מנגנונים מולקולרים של סרטן וFACS + FISH קריוטיפ

Question 1

מהי התיאוריה האפיגנטית של קרצינוגנזה

Answer 1

הבקרה האפיגנטית מופרת בתאים שנפגעו, ויש מעורבות של מוטציות בתאי גזע, הגורמות להיווצרות צאצאים עם תבנית פגומה של העברה אפיגנטית.

מרחיבה את התיאוריה הסומטית

Question 2

מה המטרה של

LST

Lymphoid screening tube

Answer 2

סיווג לימפוציטים

צובע אנטיגנים בסיסים של תאי

B+T

**לימפוציטים יהייו עם CD45 = גרנולריות נמוכה

Question 3

מהן פרובים

Break apart

Answer 3

מסמנים פיצול של גן

MLL

כל שינוי בגן מעיד על פרוגנוזה רעה

לא נדע לאן עבר טרנסלוקציה רק שעבר

Question 4

מה אמור להקפיץ לנו התמונה של

Iso(17)(q10)

Answer 4

כרומוזום 17 בעל שתי זרועות q

סה”כ יש לנו 3 זרועות של קיו וזרוע אחת של פי

חסר של עותק 1 של הגן P53

בכרומוזום 17 p מצוי על זרוע

Question 5

מהם הגורמים לסרטן

Answer 5

נזק כרוני וסב-לטלי

מביא ללחץ סלקטיבי על תאי הסרטן

דוגמא:

הפטיטיס בי וסי והליקובקטור פילורי= נזק כרוני והעלאת הסיכוי לסרטן

Question 6

מהו השלב בתאים המאפשר אנליזה שלהם בקריוטיפ

Answer 6

מתאפאזה

Question 7

מהי בדיקת

CMA

ציפ’ גנטי

Answer 7

בדיקת כרומוזמים ברזולוצייה גבוהה של פי 10 מאשר קריוטיפ

מזהה רק תוספות וחסרים ולא יזהה שינויים כרומוזומליים מאוזנים

Question 8

מה ההבדל ברזולוציה בין

CMA

לקריוטיפ

Answer 8

קריוטיפ מזהה שינוים מעל 10 מגה בסיסים

צ’יפ מזה ב-10 קילו בסיסים

צ’יפ מראה רגישות של פי 10 יותר מהקריוטיפ

Question 9

מהם הבדיקות בALL

Answer 9

ניתן לראות כרומוזום פילדפיה

T-ALL

נבצע קריוטיפ ולמעקב פיש

B-ALL

קריוטיפ ואז פיש

מאפיין עם פרוגנוזה טובה – t(12,21) עם תוספת AML1

Question 10

פרוטקול מעקב ובדיקות

AML

Answer 10

לפי השלב בו נעצרה ההבשלה במחלה ניתן לדעת מהי סוג השינוי הכרומוזומלי

Stop at M2- translocation 8-21, ETO gene from 8 to 21

Stop at M3- translocation between 15-17, APL (subtype of AML)

Stop at M4- inversion of 16, high resulotion reqiured

Question 11

מהי

SKY

Answer 11

סוג של פיש רק שהפעם צובע כל זוג כרומוזומים בצבע שונה- סה”כ 22 צבעים שונים

אם יש תוספת לכרומוזום ולא יודעים מאיפה הצבע של החומר הגנטי ייתן מידע לגבי המקור של החומר הנוסף

Question 12

מה עומד מאחורי הרעיון של

Seed and soil

בסרטן

Answer 12

לתאים יש תמיד פוטנציאל ממאיר אך יתפתחו רק בסביבה המתאימה

Question 13

יתרונות של

FACS

(flow cytometry)

Answer 13

רגיש

ספציפי

הבדיקה נתנת לשחזור

קלה להבנה ע”י קליניקאים

Question 14

4 מאפיינים של סרטן

Answer 14

.1גדילה- התא לא מציית לסיגנלים פרופליטיבים ומעכבים, עמיד לאפופטוזיס, משרה אנגיוגנזה

.2אימורטליות- יכולת להתחלק ללא הזדקנות

.3תנועה ממקם למקום- יכולת לחדור ולעשות מטאסטאזיס ואף להתחמק ממי’ החיסון

.4Warburg effect אנרגיה עובדת בצורה שונה- מעיד על שינוי המאזן האנרגטי והמטבוליטים שלו

Question 15

באילו שני מקרים זיהו מוטציות וטיפלו בהם ספציפית וזה עזר לסרטן

Answer 15

כרומוזום פילדפיה CML

טרנסלוקציה של 9 ל-22 = BCR-ABL

פיתחו תרופה גליבק לחלבון הכימרי שמתחרה על אתרי הקישור עם ATP

בסרטן שד שהיה חיובי לרצפטור הר2- תרופה נוגדן מונוקלונלי שחסמו את הרצפטור

Question 16

ALOT

acute leukemia ordination tube)

לאיזה מחלות נכוון

Answer 16

לוקמיות

AML:

תאים שמבטאים מיאלופרוקסידאז- בלאסטים מיאלואידים ללא אנטיגנים של תאי בי או טי

ALL

ביטוי אנטיגנים של תאי T למשל )CD3, CD7(

מתי נחשוד בB-ALL

תאים שמבטאים אנטיגנים של B ללא מיאלופרוקסידאז MPO

Question 17

מהי תיאוריית המוטציה הסומטית

Answer 17

מהר מאוד מהגידול הראשוני יש תאי גידול בזרם הדם ומיקרו-מתאסטאזיס.

