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Generalità Flashcards

(64 cards)

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1
Q

Metodica sensibile

A

Quando è in grado di rilevare la più piccola quantità di sostanza in esame di un campione

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Q

Metodica specifica

A

Quando è in grado di riconoscere quella sostanza e soltanto quella —> enzimi molto utilizzati come metodica specifica
E.g. ICA (anticorpi diretti contro le cellule beta pancreatiche) hanno una specificità del 97% per cui se pz negativo agli ICA sicuramente non avrà diabete di tipo I

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3
Q

Metodi sensibili/specifici in ordine di aumento delle due variabili

A

Enzimi
Anticorpi (immunochimica)
Biologia molecolare

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4
Q

CQI

A

Controllo di qualità interno da fare teoricamente tutti i giorni

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5
Q

VEQ

A

Valutazione di qualità esterna

Fatto ogni 2settimane/1mese

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6
Q

Soluzione standard - Standard

A

Soluzione purissima della sostanza in acqua distillata a concentrazione nota

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7
Q

Campioni di controllo

A

Siero (non è lo standard!!) che si compra o viene inviato dall’esterno per il VEQ

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8
Q

Classificazione e controllo di qualità

A

Si usa un siero di controllo che non è lo standard

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9
Q

Precisione

A

Meno errori casuali —> stanno molto al di fuori dello standard: > 2s - 3s

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10
Q

Meno errori casuali

A

Precisione

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11
Q

Accuratezza

A

Meno errori sistemici (l’errore viene fatto in quel p.to specifico)
Sono quelli che stanno costantemente al di sopra/sotto del valore medio —> valori consecutivi
E.g. taratura errata, agenti preparati male, scaduti..

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12
Q

Meno errori sistemici

A

Accuratezza

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13
Q

Errori con valori consecutivi

A

Accuratezza

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14
Q

Attendibilità di un dato

A 
Deriva da 3 controlli:
Coordinazione (evita errori grossolani che sono i più difficili da controllare)
Precisione
Accuratezza 
In seguito si fanno CQI VEQ
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15
Q

Valutazione del dato uscito dal laboratorio attraverso:

A

Controllo di
Plausibilità —> approssimazione al valore atteso
Espressività —> possibilità di fornire o meno nuove info
Normalità —> dati di riferimento presi spesso da donatori avis

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16
Q

Sensibilità analitica

A

Minima quantità di un’analita rilevabile in un campione biologico
E.g. reazioni antigene-anticorpo rilevano concentrazioni di 10^(-13)/10^(-12)
Più specifica delle metodiche enzimatiche è l’immunologia

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17
Q

Specificità analitica

A

Riconosce un dato analita e non i suoi simili

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18
Q

Certificazione da ripetere ogni anno in un laboratorio

A

ISO 9001

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19
Q

Certificazione ISO9001

A

Ogni anno arriva un ente certificatore che considera tutti i punti dell’organizzazione e programmazione della ricerca

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20
Q

Fasi di laboratorio

A

Pre-analitica
Analitica
Post-analitica

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21
Q

Coefficiente di variazione

A 
CV= (DS/X)*100
DS= deviazione standard 
X= valore medio
2-3% in un esame di routine 
3-4% per esami più sofisticati
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22
Q

Ripetibilità

A

Deviazione dal valore medio ottenuta dallo stesso operatore in un’unica serie analitica senza cambiare reattivi/apparecchiature
Intra-assay = precisione entro la serie

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23
Q

Intra-assay

A

Precisione entro la serie

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24
Q

Riproducibilità

A

Variazioni da parte di operatori diversi che non conoscono l’identità del campione analizzato e usano lotti di soluzioni e reagenti diversi
Inter-assay= precisione tra le serie

