MicroRNA in Teleost Fish Flashcards

Bizuayehu_2014 DOI: 10.1093/gbe/evu151 (45 cards)

1
Q

¿Cuál es la función del dominio PAZ en la proteína Dicer y cómo influye en la especificidad de procesamiento de miRNAs?

A

El dominio PAZ en Dicer reconoce y se une al extremo 3’ de los pre-miRNA, alineándolos para el corte preciso por los dominios RNasa III.

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2
Q

¿Cómo interactúan Drosha y DGCR8 en la etapa nuclear de la biogénesis de miRNAs y por qué esta interacción es crítica?

A

Drosha corta los pri-miRNAs en pre-miRNAs en el núcleo, y DGCR8 actúa como cofactor reconociendo estructuras de horquilla y posicionando Drosha correctamente.

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3
Q

¿Qué diferencias estructurales existen entre los dominios PIWI y RNase III en Argonauta y Dicer, respectivamente?

A

El dominio PIWI en AGO tiene actividad catalítica de corte (slicer), mientras que los dominios RNase III en Dicer realizan cortes dobles en los pre-miRNA.

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4
Q

¿Por qué es relevante estudiar isoformas duplicadas de Dicer y AGO en salmónidos, y cómo se relaciona con su evolución post-WGD?

A

La duplicación génica post-WGD genera isoformas especializadas; en salmónidos podrían expresar Dicer/AGO en tejidos diferentes o bajo distintas condiciones.

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5
Q

¿Qué impacto tiene la fosforilación de AGO2 sobre su función en el complejo RISC en peces bajo estrés térmico?

A

La fosforilación puede afectar la capacidad de AGO2 de unirse al miRNA o al mRNA blanco, alterando la eficiencia del silenciamiento en situaciones de estrés.

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6
Q

¿Qué efectos tiene la uridilación sobre la estabilidad de pre-miRNAs durante el desarrollo temprano en teleósteos?

A

La uridilación promueve la degradación de pre-miRNAs al marcar los extremos 3′ para su eliminación por exorribonucleasas.

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7
Q

¿Cómo influye la edición por ADAR en la especificidad de blancos de un miRNA y qué consecuencias tiene para la regulación génica?

A

La edición por ADAR cambia A→I, modificando el pareo del miRNA con sus blancos, lo que puede generar nuevas dianas o perder otras.

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8
Q

¿Qué enzimas están implicadas en la adenilación de miRNAs y cómo afecta esto su participación en el silenciamiento génico?

A

GLD-2 es una polimerasa no canónica que añade adeninas al extremo 3′ de ciertos miRNAs, estabilizándolos o inhibiendo su función.

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9
Q

¿Cómo puede la SUMOilación de AGO2 modificar su ensamblaje con miRNAs y qué implicancias tiene para la espermatogénesis en peces?

A

La SUMOilación puede alterar la localización subcelular de AGO2 o su afinidad por proteínas accesorias, afectando la espermatogénesis.

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10
Q

¿Qué rol tienen las modificaciones epitranscriptómicas en la generación de isomiRs y cómo podrían afectar los resultados de tu tesis?

A

Generan isomiRs con diferentes extremos o secuencias, lo cual afecta estabilidad, carga en RISC y selección de blancos, afectando análisis en tu tesis.

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11
Q

¿Qué características estructurales definen a un mirtrón y cómo se procesan independientemente de Drosha?

A

Los mirtrones derivan de intrones empalmados y no requieren procesamiento por Drosha; son exportados al citoplasma directamente.

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12
Q

¿Cuál es el mecanismo de procesamiento de miR-451 y qué lo hace único entre los miRNAs?

A

miR-451 es procesado por AGO2 directamente sin necesidad de Dicer, debido a su estructura de tallo corto y bucle reducido.

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13
Q

¿Qué tipos de RNA pueden actuar como precursores de miRNAs en rutas no canónicas en peces?

