUTEMENT DE L’ARN POLYMÉRASE.
INTERACTION FAVORISE L’OUVERTURE DU COMPLEXE ARN-POL / ADN

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11
Q

Qu’est-ce que l’isomérisation?

A

LA TRANSITION ENTRE COMPLEXE FERMÉ ET COMPLEXE OUVERT

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12
Q

POUR D’AUTRES PROMOTEURS, L’ARN POLYMÉRASE SE LIE CORRECTEMENT,
MAIS LA TRANSITION ENTRE COMPLEXE FERMÉ ET COMPLEXE OUVERT
EST IMPOSSIBLE,
SAUF AVEC L’AIDE D’UNE
PROTÉINE ACTIVATRICE. Que fait cette protéine?

A

CE TYPE DE PROTÉINE ACTIVATRICE STIMULE
LE CHANGEMENT DE CONFORMATION
DE L’ARN POLYMÉRASE SUR LE PROMOTEUR,
CE QUI DÉCLENCHE LA TRANSITION
DU COMPLEXE FERMÉ ® OUVERT

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13
Q

Qu’est-ce que le principe de l’allostérie?

A

CHANGEMENT DE CONFORMATION D’UNE PROTÉINE ENZYMATIQUE
INDUIT PAR LA LIAISON D’UNE AUTRE MOLÉCULE (Régulateur)

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14
Q

Que peut faire l’induction allostérique d’une protéine enzymatique?

A

ACTIVER
OU INHIBER LA FORMATION DU COMPLEXE ENZYME-SUBSTRAT

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15
Q

Que font les boucles d’ADN?

A

SONT NÉCESSAIRES POUR RAPPROCHER
UNE MOLÉCULE ACTIVATRICE DONT LE SITE DE LIAISON EST SITUÉ
À PLUSIEURS CENTAINES DE BASES (100 - 3000 PB)
DE LA RÉGION PROMOTRICE DU GÈNE CIBLÉ.

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16
Q

Les boucles d’ADN impliquent implique la coopération entre deux protéines. Lesquelles?

A

UNE PROTÉINE QUI FAVORISE LA COURBURE DE L’ADN
ET
LA PROTÉINE ACTIVATRICE.

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17
Q

Que fait l’opéron Lac?

A

RÉGULE LE MÉTABOLISME DU LACTOSE CHEZ Escherichia coli :
FORTEMENT ACTIVÉ QUAND [LACTOSE] +++ ET [GLUCOSE] - - -

18
Q

Promoteur de l’opéron Lac:

A

1) NE POSSÈDE PAS D’ÉLÉMENT-UP
2) SA SÉQUENCE -35 N’EST PAS CONSERVÉE.
Þ MÊME SANS INHIBITEUR, L’ARN POLYMÉRASE / s
SE LIE MAL À SON PROMOTEUR
= FAIBLE NIVEAU DE TRANSCRIPTION.
= EXPRESSION BASALE DE L’OPÉRON Lac

19
Q

Quelles sont les deux protéines de liaison à l’ADN (régulateurs) de l’opéron Lac?

A

1 ACTIVATEUR = CAP (CATABOLITE ACTIVATOR PROTEIN)

1 RÉPRESSEUR = REP-Lac

20
Q

Que fait REP-Lac?

A

SE LIE À L’OPÉRATEUR Lac QUI
COUVRE UNE PARTIE DU PROMOTEUR
= EMPÊCHE L’ARN POLYMÉRASE / s DE
SE LIER À SON PROMOTEUR

21
Q

Qu’est-ce que l’activateur cap?

A

CAP EST UN DIMÈRE QUI, UNE FOIS LIÉ
À SON SITE ADN (60 pb EN AMONT DU START),
SE LIE ÉGALEMENT À L’ARN POLYMÉRASE
(LIAISON PROTÉINE-PROTÉINE)
= RECRUTE L’ARN POLYMÉRASE
À SON PROMOTEUR.
= EXPRESSION MAXIMALE DE L’OPÉRON Lac

22
Q

À quoi se lie Cap?

A

CAP POSSÈDE UNE RÉGION ACTIVATRICE QUI SE LIE
AU DOMAINE CARBOXY-TERMINAL DE L’HÉLICE a (aCTD), LUI-MÊME CONNECTÉ À
L’ARN POLYMÉRASE PAR UNE TIGE DE LIAISON FLEXIBLE

23
Q

À quoi se lie aCTD?

A

(1) À L’ÉLÉMENT UP (SI PRÉSENT) : liaison ADN-protéine,
(2) À CAP ET L’ADN VOISIN (SI UP ABSENT) : liaison protéine-protéine

24
Q

Cap possède un site de liaison supplémentaire. Que permet-il?

A

PERMET À L’ARN POLYMERASE
DE SE LIER AU PROMOTEUR.

