CRISPR Flashcards
CRISPR siglas
Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats
Define la técnica CRISPR
Técnica de modificación genética que utiliza el sistema de defensa en procariotas CRISPR/Cas9 dirigido a secuencias de genes para modificar el genoma de organismos vivos.
¿Cuál es el principio de CRISPR?
La utilización del mecanismo de defensa en bacterias contra invasión de ácidos nucleicos derivados por bacteriófagos o plásmidos
Etapas en la inmunidad adaptativa (CRISPR)
- Adquisión del CRISPR
- Biogénesis del crARN
- Interferencia con el ADN invasor
Componentes de CRISPR (3)
- Proteína Cas9 → endonucleasa
- CRISPR ARN (crRNA) → secuencia transcrita de CRISPR
- Transactivación crRNA (tracrRNA) →secuencia RNA complementaria a crRNA (contribuye a maduración)
¿Cuál es la función de la proteína Cas?
Enzima que hidroliza enlaces fosfodiéster de cadenas de ácidos nucleícos.
¿Qué se busca en la vía no homóloga de reparación?
Se busca el silenciamiento, inactivación o inhibición, inserción.
*existe pérdida de una porción de material genético
ej. Duchenne
¿Qué se busca en la vía homóloga de reparación?
Sustitución de un gen, corrección
*se requiere ADN propio del px, para obtener la secuencia original
¿Qué es un PAM?
Motivo adyacente de protoespaciador
- Una secuencia corta que debe estar presente junto a una secuencia de ADN para que Cas9 se una y corte.
- Evita la escisión de la matriz CRISPR del anfitrión, donde no está presente PAM
¿Qué es un sgRNA?
Single guide RNA que contiene crRNA y tracrRNA (crRNA → secuencia que es homóloga a una región del gen de interés y que guía a Cas9 para el corte)
¿Qué es el tracrRNA?
Transactivating crRNA: secuencia de RNA que es parcialmente complementaria al crRNA, contribuye a su maduración, también se une a Cas9