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25
Inter-assay
Precisione tra le serie
26
Affidabilità
Capacità di dare sempre lo stesso risultato nel corso di misurazioni ripetute
27
Validità
Capacità di distinguere soggetti sani da soggetti malati | Capacità diagnostica
28
Valori di riferimento in gaussiana sani vs malati
Gaussiana in cui si taglia il 2,5% da una parte e dall’altra Il primo 2% è la zona grigia Lo 0,5% finale sono i malati
29
Limiti fiduciari
Di confidenza +/- 2DS di cui si siano ottenuti 25 dati sperimentali È quindi il limite di misura entro il quale possiamo avere fiducia di trovare la vera grandezza
30
Soluzioni standard | Parametri
Scopo di impiego: costruzione della curva di calibratura Composizione: dissimile dal campione Utilizzabilità: solo per taratura Concentrazione: mediante pesata analitica Valori teorici: da 0 a limiti possibili Conservabilità: non importante Obbligo di impiego: per ogni nuovo metodo
31
Campioni di controllo | Parametri
Scopo di impiego: controllo del metodo Composizione: simile al campione Utilizzabilità: solo per controllo qualità Concentrazione: calcolata da *lab di controllo *dal ricercatore con i sieri rimanenti a fine giornata Valori teorici: in ambito normale e patologico Conservabilità: materiale liofilo o congelato (la conservabiàita è un fattore molto importante) Obbligo di impiego: ogni serie di esami
32
Variazioni pre-analitiche
Sono i 3/4 di tutto il ciclo 1) prelievo 2) trasporto 3) separazione (centrifugazione) 4) distribuzione 5) conservazione
33
Variabilità intra individuale vs inter individuale
Nello stesso pz —> INTRA | Pz diverso per età sesso etnia.. —> INTER
34
Fasi analitica e post analitica
1/4 di tutto il ciclo
35
Provvedimenti da attuare per garantire la giusta conservazione
1) temperatura di conservazione 2) conservazione al buio 3) liofilizzazione 4) modificazione del PH x stabilizzare certe sostanze quali enzimi 5) aggiunta anticoagulanti Si utilizzano piccolissime quantità di campione (100-500 ml) Dobbiamo avere uno SPAZIO MORTO estremamente piccolo altrimenti —> errore Campione congelato: si scongela a temp.ambiente e poi si OMOGENIZZA il campione ma non attraverso vortex perchè schiumogeno= rompe le molecole biologiche
36
Prelievo come effettuarlo
Il pz deve essere stabile Il peso e la dieta devono essere stabili No es.fisico da 24h prima No alcoo/caffè dalla sera prima No gravidanza/allattamento/infarto del miocardio (nei precedenti 3 mesi) Prelievo in posizione SEDUTA mantenuta per almeno 5 minuti prima di effettuarlo e laccio emostatico (stasi venosa) mantenuto il meno possibile Per pz allettati andare a controllare la demineralizzazione delle ossa
37
Siero/plasma lipemico | Perché?
Pz fortemente ipertrigliceridemico Siero lattescente e non limpido *pz non è a digiuno *la sera prima ha bevuto alcool/ mangiato grassi *non dà info sul colesterolo ma solo sull’ipertrigliceridemia
38
Come si fa con un paziente ipertrigliceridemico?
Si toglie l’alcool e torna a valori normali a differenza del colesterolo che è più difficile e ci vuole più tempo per aggiustare
39
Cosa si fa se non si riesce ad avere altro che il siero ipertrigliceridemico (iperlipemico)?
Si va a centrifugare (non tutti i lab.possono farlo) o si aggiungono delle sostanza che però possono interferire con gli esami
40
Emolisi in prelievo
Anche in questo caso non riusciamo a leggere gli esami di laboratorio. Assorbimento a 405nm BANDA DI SORET per emoglobina Perché avviene? *pato che porta a fragilità dei globuli rossi *quando non c’era il monouso: tensioattivi che rompono GR *mettere il campione nel congelatore etc.. *GRAVITÀ della centrifuga
41
Valori trigliceridi
Vanno da 20-30 mg/100ml a valor massimi di 160/170 mg/100ml
42
K+ | Nei GR vs PLASMA
mmol/l GR: 100 Plasma: 44
43
LDH | GR vs PLASMA
mU/ml GR: 58’000 Plasma: 360