25
Que fait REP-lac?
EMPÊCHE L’ARN POLYMÉRASE DE SE LIER À SON PROMOTEUR : SON SITE DE LIAISON, L’OPÉRATEUR Lac , RECOUVRE PARTIELLEMENT LE PROMOTEUR.
26
LA PLUPART DES FACTEURS PROTÉIQUES DE LIAISON À L’ADN UTILISENT LES MÊMES PROPRIÉTÉS :
1) LES HOMODIMÈRES SE LIENT À DES SITES QUI PRÉSENTENT DES SÉQUENCES RÉPÉTÉES ET INVERSÉES (2) CHACUN DES 2 MONOMÈRES FORME UN MOTIF «HÉLICE a - COUDE - HÉLICE a » QUI SE LIE À UN « 1/2 SITE », SYMÉTRIQUEMENT PAR RAPPORT AU CENTRE DU SITE DE LIAISON. 3) CHACUNE DES DEUX HÉLICES DE RECONNAISSANCE SE LOGE DANS LE SILLON MAJEUR = TAILLE D’UNE HÉLICE a. 4) LES CONTACTS ENTRE LES HÉLICES R (RECONNAISSANCE) DE CAP ET LE SOMMET DES BASES DE SON SITE DE LIAISON SE FONT PAR LIAISONS HYDROGÈNES L’HÉLICE S INTERAGIT AVEC L’EXOSQUELETTE DE L’ADN : STABILISE L’HÉLICE R
27
Qu'est-ce que l'alloctose?
PROVIENT DU LACTOSE TRANSFORMÉ PAR LA ß-GALACTOSIDASE : POSSIBLE CAR MÊME EN ABSENCE DE CAP, L’ARN POLYMÉRASE GAGNE PARFOIS LA COMPÉTITION CONTRE REP-Lac : L’ARN POLYMÉRASE SE LIE À SON PROMOTEUR ET PERMET UNE EXPRESSION RÉSIDUELLE DE L’OPÉRON Lac. = ELLE ASSURE UNE SYNTHÈSE MINIMALE DE ß-GALACTOSIDASE
28
Où se fait la liaison de l'alloctose à REP-Lac?
EN DEHORS DE SON SITE DE LIAISON À L’OPÉRATEUR.
29
Comment est régulée l'activité de CAP?
LE GLUCOSE DIMINUE LA CONCENTRATION DE L’AMP CYCLIQUE (AMPc). OR L’AMPc A UN EFFET ALLOSTÉRIQUE SUR CAP EN ABSENCE DE GLUCOSE : CAP-AMPc PEUT SE LIER À SON SITE ADN.
30
Vrai ou Faux. CAP sans AMPc peut se lier à son site ADN.
Faux
31
Quel est le substrat préférentiel?
Le glucose
32
Régulation de Rep-Lac et Cap:
(1) COMPÉTITION ENTRE ARN POL ET REP-LAC = EXPRESSION RÉSIDUELLE DE L’OPÉRON LACTOSE : L’ARN POL GAGNE TRÈS RAREMENT (2) L’ARN-Pol SE FIXE MAL = EXPRESSION BASALE DE L’OPÉRON LACTOSE
33
Que font NtrC et MerR? (activateurs allostériques)
= ACTIVENT UNE POLYMÉRASE DÉJÀ FIXÉE À UN PROMOTEUR, MAIS INACTIVE, EN PROVOQUANT UN CHANGEMENT DE CONFORMATION DE L’ARN POLYMÉRASE. ACTIVENT DIRECTEMENT (NtrC) OU INDIRECTEMENT (MerR) L’ ISOMÉRISATION DE L’ARN POLYMÉRASE
34
Quel est le mécanisme des activateurs allostériques?
1) NtrC INTERAGIT DIRECTEMENT AVEC LE FACTEUR s 54 DE L’ARN-POL. 2) NtrC PHOSPHORYLE À SON TOUR L’ARN POLYMÉRASE GRÂCE À SON ACTIVITÉ ATPase 1 + 2 = INDUIT LE CHANGEMENT CONFORMATIONNEL « COMPLEXE FERMÉ - OUVERT »
35
Comment MerR active la transcription?
EN « TORDANT » LA SÉQUENCE PROMOTRICE DU GÈNE merT (mer-cure) LES SÉQUENCES -35 ET -10 SONT SÉPARÉES PAR 19 pb, AU LIEU DE 15-17 pb, DONC LE FACTEUR s 70 DE L’ARN-POLYMÉRASE PEUT RECONNAÎTRE LE PROMOTEUR MAIS SANS SE LIER CORRECTEMENT
36
Que se passe-t-il en l'absence de Hg?
MerR SE LIE AU PROMOTEUR ET BLOQUE SA « TORSION ». L’ARN POLYMÉRASE EST ÉGALEMENT LIÉE SYMÉTRIQUEMENT.
37
Que se passe-t-il en présence d'Hg?
EN PRÉSENCE D’Hg, MerR-Hg CHANGE DE CONFORMATION ET INDUIT UNE TORSION D’1/4 DE TOUR POUR PERMETTRE À s 70 D’ÊTRE EN CONTACT AVEC LA SÉQUENCE -10. L’ARN-POL COMMENCE ALORS LA TRANSCRIPTION.
38
LE PROMOTEUR DE L’OPÉRON araBAD EST ACTIVÉ EN PRÉSENCE...
D’ARABINOSE SI ABSENCE DE GLUCOSE PAR 2 ACTIVATEURS AraC ET CAP
39
EN ABSENCE DE GLUCOSE, CAP SE LIE...
EN AMONT DES SITES ara I1 ET ara I2 ET PARTICIPE À L’ACTIVATION DE LA TRANSCRIPTION.
40
Que se passe-t-il quand LE DIMÈRE AraC SE COMPLEXE AVEC L’ARABINOSE?
CHANGE DE CONFIGURATION ET PEUT SE LIER À L’ADN AUX SITES ara I1 ET ara I2 , ADJACENTS À LA RÉGION PROMOTRICE.
41
Que se passe-t-il quand LE DIMÈRE AraC est NON COMPLEXÉ AVEC L’ARABINOSE?
LE DIMÈRE AraC NON COMPLEXÉ AVEC L’ARABINOSE ADOPTE UNE AUTRE CONFIGURATION SPATIALE AYANT PLUS (+) D’AFFINITÉ AUX SITES ara I1 ET ara O2