Inmunotécnicas

Question 1

Puede considerarse una inmunotécnica al emplearse un anticuerpo específico contra la proteína de unión al ácido nucleico

Answer 1

EMSA

Question 2

Inmunotécnicas microscopía

Answer 2

• Inmunohistoquímica
• Inmunofluorescencia
• Confocal de fluorescencia

Question 3

Inmunotécnica al emplearse un anticuerpo específico contra la proteína de unión al ácido nucleico

Answer 3

Antígeno

Question 4

¿Cuántos epítopes tiene un antígeno?

Answer 4

uno (al menos) o más epítopes

Question 5

Región de la molécula del antígeno que es reconocida por el anticuerpo, formada por aminoácidos

Answer 5

Epítope

Question 6

Es especifica de cada especie

Answer 6

Región constante (Fc)

Question 7

Anticuerpo producido por un solo clon de linfocitos B

Answer 7

Anticuerpo monoclonal

Question 8

Son una mezcla heterogénea de anticuerpos producidos por diferentes clones de células B

Answer 8

Anticuerpos policlonales

Question 9

Es una herramienta para identificar y localizar antígenos (proteínas) en una muestra de tejido

Answer 9

Inmunohistoquímica

Question 10

Anticuerpo primario específico para el antígeno que estamos tratando de identificar, acoplado a una enzima

Answer 10

Inmunohistoquímica método directo

Question 11

Anticuerpo primario de una especie en contra del antígeno que estamos tratando de identificar

Answer 11

Inmunohistoquímica método indirecto

Question 12

Anticuerpo secundario, contra la Fc la especie donde se obtuvo el anticuerpo primario, acoplado a una enzima

Answer 12

Método indirecto Inmunohistoquímica

Question 13

Metodología de inmunohistoquímica:

Answer 13

• Fijación
• Cortes
• Incubación con anticuerpos
• Cromógeno para la enzima
• Montaje

Question 14

Inmoviliza las células y las preserva. Une
covalentemente las moléculas proteicas a sus vecinas

Answer 14

Fijación

Question 15

Agentes utilizados para la fijación de las muestras:

Answer 15

• Formaldehído
• Glutaraldehído
• Citrato pH 6
• EDTA pH 9

Question 16

Sistema de detección o visualización

Answer 16

Cromógeno para la enzima.

Question 17

Indica replicación activa del virus de la hepatitis B en el hígado

Answer 17

HBcAg y HBsAg

Question 18

Detectar específicamente algunas proteínas u otras moléculas en células y tejidos

Answer 18

Microscopio de fluorescencia

Question 19

Molécula fluorescente

Answer 19

Fluorocromo

Question 20

Parte del fluorocromo que absorbe la luz de una determinada longitud de onda y emite luz de otra longitud de onda más larga

Answer 20

Fluoróforo

Question 21

Anticuerpo primario específico para el antígeno (Ag) que estamos tratando de identificar, acoplado a un fluorocromo (F)

Answer 21

Microscopio de fluorescencia: Método directo

Question 22

Anticuerpo primario de una especie en contra del antígeno (Ag) que se está estudiando

Answer 22

Microscopio de fluorescencia: Método indirecto

Question 23

• Anticuerpo secundario acoplado a un fluorocromo (F)

Answer 23

Microscopio de fluorescencia: Método indirecto

Question 24

En el método indirecto de la M. de fluorescencia el anticuerpo secundario reconoce específicamente la región constante (Fc) de la especie donde se obtuvo el anticuerpo primario. V/F

Answer 24

Verdadero

Question 25

Superposición espacial entre dos etiquetas fluorescentes diferentes

Answer 25

Colocalización

Question 26

Visualización de diferentes moléculas al mismo tiempo en una preparación

Answer 26

Contratinción

Question 27

Deja pasar solamente la luz de cierta longitud de onda

Answer 27

1. Filtro

Question 28

Refleja la luz de cierta longitud de onda y transmite la luz de otra longitud de onda mayor

Answer 28

2. Espejo dicroico

Question 29

Deja pasar la señal fluorescente de cierta longitud de onda específica

Answer 29

3. Filtro

Question 30

Identifica las regiones en proceso síntesis activa de DNA

Answer 30

BrdU (bromodesoxiuridina)

Question 31

Colocalizan en regiones de síntesis activa de DNA.

