Cours 7 Flashcards

Question

Quelles sont les 6 limites de l'ontogénétique?

Answer 1

* Compréhension incomplète de la fonction cérébrale * Accès génétique sélectif et complet à des sousensembles de neurones * Contrôle optique de cellules individuelles dans une population * Systèmes de livraison de lumière * Expression d'Opsin - stabilité, interférence avec le métabolisme cellulaire * Synchronisation non physiologique du réseau neuronal

Answer 2

* Les études de lésions pour enquêter sur la nécessité d'une région du cerveau ou d'un groupe spécifique de neurones pour une fonction spécifique du comportement ou du cerveau ou pour modéliser une maladie humaine impliquant la mort de sous-types neuronaux spécifiques * La technologie transgénique permet de cibler les lésions sur des sous-ensembles spécifiques de neurones, définis génétiquement. * Une des techniques est l’expression de protéines toxiques par exemple, l’ataxine, le récepteur de la toxine diphtérique ou les caspases.

Answer 3

On tue un tissu spécifique quand on veut mec-4: expression dans les neurones mécanosensoriels hsp-16: expression dans toutes les cellules à des T° élevées La caspase a un prodomaine (prot qui est là pour garder la prot inactive) quand on le clive, la prot devient actif, cette caspase a 2 morceaux (nécessaires pour activité), peut séparer les 2 domaines nécessaires pour faire 2 transgènes avec un linker, quand on fait ça, la prot dans le transgénique sera active à 15°, on voit bien le neurone mécanosensoriel mas à 34° il est pu là pcq avec le heat shock active la caspase

Answer 4

Perturbation de la fonction endogène du gène: ARNi • L'interférence ARN (ARNi) est un processus pour faire taire l'expression des gènes par des mécanismes cellulaires endogènes qui dégradent l’ARNm. • Les cellules utilisent naturellement l’ARNi pour réguler l'expression génique normale, ainsi que pour dégrader les transcrits d'ARNm de virus étrangers. • Les chercheurs utilisent maintenant ce processus naturel pour réduire sélectivement l'expression de gènes et pour dégrader l'ARNm de gènes d'intérêt

Answer 5

``` “Dicer” est une enzyme qui clive l'ARN double brin en petits fragments de duplex, environ 23pb en taille. Ces fragments sont appelés “small interfering RNA (siRNA)”. Le complexe siRNA-Dicer recrute d'autres protéines pour former un un “RNA-induced silencing complex (RISC)” qui conduit à la dégradation de l'ARNm avant qu'il ne soit traduit ```

Answer 6

• Les systèmes d'expression binaires utilisent plusieurs constructions pour affiner l'expression spatiale et temporelle d'un transgène. • Cela se fait par la création de deux lignées différentes d'animaux transgéniques, chaque lignée exprimant l'une des constructions nécessaires. Puis l'accouplement des animaux va produire des descendants qui expriment les deux constructions. • Le principal avantage de cette approche est qu'ils peuvent fournir un contrôle sur le moment et le lieu de l'expression du transgène. • Un autre avantage est la possibilité de mélanger et assortir les combinaisons de transgènes: gain de temps et d'efforts à faire de nouvelles constructions transgéniques.

Answer 7

Dans la droso Dans une construction, un promoteur spécifique entraîne l'expression du gène codant pour Gal4, un facteur de transcription normalement exprimé dans la levure. Dans une seconde construction, un transgène d'intérêt est régulé par une séquence de promoteur appelé “upstream activation sequence” (UAS). • La protéine GAL4 se lie à la séquence UAS et permet d’exprimer le transgène. • Ainsi, le transgène ne s’exprime que les cellules définies par le promoteur régulant GAL4 Permet d'exprimer le gène d'intérêt dans diff tissus, dans des cell spécifiques Pas besoin de changer le promoteur du gène voulu, on a yek a changer le promoteur avant GAL

Answer 8

Crée ARN db avec inverse complémentaire du gène Fait ARNi dans tissu spécifique quand on veut Bon outil pour dim expression d'un gène dans un tissu spécifique

Answer 9

* La génétique inverse (ARNi) est une approche pour modifier un gène et chercher un phénotype. * La génétique classique commence avec des animaux normaux, qui sont traités avec un agent mutagène. * La descendance des parents ayant subi une mutagenèse est examinée pour les phénotypes d'intérêt. * Le gène mutant est alors identifié par des techniques de biologie génétique, génomique et moléculaire.

Answer 10

Des jeunes hermaphrodites adultes sont injectés avec le mélange d'ADN contenant CRISPR-Cas9. Un DSB généré par Cas9 est réparé via le NHEJ propice aux erreurs ou HR sans erreur. La boîte jaune représente l'insertion de petits nucléotides et la boîte verte représente l'insertion de la marque GFP.

Answer 11

• Affecte 1-3 individus sur 100,000 (1/1000 morts) • Âge moyen du diagnostic : 55 ans • Espérance de vie : • 50% vivent 2-3 ans après le diagnostic • 25% vivent 5 ans ou plus • 10% vivent 10 ans ou plus • Perte progressive et sélective des motoneurones dans le cortex moteur, le tronc cérébral et la moëlle épinière. • Mort par dénervation des muscles respiratoires Énormément de gènes sont impliqués dans SLA, c'est normalement familial mais sporadique

Answer 12

bcp de mutations dans cette prot RNA binding prot, fait bcp de fctions, on sait pas laquelle de ses fctions est impliqué dans la maladie c'est autosomique dominant, est + facile à recréer dans modèle animal Prend gène malade humain et met dans vers

Answer 13

``` Dans les MN Neurones GABAergiques (26/302 neurones au total) ```

Answer 14

Les transgéniques TDP-43 ont des problèmes de mobilité Les mutations de TDP-43 provoquent des anomalies de la mobilité conduisant à la paralysie à l'âge adulte

Answer 15

La mutation de TDP-43 change confo de la prot et agrégation donc cause maladies neurodégénératives Patient peut être correct pour +ieurs années mais après trop accumulation mauvaise prot --> mort cell mais se voit très vite chez vers

Answer 16

Vers nage donc est super actif donc jction neuromuscu sont très actifs Phénotype de paralysé qui normalement prend 10 jrs dans plat de pétrit prend 6 h, montre neurodégénérescence tôt, phénotype fort Peut faire criblage des petites molé dans la même journée in vivo