Cours 3 cinétique enzymatique

Question 1

Que font les enzymes sur le fonctionnement des cellules?

Answer 1

• accélèrent réactions chimique ( baisse EA)
• contrôlent stéréospécificité des S et P
• site de régulations

Question 2

Quels sont les principes de la catalyse enzymatique? rappel

Answer 2

• accélèrent rx chmique
• contrôlent spécificité des réactions
• aident à spécifier voies réactionnells du substrat

Question 3

Quelle est la vitesse de réaction chimique simple de : A -> P?

Answer 3

V = d [P] / dt = k [A]
donc k = v/ [A]

Question 4

Dans quelle condition Vmax = kcat [E0] ?

Answer 4

Lorsqu’on augmente la valeur de [S] à des niveaux de plus en plus haut, on fait en sorte que
toutes les molécules d’enzyme seront saturées par des molécules de substrat. À ce moment:
[ES] = [E0]

Question 5

équation de MM :

Answer 5

V = Vmax * [S] / Km + [S]

Question 6

À quoi correspond Km dans le graphique de MM?

Answer 6

Correspond à la concentration de substrat à laquelle la
vitesse V est à la moitié de la vitesse maximal

Question 7

qu’est-ce que Km?

Answer 7

valeur approximative de l’affinité du substrat pour l’enzyme.

Question 8

Dans ces conditions la vitesse de la réaction aura atteint son maximum et on pourra écrire ?

Answer 8

Vmax = Kcat [E0]

Question 9

à quoi correspond la valeur de Kcat/Km?

Answer 9

à une mesure de l’efficacité catalytique d’une enzyme

Question 10

Quels sont les avantages du graphique Lineweaver-Burke?

Answer 10

• Donne une ligne droite dont la pente correspond à Km/Vmax
• intersection de la droite avec l’ace des Y = 1/vax
• intersection axe X = -1/Km

Question 11

Quelles réponses nous donne le graphique LB?

Answer 11

Permet d’obtenir des valeurs de Km et Vmax + précise que MM

Question 12

Comment est exprimmé l’efficacité d’un inhibiteur?

Answer 12

Par sa constante d’inhibition Ki

Question 13

Que fait un inhibiteur compétitif.

Answer 13

Se lie à l’enzyme (EI),
augmente le Km et Vmax ne change pas.
Dans LB, les droites se croisent à l’axe des Y

Question 14

que fait inhibiteur incompétitif?

Answer 14

Se lie au complexe ES
Vmax et Km sont diminués
les droites ne se croisent pas dans LB

Question 15

Que fait inhibiteur non-compétitif?

Answer 15

Se lie à E libre et complexe Es
Vmax est diminué et Km reste pareil si Inhib à même affinité que E que pour ES
Les droites se croisent à l’axe des X dans le négatif

Question 16

résumés des inhibiteurs

Answer 16

Question 17

En règle général, quelle concentration de substrat doit être utilisé, si l’enzyme obéit la cinétique MM?

Answer 17

dépassant 10 X le Km

Question 18

Comment éviter une retro-inhibition ? (5) pour que la vitesse soit linéaire pendant la période d’incubation -> détecter la formation du produit.

Answer 18

• mesurer la rx enzymatique pour une courte durée pour diminuer produit
• haute concentration de substrat
• pH non-physiologique pour enlever proton
• méthode sensible pour détecter produit
• inhibition par le substrat à des hautes []

Question 19

Par quoi le Vmax et Km sont influencés ? (3)

Answer 19

• ph
• température
• force ionique

Question 20

Est-ce que certain tampon peut agir comme inhibiteurs?

Answer 20

Oui, en compétionnant avec des substrats possédant des charges négatives

Question 21

La vitesse de rx augmente d’un facteur _ pour chaque 10 degré?

Answer 21

Facteur 2

Question 22

Plus la pédiore d’incubation est courte, plus la température apparente de l’activité maximale peut être….

Answer 22

élevé, car a moins de temps pour que l’enzyme se
dénature

Question 23

qu’est-ce que la méthode discontinue?

Answer 23

enzyme est incubé avec ses substrats pendant une certaine période de temps et la réaction est ensuite arrêtée.
Vérifier l’évolution linéaire
faire +sieurs incubations

Question 24

Comment est arrêtées l’incubation ?

Answer 24

par une méthode qui provoque la dénaturation de l’enzyme

Question 25

Quelles méthodes sont utilisé pour dénaturer l’incubation?

Answer 25

La précipitation par acide ou dénaturation thermique

Question 26

Qu’est-ce que la mesure de l’activité d’une enzyme?

Answer 26

une méthode qui détermine la
quantité de produit généré durant la réaction
- continue (pas arrêté) ou discontinue (dénaturation)

Question 27

Comment mesurer le produits de réactions enzymatique? (3)

Answer 27

• convertir produit en un autre
• spectrophotométrie
• fluorométrie

Question 28

Comment fonctionne la détection directe ? (mesure produit)

Answer 28

un des produits de la réaction enzymatique absorbe la
lumière

Question 29

Comment fonctionne la détection indirecte (mesure produit)

Answer 29

ajoute une enzyme qui utilise le produit de la réaction pour former du NADH par couplage avec une autre réaction