Étapes de création d'un antiviral Flashcards
(1 cards)
Étapes?
1.Identifier le virus
2. Créer un modèle de culture cellulaire permettant l’infection par ce virus
3. Criblage haut débit avec une librairies de molécules pré-établies
*si on vise protéase, fret peut être interessant (1 fluorochrome d’un bord, 1 autre de l’autre bord, mesurer le output de fluorescence)
*si on vise la fusion cellulaire, on peut faire un système ou luciférase d’une couleur dans la cellule effectrice (représente virus prq GP exprimé à sa surface) et d’une autre couleur dans la cellule cible, inductible seulement si la fusion se produit (activateur de la transcription de la luciférase dans cellule effectrice)
–> besoin de valider avec vrai virus ensuite
4. Calculer Z, permet de savoir si notre molécule est effective ou pas (besoin d’un contrôle + et d’un contrôle -) ** z factor should be between means
5. vérifier la toxicité: montrer le que niveau d’infection relatif est diminué ET que le nombre de cellules reste le même (mesure de l’ATP - seules les cellules vivantes synthétisent de l’ATP)
*un bon médicament devrait avoir une petite valeur de EC50 (concentration efficace médiane)
*doit pas seulement inhiber in vitro, mais bien in vivo testé sur des cellules humaines
6. Vérifier la spécificité: Tester infection (%) avec un autre virus pour voir si l’infection est inhibée seulement chez le virus étudié
7. Vérifier l’intéraction par cryo-em
8. analogues
