Deel 1.3 Flashcards
(26 cards)
Welke kenmerken kunnen we bekijken om de soort te bepalen op een voedingsbodem?
Kolonie vorm: rond, onregelmatig, wortelachtig, spoelvormig
hoogte: plat, verheven, bol, uitpullend
Randen: gaaf, gegolfd, getand, harig
Groei in bouillon: egaal troebel, vlokkerig, vliesje, bezinksel.
Hoe passen we de wetenschappelijke naamgeving toe?
Wat betekent Escherichia coli?
Geslachtsnaam/ genusnaam –> met hoofdletter + soortnaam/ speciesnaam –> met kleine letter.
Escherichia van de onderzoeker Escherich die het micro-organismen voor het eerst beschreven heeft. Coli komt van colon, dit is de dikke darm waar deze bacterie altijd voorkomt.
Waarop is naamgeving van micro-organismen gebaseerd?
Op onderlinge overeenkomsten tussen (groepen van) micro-organismen, ook wel systematische eenheden. We onderscheiden de volgende:
- Familie
- Geslacht
- Soort
Welke 3 soorten vormen hebben we?
- Bacilli
- Cocci
- Spirilli
In welke drie ondervormen valt spirilli onder te verdelen?
- Vibrio
- Spirillum
- Spirilli
Wat toont gramkleuring aan?
Hoe gaat gramkleuring in zijn werking, benoem de 4 stappen:
- Gram positieve bacteriën -> Paars
- Gram negatieve bacteriën -> Roze
- Stap 1 kristalviolet: 1 minuut (de peptidoglycaan en het buitenmembraan worden paars)
- Stap 2 lugoloplossing: 1 minuut (bindingsreactie met het kristalviolet)
- Stap 3 Alcohol: 30 seconden (De peptiodoglycaanlaag wordt bij gram-positieve bacteriën gedehydrateerd, waardoor deze krimpt en de paarse kleur niet kan uitspoelen. De buitenmembraan van de gram-negatieve bacteriën wordt kapot gemaakt.)
- Stap 4 Saffranine: 45 seconden (Vormt een rode rand om de gram-negatieve bacteriën.)
Wat toont sporenkleuring aan?
Hoe gaat sporenkleuring in zijn werking, benoem de 5 stappen:
Of de bacterie ook sporen bevat ja of de nee.
- Maak van elk bacterie een uitstrijkje op het objectglaasje.
- Laten drogen aan de lucht en pas hittefixatie toe
- Plaats de preparaten boven op het bekerglas dat gevuld is met heet water.
- Druppel wat malachietgroen op het uitstrijkje en laat dit 5 minuten staan.
- Eén minuut nakleuren met saffranine
Welke stof wordt gebruikt voor sporenkleuring? Waarom is alleen deze stof geschikt?
Malachietgroen, want doordat sporen door de chemische samenstelling van de sporenwand ongunstige omstandigheden kunnen doorstaan is het voor de meeste kleurstoffen niet doordringbaar. Malachietgroen is een kleurstof die onder verwarming de spore wel kan binnen dringen.
Hoe noem je bacteriën die wel en niet sporen bevatten?
Sporogeen (wel)
sporogeen (geen)
Wat toont de katalase test aan?
Hoe gaat katalase test in zijn werking, benoem stappen:
Of micro-organismen wel of niet in staat zijn tot aerobe ademhaling.
Door de bacterie toe toe te voegen aan waterstofperoxide ontstaat er bij een positieve reactie direct na toevoeging belletjes, bij een negatieve reactie ontstaan geen belletjes of pas na 30-40 seconden zeer zwak bruisen .
Welk enzym bevat een bacterie die in staat is tot aerobe ademhaling?
Het enzym katalase
Wat toont de oxidase test aan?
Hoe gaat oxidase test in zijn werking?
Met deze test wordt een ademhalingsenzym cytochrome c oxidase van de bacteriële electronen transportketen aangetoond dat in strikt aërobe micro-organismen in zo’n hoge concentratie aanwezig is dat het zeer snel aantoonbaar is. All bacteria that are oxidase positive are aerobic, and can use oxygen as a terminal electron acceptor in respiration. This does NOT mean that they are strict aerobes.