Answer 31

DNA polimerasa y PCNA

Question 32

Antígeno nuclear de células en proliferación (siglas)

Answer 32

PCNA

Question 33

Permite obtener una imagen de la arquitectura tridimensional de una célula o un tejido

Answer 33

Microscopio confocal de fluorescencia

Question 34

El microscopio confocal de fluorescencia utiliza métodos electrónicos que permiten:

Answer 34

enfocar un plano de una muestra eliminando la luz que proviene de las zonas fuera de foco superiores e inferiores a ese plano

Question 35

A partir de una serie de secciones ópticas obtenidas a diferentes profundidades, archivadas en un ordenador, resulta sencillo construir una imagen tridimensional. V/F

Answer 35

Verdadero

Question 36

En el proceso de obtención de secciones finas, se pierde información respecto a la tercera dimensión. V/F

Answer 36

Verdadero

Question 37

Se emplea en el recuento y clasificación de células según sus características morfológicas y presencia de biomarcadores

Answer 37

Citometría de flujo

Question 38

Características morfológicas:

Answer 38

* Tamaño * Granularidad

Question 39

Marcados específicamente mediante anticuerpos acoplados a fluorocromos

Answer 39

Presencia de biomarcadores

Question 40

Mide la dispersión de la luz en un ángulo de 90 grados con respecto al láser y proporciona información sobre la complejidad celular

Answer 40

SSC

Question 41

Mide la dispersión de la luz en la misma dirección que el láser y proporciona información sobre el tamaño celular

Answer 41

FSC

Question 42

En el marcaje con fluorescencia se puede detectar cualquier molécula en la célula, siempre y cuando tengamos:

Answer 42

un anticuerpo específico para ella, acoplado a un fluorocromo

Question 43

En el marcaje con fluorescencia las células:

Answer 43

* Pueden contarse. * Pueden ser separadas y recuperadas.

Question 44

En las poblaciones leucocitarias, la baja cantidad de eosinófilos y basófilos hace que en general no se defiendan en base a FSC y SSC, V/F

Answer 44

Verdadero

Question 45

Compuesto que atraviesa la membrana celular alterada en células muertas y las tiñe

Answer 45

Ioduro de propidio

Question 46

Las células vivas presentan fluorescencia en la pureza y viabilidad de poblaciones celulares. V/F

Answer 46

Falso, no presentan fluorescencia en ese canal

Question 47

¿Qué significa ELISA?

Answer 47

Enzyme-Linked InmunoSorbent Assay “Ensayó de inmunoadsorción ligado a enzima”

Question 48

Permite evaluar a una proteína de manera cuantitativa

Answer 48

ELISA

Question 49

Ej. Detección de Ag en sangre u orina

Answer 49

ELISA: Directo

Question 50

Ej. Detección de Ag con un solo secundario acoplado a enzima-cambiando el primario- o detección de anticuerpos (HIV, SARS-CoV-2)

Answer 50

ELISA: Indirecto

Question 51

Ej. Detección de Ag, más sensible, el Ag se retiene en la placa mediante su unión específica al anticuerpo de captura y el segundo Ag es policlonal, se amplifica la señal VS directo e indirecto

Answer 51

ELISA: Tipo sándwich

Question 52

Etapas del Western Blot

Answer 52

1. Electroforesis 2. Transferencia 3. Inmunodetección.

Question 53

Tipos de transferencia en el Western Blot

Answer 53

* Electrotransferencia * Difusión simple o pasiva

Question 54

Permite la detección mediante un anticuerpo específico, de una proteína dentro de una muestra biológica

Answer 54

Western Blot

Question 55

Las isoformas son reconocidas por el mismo anticuerpo y tienen el mismo peso molecular. V/F

Answer 55

Falso, podrían ser reconocidas por el mismo anticuerpo, pero variarán en peso molecular.

Question 56

Estima el tamaño de la proteína

Answer 56

Corrimiento electroforético

Question 57

Variantes alelicas que generan distintas formas de la misma proteína, splicing alternativo o maduración diferencial

Answer 57

Isoformas

Question 58

Western Blot se utiliza para:

Answer 58

* Estimar el tamaño de la proteína * Evidenciar isoformas * Comparar los niveles de proteína entre muestras

Question 59

Proteína blanco inalterada y se asume que conserva su función y localización normal.

Answer 59

Proteína de fusión con una etiqueta de epítopo

Question 60

Secuencia proteica corta que es reconocida fuertemente por un anticuerpo comercial bien caracterizado.

Answer 60

Etiqueta de epítopo

Question 61

La proteína de fusión con una etiqueta de epítopo se puede emplear para:

Answer 61

* Inmunofluorescencia * Inmunoprecipitación

Question 62

En la inmunofluorescencia el anticuerpo está unido a:

Answer 62

un fluorocromo

Question 63

Permite identificar interacciones funcionales proteína-proteína con proteínas hasta ese momento desconocidas

Answer 63

Inmunoprecipitación

Question 64

En la inmunoprecipitación, el complejo proteico puede estar formado por varias proteínas. V/F

Answer 64

Verdadero

Question 65

Una variante de la inmunoprecipitación puede ser:

Answer 65

La purificación del complejo proteico por columna de afinidad

Question 66

En la purificación del complejo proteico por columna de afinidad, el anticuerpo es inmovilizado en la columna. V/F

Answer 66

Verdadero