Cours 21 Flashcards
(28 cards)
2150
Qu’est-ce qu’un immunoglubuline?
C’est un anticorps produit par le système immunitaire
Une immunoglobuline contient
Une chaine lourde et légère
Un domaine Fab et Fc
Des domaines constantes et variables
Quels sont les noms des boucles hypervariables
CDR L1-L3 (light 1-3)
CDR H1-H3 (heavy 1-3)
Comment gp120-gp41 (Env) permet l’entrée de virus dans la cellule hote
Monomère de trimère gp120 intéragit avec CD4
Changement de conformation de gp120
gp120 intéragit avec corécepteur
gp41 expose son peptide fusion pour laisser l’entrée du virion en canal
Quels sont les facons de faire un vaccin contre le VIH1
Bloquer coopérativité du trimère après chg. de conformation
Bloquer intéraction CD4 gp120
Empeche entrée en arretant jonction gp41 et gp120
Pourquoi SOSIP64 est plus cristallisable que Env?
RRR à gp120 pour un clivage de gp120-fp41 (par site de furine) plus facile.
gp120-41 attachés par liaison disulfure
I559P pour stabiliser la protéine
Ne possède pas sont gp41 c-terminal
Qu’est-ce qui est caractéristqie à Env?
C’est 50% glycosylés (de sa masse)
Dans l’article, on s’intéresse à:
La liaison de gp120 et l’anticorps VRCPG05 qui s’attache au silent face très glycosylée de gp120
Comment le virus du patient a mutée
Quel est le but de cytométrie de flux?
Trouver les cellules de l’hote avec des anticorps qui veulent s’attacher de facon non-spécifique et spécifique au site de liaison de CD4 de Env
Quels sondes de cytométie de flux sont utilisés?
Rsc3 (non-spécifique)
deltaRsc3 (spécifique)
Le cytométrie de flux a permet d’isoler quels anticorps?
VRCPGO4 et VRCPG05
Quel est le but d’un test de compétition ELISA? Que veut dire la fluorescence?
C’est pour voir comment bien le VRCPG05 se lie au site de laision de CD4 de gp120 à comparaison à d’autres anticorps qui lient au gp120.
Grand DO veut dire PAS de liaison.
What does the competition ELisa results mean?
Aucun anticorps a été capable de délooger VRCPG05
Qu’a donnée les tests de neutralisation de plusieurs souches de Env?
L’anticorps a une spécificité difféerente des autres anticorps connues (epitope différente) donc elle vient d’une lignée différente.
Qu’a donné le TEM de Env-anticorps-CD4?
Les sites de liaison de l’anticorps et CD4 sur gp120 sont opposés l’un de l’autre
Quels changements de Env étaient nécessaires pour faire la crystallisation en rayon X?
Des coeurs de gp120 sont faites avec des souches sensbles à VRCPG05 dans des cellules HEK293S GNTI-
Ils sont soumis à un endoglucosidae pour cliver les glycanes qui rendent la crystallisation impossible
On l’a complexé au fragment Fab de VRCPg05
La crystallisation a montré que la surface d’intéraction
se compose 85% de glycanes
Quels sont les glycanes principales dans l’intéraction
N262, 295 et 448
Quels sont les parties protéiques (de Env) de l’interaction?
Par quels boucles?
ELS (E293, L446 et S447)
Par les CDRL1 et H3 qui s’inserent dans une pochette
Quels sont les intéractions que font N262 (REQ), N295 et N448
N262 avec H1 et H3 (REQ)
N295 avec L2 et H3 (liaisons hydrogènes)
N448 avec L1, H2 et H3 (empilements, H et hydrophobes)
W fait un empilement pi
Qu’a donné l’expérience de Surface Plasma Resonance?
Le VC PG05 interagit uniquement avec le gp120 GLYCOSYLÉ
Qu’est-ce que se passe si on enle;eve les N262 et N248 de Env? analyse par test ELISA
Il n’y a pas d’intéraction avec l’anticorps
Est-ce que l’épitope (les glycans) sont uniques au VRCPGO5
Non, sauf pour l’intéraction avec N262. C’est l’épitope le 2e plus glycolysé connu pour le VIH1.
Est-ce que l’épitope (les glycans) sont uniques au VRCPGO5
Non, sauf pour l’intéraction avec N262. C’est l’épitope le 2e plus glycolysé connu pour le VIH1.