44
GOT(AST) | GR vs PLASMA
mU/ml GR: 500 Plasma: 25
45
Na+ | GR vs PLASMA
Mmol/l GR: 16 Plasma: 140
46
Cl- | GR vs PLASMA
Mmol/l GR: 52 Plasma: 104
47
Cosa si usa per analizzare il SIERO?
Oggi si usa il separatore, una volta si aspettava che venisse formato il coagulo
48
Separatore
Si mette direttamente il sangue intero senza anticoagulante e senza centrifuga Svantaggi: *fenomeni di adsorbimento o legame con sostanze sieriche *inibizione dell’attività enzimatica *possibile emolisi *interferenza con la reazione biochimica
49
Conservazione del campione prelevato in laboratorio
* CO2 attenzione / Fumo attenzione ==> entrambi vengono assorbiti dalla provetta * luce solare: 50% di bilirubina in meno in 1h * temperatura * sigillazione per evitare evaporazione * formazione di schiuma
50
Anticoagulanti
*Eparina: utilizzata per misurare l’attività ANTITROMBOTICA è un GAG NO x indagini ematologiche morfologiche *Ossalato: analisi di coagulazione forma sali poco solubili con il Ca2+ *EDTA: acido etilen-diammino-tetra-acetico Agente chelante forma complessi con lo ione calcio È il più usato. Non porta ad alterazioni biochimiche/strutturali *Citrato: per la VES *Fluoruro: è in grado di inibire gli enzimi della glicolisi quindi viene utilizzato per provette che vanno analizzate il giorno seguente o comunque a distanza di molte ore. Il glucosio altrimenti viene “mangiato” dalla glicolisi dei GR E.g. Pz diabetico che preleva lungo tutta una giornata per vedere l’andamento Altrimenti si centrifuga il campione a freddo, si separa plasma o siero e si congela immediatamente—> questo blocca la glicolisi Perché il pz con 200 di glicemia dopo un’ora si trova a 110, la glicolisi la riduce del 7-10% all’ora
51
Differenza di glicemia nei diversi distretti
Arteriosa > capillare > venosa Queste differenze diventano ancora più importanti dopo i pasti Concentrazione glucosio su siero/plasma > del 12% rispetto a quella su sangue intero (perché qui una gran parte è occupata dai GR) se l’ematocrito è normale (45-55%) Differenza > se ematocrito >!
52
Valori ematocrito
Uomo: 42-52% Donna: 36-46% Neonato: 50-62% Bambino: 31-39%
53
Calcolo per passare da glicemia su sangue intero a glicemia plasmatica e viceversa
Glicemia su sangue intero * 1,12 = glicemia plasmatica
54
Emoglobina glicata
Ci dice l’andamento della glicemia negli ultimi 60 giorni
55
Grafico di Youden
Per controllo degli errori 2 sieri di controllo per valori di laboratorio: uno normale e uno patologico Centinaia di lab che mandano il risultato e possiamo vedere il valore medio. La sigla è simile per lab che usano la stessa strumentazione e la stessa metodica. Tanto più il lab è vicino al valore medio (p.to di incontro tra ascisse e mediana) tanto più lavora bene —> cerchio = 2DS a sx troppo basso a dx troppo alto Al di fuori delle 2 tangenti errori aberranti = grossolani
56
Plasma ipertrigliceridemico
In frigo a 4 gradi per 12h * se il plasma rimane immutato pz ipertrigliceridemico dovuto a VLDL (perché queste in frigo non variano) * FLOTTAZIONE: chilomicroni che vanno a galla con il freddo perché formano aggregati di micelle - se sotto è limpido era dovuto ai chilomicroni - se sotto è torbido in parte è dovuto a VLDL
57
Gruppo di test consigliati per determinate patologie
Costellazione di test
58
Valore di riferimento per un laboratorio
Donatori di sangue
59
Errore casuale
Più la gaussiana è appuntita < errore casuale > precisione
60
Errore totale
Errore tot = e.sistemico + e.casuale + e.grossolano
61
Ripetibilità
Stesso lab, stesse metodiche —> errore intra essay (?) del 2-3-4%
62
Riproducibilità
Lab differente metodiche diverse | Inter assay 5-6-7%
63
Affidabilità test
Misurazioni ripetute sempre stesso risultato
64
Validità test
Capacità di distinguere soggetti sani da malati

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