Gammal tenta

Question 1

1.Varför används internstandard i LC/MS-laborationen (PEth)?
Ange 2 riktiga påståenden.(2p)

a. Ökar analysens riktighet
b. Används som kalibrator
c. Korrigerar för interferenser
d. Korrigerar förfelpipettering när blodprovet tillsätts till eppendorfröret.

Answer 1

d

Question 2

2.En masspektrometer…(ange 2 riktiga påståenden, 2p)

a. …separerarkomponenter med avseende på polaritet
b. …separerarkomponenter med avseende på molekylmassa
c. …detekterar komponenter som är neutrala
d. …detekterar komponenter som är laddade

Answer 2

c

Question 3

3.I LC/MS-laborationen (PEth) tillsätts fällningslösning till blodprovet för att (ange 2 riktiga påståenden, 2p)

a. Få PEth negativt laddad i provet
b. Separera PEth 16:0/18:1 från andra former av PEth
c. Extrahera PEthi provet
d. Fälla utproteiner i provet

Answer 3

v

Question 4

4.Tunnskiktskromatografi utförs oftast som ”normal phase” där stationära fasen har en polär karaktär och den mobila fasen en mer opolär karaktär. Hur snabbt en analyteluerar beror på (ett eller flera alternativ kan vara rätt):(2p)

a. Hur löslig analyten är i den mobila fasen
b. Analytens molekylvikt
c. Analytens polaritet
d. Hur analytens tre dimensionella struktur ser ut
e. Hur bra analyten adsorberas av den stationära fasen

Answer 4

v

Question 5

Lipider har generellt en mer hydrofob karaktär än ex proteiner och peptider, men med addering av mer polära grupper som kolhydrater eller fosfatinnehållande grupper så kan även lipider få mer polära egenskaper. Hur måste man modifiera sin mobilfas för att få lipider som glykolipider och fosfolipider att separera med tunnskiktskromatografi (ett eller flera alternativ kan vara rätt)?(2p)

a. Öka mobilfasens polaritet
b. Minska mobilfasens polaritet
c. Öka andelen vatten eller metanol i mobilfasen
d. Öka andelen heptan eller kloroform i mobilfasen

Answer 5

v

Question 6

Hur kan man identifiera okända analyter med hjälp av tunnskiktskromatografi (ett eller flera alternativ kan vara rätt)?(2p)

a. Beräkna Rf-värdet som alltid är detsamma för varje enskild analyt
b. Använda sig av referensprover eller standarder med känd(a) analyt(er)
c. Med hjälp av analytens intensitet kan identifiering ske

Answer 6

v

Question 7

bild fråga 7

Answer 7

f

Question 8

Den analysmetoden vi använde under glukoslaborationen, var att man utförde en kvantitativ bestämning av glukos (analyten) som var löst i plasmaprovet. Metoden baseras på att en fullständig kemisk reaktion sker mellan analyten och ett reagens, som därvid bildade en färgad produkt, produkten mättes därefter spektrofotometriskt. Vad kallas en sådan fullständig kemisk reaktion?(1p)

Answer 8

d

Question 9

9.Välj rättdelar och sättdemi rätt ordningför en HPLC uppsättning! Börja med provbuffertkärlet! (2,5 p)

Provbufferkärl
Centrifug
Kolonn
Inhalator
Injektor (autosampler)
Pump
Spektrum
UV
Detektor

Answer 9

d

Question 10

Förklara följande HPLC utryck!(4p)

Answer 10

Kromatogram
Teoretisk bottental
Selektivitet
Retentionstid

Question 11

11.Du har fått till uppgift att analysera substans A med hjälp av C18-kolonn. Du blandar till en pH 5.5 fosfatbuffert buffert med 60% acetonitrile och får resultatet nedan. Vad ska du göra för att förbättra kromatografin?(2p)

klistra in bildd

Answer 11

d

Question 12

12.Om ett protein har en isoelektrisk punkt på 4,5 och du vill separera den från en heterogen proteinlösning med jonbyteskromatografi på en DEAE-sepharose(anjonbytare), vilket pH måste du då ha på den mobila fasen? Skriv hur du resonerar kring valet av pH, och hur du sedan kan göra för att eluera ut proteinerna.

Answer 12

d

Question 13

13.Varför absorberar proteiner ljus vid 280 nm?

Answer 13

c

Question 14

14.Vad är det som gör att vissa proteiner t.ex.ALP kan komma ut som flera toppar i kromatogrammet? (2p)

Answer 14

c

Question 15

15.Vad är konduktivitet ett mått på?

Answer 15

d

Question 16

16.Vad är katal?

Answer 16

d

Question 17

17.Proteiner kan separeras utifrån storlek eller laddning. Vad kallas typen av elfores som utnyttjar proteinets laddning som separationsprincip?

Answer 17

d

Question 18

18.Före elektrofores behandlas provet med SDS (sodium dodecylsulfat) och DTT (dithiothreitol). Vilken funktion har dessa kemikalier?

Answer 18

d

Question 19

19.Vilken funktion har blocking buffert i Western blot? Vad händer om du glömmer behandla membranet med blocking buffert?

Answer 19

d

Question 20

20.Vaför behandlas PVDF membranet med metanol eller etanol innan det läggs i transferbuffert? (1p)

Answer 20

d

Question 21

21.Du skall tillsätta din antikropp i spädning 1:3000. Du vill göra 15 ml av antikroppsblandningen. Hur många μl av antikroppen tillsätter du?

Answer 21

d

Question 22

Bilden nedan avbildar en massanalysator.

A)Vad heter massanalysatorn?(1p)

B)Vad kan du säga om analysatorns förmåga att skilja på två joner som skiljer väldigt lite i massa?(1p)

C)Denna massanalysator är bättre på att identifiera okända peptider än den är på att kvantifiera små kända molekyler, ja/nej?(1p)

klistra in bild

Answer 22

s

Question 23

23. Vilka påstående angående enzymaktiviteten är fel:(1,5p)
    a) Enzymerna som följer Michaelis-Menten ekvationen uppnår hälften av dess hösta hastighet när koncentration av substraten är lika med KM.
    b) Lambert-Beers lag påstår att det finns proportionalitet mellan koncentration och fluorescens.
    c) katal/L är en enhet av International Systemet (SI) som brukas att använda när det mäts enzymaktiviteten som finns i en vävnad.
    d) Enzymaktiviteten är konstant under hela kemiska reaktionens gång.
    e) Enzymaktiviteten är kraftigt beroende på pH.

Answer 23

v