- Take a filter paper soaked with the substrate tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride
- Moisten the paper with a sterile distilled water
- Pick the colony to be tested with wooden or platinum loop and smear in the filter paper
- Observe inoculated area of paper for a color change to deep blue or purple within 10-30 seconds.
Om welke reden willen we micro-organismen identificeren?
- bepalen van een ziekteverwekker bij infectie/ziekte
- Kwaliteitscontrole van levensmiddel of water
- Bij de selectie en isolatie van micro-organismen om te gebruiken voor industriële productie/
De identificatie is gebasseerd op een combinatie van 4 kenmerken, welke zijn dit?
- Macroscopische kenmerken: met het blote oog zichtbare kolonies op agarplaten geven bruikbare info. belangrijkste kenmerken zijn; grootte kolonie, kolonievorm, hoogte, de randen, de kleur en het oppervlak.
- Microscopische kenmerken: de kenmerken van een micro-organisme die onder de microscoop zichtbaar worden. Zoals gram +/-, microscopische vorm (staaf, cocci, kommavormig of spiraal), andere kleurtechnieken: kapselkleuring, sporenkleuring, zuurvastkleuring en Koch-preparaat.
- Biochemische kenmerken: zijn het resultaat van de enzym activiteit van de cel die bijdragen aan de stofwisselingsprocessen, je hebt extracellulair en intracellulaire enzymen. Het aantonen van eindproducten van de stofwisselingsprocessen helpt bij de identificatie van de identiteit van het micro-organisme. Er zijn verschillende biochemische tests waarmee dit kan worden onderzocht
- Immunologische test of DNA test.
Op welke manieren kan men micro-organisme identificeren?
Groeiwijze Microscopisch uiterlijk en Beweeglijkheid Biochemische eigenschappen Antigene eigenschappen Gevoeligheid voor diverse fagen DNA-kenmerken
Bij bacteriën zal een microscopisch preparaat nooit aangeven welke soort het precies is maar men komt wel erachter tot welke groep men het verdere onderzoek kan beperken. Wat zijn de belangrijkste kenmerken voor de indeling in groepen?
De vorm
De cel-rangschikking
Zijn er sporen?
Wat is het Gramkarakter?
Welke twee soorten maken sporen?
Bacillus en Clostridium
Noem de 9 biochemische test die je kunt gebruiken bij de identificatie van micro-organismen:
- Methylroodreactie
- Voges-Proskauerreactie
- Indolvorming
- Afbraak gelatine
- Hemolyse
- Zetmeelafbraak
- Nitraatreductie
- Katalase test
- Oxidase test
Wat draagt nog meer bij aan de identificatie van micro-organismen? Noem 4 dingen:
- Het gebruik maken van selectieve en electieve stoffen in voedingsbodems, zien we ook terug bij de biochemische test als zetmeelafbraak en hemolyse.
- Het testen van de antibiotica resistentie of niet geeft info over het type micro-organisme.
- De milieuomstandigheden waarin de bacterie gekweekt wordt of in leeft (voorkomt) zeg iets over het type micro-organisme.
- De beweegelijkheid?
Wat houd de methyrlood reactie in?
Hierbij kun je na gaan of een micro-organisme een gemengd zure gisting heeft, door een pH indicator met laag omslagpunt te kiezen. Onderscheid maken E colu en entrobacter aerogenes
Wat houd de Voges-Proskauerreactie in?
Toont aan of organisme aan speciaal type gisting doet; de butaandiolgisting. Door organisme te incuberen in glucosbouillon en wel of geen kleurreactie.
Onderscheiden van E coli en enterobacter en verschillende Bacillussoorten.
Wat houd de indolvorming reactie in?
Zijn micro-orga die het aminozuur tryptofaan kunnen afbreken en er indol ontstaat, is aan te tonen met klerureactie. E coli kan dit
Wat houd de hemolyse reactie in?
Toont aan of micro orga ook rode bloecellen kunnen afbreken.
Welke 3 typen hemolyse bestaan er?
- Alfa –> incomplete hemolyse, geen verandering media
- Beta –> volledige hemolyse, heldere kleurloze zone
- Gamma –> incomplete hemolyse, vergroening rond kolonie