ואפשר לזהות את התאים האלו אפילו אם לא ידוע איפה הגידול הראשוני.

מחלה שנגמרת ע”י הצטברות של מוטציות סומטיות בתא עצמו.​

Question 18

מה טוענת התיאוריה האטווטיסטית

ATAISM

Answer 18

טוענת שהגנים הקדמוניים שמקורם ביצורים חד תאיים יובילו לפנוטיפ הסרטני.

Question 19

יתרון של

FISH על הקריוטיפ

Answer 19

לא צריך תרבית תאים ולחכות לחלוקה וכאלה אלא ניתן לבצע ממשטח

בדיקה מהירה, תשובה מדויקת

רגישה יותר מקריוטיפ- 400 תאים לפיש לעומת 20 לקריוטיפ

זיהוי חסרים מזעריים

טרנסלוקציות מיוחדות שלא מזוהות בקריוטיפ

Question 20

פרוטוקול הבדיקות והמעקב ב

CLL

Answer 20

לא מבצעים קריוטיפ, עושים פיש

פאנל ל-5 גנים עם 3 פרובים

מעקב- אחרי הממצא האבחנתי

Question 21

בכל המחלות ההמתולוגיות נתחיל מבדיקת הקריוטיפ למעט 2 מחלות

Answer 21

CLL

מיאלומה

Question 22

אבחון של מחלת

AML

Answer 22

הגולד סטנדרט הינו ספירה במיקרוסקופ של בלאסטים במשטח מח עצם

הFlow

יודע להגיד האם יש תאים לא בוגרים / נאופלסטים שלאו דווקא נצליח לאתר במשטח

לכן שילוב שתי השיטות תעזור לאבחון המחלה

Question 23

מתי נשתמש בפרובים צנטרומרים

Answer 23

בודק את כל הכרומוזום.

משתמשים בטריזומיה 8 או לאחר השתלת מח עצם

למשל נקבה שהושתלה מזכר- נוכל לבדוק כמה תאים עם XY

קיימים.

Question 24

מהו הסיווג הראשוני שנעשה של מחלות המטולוגיות באמצעות

Flow

Answer 24

לוקמיות חריפות למחלות לימפופרוליפרטיביות

משתמשים במבחנות ה-

Screening

Question 25

מה בודקת Plasma screening tube

Answer 25

יכולה להגיד אם יש חשד למיאלומה או לתאי פלזמה שאינם פתולוגיים. **החלוקה התקינה של תאי פלזמה זה חצי קאפא וחצי למדא, אם אראה רק קאפא - מדובר בפתולוגיה ונוכל לחשוד במיאלומה**

Question 26

איזו בדיקה נעשה עבור מעקבים של חולים המטולוגים

Answer 26

FISH מעקב אחר ממצא שהתגלה באבחנה במח עצם בין מינים שונים עם גלאי של XY

Question 27

מהם מרקרי M

Answer 27

**קומפלקס קריוטיפ** חומר גנטי לא מזוהה ואינו מבנה תקין של אחד הכרומוזומים. כאן כל המעורבים כל אלו שאין להם 2 עותקים תקינים. **בתמונה** כאן יש 60 כרומוזומים. נק' היחוס הינה 46.

Question 28

מהו קומפלקס קריוטיפ

Answer 28

שינויים במעל 2 כרומוזומים- 3 כרומוזומים ומעלה. לרוב מדובר בפרוגנוזה לא טובה. לכל חולה המטולוגי מתחילים מבדיקה קריוטיפ.

Question 29

פרוטוקול בדיקות לחולה CML

Answer 29

הממצא הקלאסי- כרומוזום פילדפליה, איחוי של חלק מ22 אל 9 BCR-ABL ממצא פחות קלאסי- טרנסלוקציה משולשת, בתוכה מכיל את ה PCRמעקב- עוקבים אחרי הממצא שהיה באבחנה ע"י פיש ו פעם בשנה שנתיים עושים קריוטיפ

Question 30

מהי מטרת בדיקת הקריוטיפ

Answer 30

איתור הפרעות כרומזומליות מספריות או מבניות (AML, MDSמספריות- טריזומיות (למשל טריזומיה 8 ב מבניות- מבנה שונה של כרומוזום אחד או יותר, ספירת פסים כאשר דורשים בין 350-500 פסים, **טרנסלוקציות** **כרומוזום פילדפיה- דוגמא לטרנסלוקציה של 9 ל-22** **ALL, CML**