A

snoRNAs y tRNAs pueden generar miRNAs mediante procesamiento alternativo, funcionando como precursores en rutas no canónicas.

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14
Q

¿Cómo podrían los espermatozoides de salmón generar miRNAs funcionales sin requerir Dicer en ciertas condiciones?

A

Podrían usar rutas como AGO2-dependiente o derivar miRNAs de snoRNAs activos en gónadas.

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15
Q

¿Por qué sería útil identificar miRNAs de origen snoRNA o mirtrones en embriones sometidos a estrés térmico?

A

Porque los embriones expuestos a estrés térmico podrían depender más de rutas no canónicas cuando la maquinaria canónica falla.

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16
Q

¿Qué es un ceRNA y cómo puede interferir con la función de un miRNA en la célula germinal?

A

Un ceRNA compite con mRNAs funcionales por el mismo miRNA, afectando la regulación al actuar como esponja molecular.

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17
Q

¿Cómo influye la energía libre de hibridación (ΔG) en la eficacia del silenciamiento mediado por miRNAs?

A

Cuanto más negativa sea la ΔG, más estable es la unión miRNA–mRNA, lo que aumenta la represión.

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18
Q

¿Qué importancia tiene la accesibilidad estructural de la 3′UTR del mRNA en la acción del miRNA?

A

Si el MRE está oculto por estructuras secundarias del mRNA, el miRNA no puede acceder eficientemente, reduciendo su efecto.

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19
Q

¿Qué implica el concepto de ‘site occupancy’ en la regulación miRNA-mRNA y cómo puede variar con el estrés ambiental?

A

Es la proporción de mRNAs realmente ocupados por miRNA; depende de la concentración del miRNA y la competencia por sitios.

20
Q

¿Cómo podrían los pseudogenes actuar como esponjas de miRNAs en tejidos reproductivos de peces?

A

Porque pueden compartir sitios MRE con genes funcionales y actuar como reguladores competitivos en la célula germinal.

21
Q

¿Cuál es el papel de miR-430 en la transición materno-cigótica y cómo se altera en condiciones de estrés térmico?

A

miR-430 degrada mRNAs maternos no deseados y facilita la activación del genoma cigótico; el estrés puede afectar su activación.

22
Q

¿Qué función cumple miR-202 en la espermatogénesis y por qué es considerado un marcador específico gonadal?

A

Regula la transición entre espermatogonias y espermatocitos; es altamente específico de tejido gonadal.

23
Q

¿Cómo contribuye miR-124 a la diferenciación neuronal durante la organogénesis en peces?

A

miR-124 promueve la diferenciación neuronal y reprime la glial, ayudando a establecer la identidad neuronal.

24
Q

¿Qué roles juegan miR-133 y miR-206 en la miogénesis y qué implicancias tienen en peces bajo restricción nutricional?

A

miR-133 promueve proliferación y miR-206 diferenciación de mioblastos; son sensibles a condiciones nutricionales.