Question 31

מתי נבצע קריוטיפ ופיש ל Non hodjkin lymphoma NHL

Answer 31

רק אם מקבלים תשובה שלשד העצם מאופיין בהסננה של לימפומה

Question 32

מהי תאוריית 3 השלבים בין מע' החיסון לתאי הסרטן

Answer 32

**אלימינציה-** לא יודעים עליו כלום כי כל הזמן מתרחש. תאי חיסון מוצאים תאים סרטניים ומשמידים אותם מידית .**שיווי המשקל-** שלב בו יש גידולים קטנים אך מע' החיסון שומרת עליהם קטנים **בריחה-** מע' החיסון לא מצליחה לעמוד בפרץ והגידול מתפרץ, מסביר למה קורה בגיל מבוגר באורח חיים מסוים (היחלשות של מע' החיסון)

Question 33

מדוע תאי סרטן משתמשים בגליקוליזה תהליך שכלכך לא יעיל אנרגטית

Answer 33

החומצה הלקטית שנוצרת אינה סתם תוצר לוואי אלא יוצרת סביבה חומצית שפוגעת בתאים נורמלים ועוזרת לתאים הסרטניים למשל במטאסטאטזיס אנגיוגנזה ודיכוי חיסוני ## Footnote **הלקטט הינו אונקומטבוליט**

Question 34

איך מכינים תאים לקריוטיפ

Answer 34

גידול תאים בתרבית---עצירת החלוקה בשלב המטאפטזה **זהו השלב המאפשר אנליזה**---טיפול היפוטוני כדי לפוצץ את הגרעין והכרומוזומים ישתחררו---הכנת משטחים וצביעת ג'י בנדיג---אנליזה במיקרוסקופ אור ב-FISH מסתכלים במיקרוסקופ פלורנסטי

Question 35

מה אומרת הפרדיגמה השלישית The origion of life and the origins of cancer

Answer 35

פעם היו יצורים חד תאיים שהתפתחו ליצורים רב תאיים- במה שונה יצור חד תאי מרב תאי מה סדר העדיפות- של יצור חד תאי הוא עצמו וביצור רב תאי האורגניזם השלם ולכן תאים מוכנים לעבור אפופטוזיס. **אופן הפעולה הבסיסי של יצור חד תאי הינו תחרות בעוד רב תאי הינו שיתוף פעולה** שורה תחתונה: הסרטן הינו שבירת השיתוף פעולה של יצורים רב תאיים ליצורים חד תאיים יש את המאפיינים של סרטן

Question 36

מה עושים ב FACS

Answer 36

הפרדת אוכלוסיות תאים באמצעות צביעה פלורסנטית. מתייחס לגודל התאים, לגרנולריות שלהם, זיהוי תאים באמצעות אנטיגנים חלבוניים למשל CD . % התאים המבטאים את האנטיגן ועוצמת הביטוי = רמת הצפיפות.

Question 37

מהו קומפלקס קריוטיפ

Question 38

איפה מתבטא CD45 ומה דרגת הביטוי שלו

Answer 38

מתבטא על כל התאים ההמטופואטיים

Question 39

מהם הגורמים עם הכי הרבה משקל לסיכון לסרטן

Answer 39

עישון- 35% תזונה- 30%

Question 40

מהי האבחנה של MDS

Answer 40

אבחנה מורפולוגית תלוי בודק ולכן הפאקס מהווה תמיכה להסתכלות של הפתולוג במיקרוסקופ

Question 41

איזה מדד אוכל לבדוק על תאי B באמצעות LST

Answer 41

חלוקת השרשראות הקלות- מאפשר להגיד איך נראים תאי הבי ומה הם מציגים יחס תקין בד"כ הוא 3:1 בשרשראות קאפא ולמדא במידה והיחס עולה אנחנו אומרים שיש מונוקלונליות

Question 42

מהו Euro flow 8

Answer 42

מערך של בדיקות באמצעות פקס שנוכל לקבוע במדויק את אפיון התאים ההמטולוגים סטנדרטיזציה של פקס מהיר, מדויק ובעל רגישות גבוהה בשביל דיאגנוסטיקה, תחזית וקלסיפיקציה של מחלות המטולוגיות

Question 43

מהי הרגישות של הקיוטיפ

Answer 43

ניתן לזהות כל שינוי מעל 10 מגה בסיסים **מדובר בבנד אחד** _חסר בP53 לא נראה בקריוטיפ_

Question 44

באילו מחלות הפאקס לא יכול לעזור

Answer 44

HLH , Anemia aplastic, bone merrow faliure במצבים כאלו משתמשים בפאקס כדי לשלול מצבים אחרים

Question 45

ניסוח קריוטיפ תקין

Answer 45