25
¿Qué evidencia apoya el uso de miR-21 como regulador de crecimiento y respuesta anti-apoptótica en peces?
Promueve proliferación, inhibe apoptosis y se expresa ampliamente en tejidos de regeneración y estrés.
26
¿Qué relación existe entre miR-122 y la regulación del metabolismo hepático en peces alimentados con dietas vegetales?
miR-122 regula enzimas lipogénicas en hígado y es sensible a dietas vegetales en peces, afectando el metabolismo.
27
¿Cómo puede el estrés térmico alterar la expresión de miRNAs reproductivos como miR-202 y afectar la calidad espermática?
Porque puede alterar la regulación de genes esenciales para maduración espermática y estructura flagelar.
28
¿Qué funciones cumplen miR-146 y miR-155 en la respuesta inflamatoria inducida por condiciones ambientales adversas?
Ambos modulan la inflamación y se sobreexpresan en respuesta a daño tisular o inmunológico.
29
¿Cómo se vinculan los cambios en la expresión de miR-29 con procesos de fibrosis o remodelación tisular en peces?
miR-29 regula genes de matriz extracelular, y su sobreexpresión puede prevenir fibrosis o modular regeneración.
30
¿Qué evidencia sugiere que algunos miRNAs tienen funciones nucleares y no solo citoplasmáticas?
Algunos miRNAs se localizan en el núcleo donde regulan la transcripción, splicing o epigenética, como miR-320 o miR-29b.
31
¿Qué técnicas experimentales permiten validar si un miRNA actúa a través de una ruta canónica o no canónica?
Se pueden usar inhibidores de Drosha o Dicer, o detectar precursores atípicos por PCR o northern blot.
32
¿Cómo se puede utilizar el análisis de isomiRs para mejorar la interpretación de los resultados en tu tesis?
Permite diferenciar variantes funcionales, mejorar predicciones de blancos y adaptar diseños de qPCR.
33
¿Qué estrategias permiten evaluar la actividad de miRNAs cargados en AGO2 durante la criopreservación espermática?
Con inmunoprecipitación de AGO2 y detección de miRNAs asociados en condiciones de criopreservación.
34
¿Qué herramientas bioinformáticas pueden ayudarte a predecir la accesibilidad de sitios MRE en tus genes candidatos?
Herramientas como RNAhybrid, IntaRNA o RNAplfold permiten evaluar accesibilidad estructural de MREs.
35
¿Cómo podrían los perfiles de miRNAs en plasma actuar como indicadores tempranos de teratogenicidad embrionaria?
Cambios en perfiles de miRNAs plasmáticos pueden anticipar malformaciones antes de la eclosión.
36
¿Qué implicancias tiene la cuarta duplicación génica (4R WGD) en la diversidad funcional de miRNAs en salmónidos?
La 4R-WGD duplicó muchos miRNAs, permitiendo evolución de nuevas funciones o regulación específica por copia.
37
¿Cómo se diferencian funcionalmente los miR-xa y miR-xb generados por duplicación en peces?
Tienen secuencias muy similares pero pueden expresarse en tejidos o tiempos distintos (subfuncionalización).
38
¿Por qué es importante considerar subfuncionalización o neofuncionalización en la selección de miRNAs candidatos?
Porque la especialización permite que cada copia adquiera roles nuevos o complementarios, útil para selección de biomarcadores.
39
¿Qué riesgos analíticos existen si no se diferencian correctamente las copias duplicadas de un mismo miRNA en qPCR?
Podrías amplificar ambas copias sin distinguirlas, generando resultados erróneos o ruido en tus datos.
40
¿Cómo podrías construir un modelo que vincule estrés térmico, disfunción espermática y perfiles miRNA alterados?
Un modelo integraría: temperatura → expresión de miRNAs → alteración de función espermática → teratogenicidad.
41
¿Qué combinación de miRNAs considerarías en un panel diagnóstico para evaluar calidad de gametos y viabilidad embrionaria?
miR-202, miR-430, miR-21, miR-29 y miR-122 cubren aspectos reproductivos, metabólicos y de respuesta al estrés.
42
¿Cómo podrías distinguir entre un cambio funcional y un cambio compensatorio en la expresión de un miRNA?
Comparando los efectos funcionales (fertilidad, motilidad) con expresión de miRNA, y evaluando compensación de otros genes.
43
¿Qué ventajas tendría usar perfiles de miRNAs frente a genes codificantes como biomarcadores reproductivos?
Los miRNAs responden más rápido y finamente al ambiente, y regulan múltiples procesos simultáneamente.
44
¿Cómo podrían los cambios en la biogénesis de miRNAs explicar diferencias entre animales resilientes y vulnerables?
La alteración en biogénesis bajo estrés puede explicar por qué algunos animales mantienen fertilidad y otros no.
45
¿Qué limitaciones tienen los métodos actuales para analizar funciones de miRNAs en tejidos complejos como testículos?
La heterogeneidad celular, diferencias temporales y duplicaciones genéticas dificultan identificar efectos causales claros.