P3- TECNICAS LABORATORIAIS DE AGLUTINACAO E DE PRECIPITACAO Flashcards
(17 cards)
TECNICA DE AGLUTINACAO PARA DETETAR ANTIGENIOS
- heme aglutinacao (aglutinacao de eritrocitos) de acordo com sistema ABO e rH, usando anticorpos p identificar os antigenios na superf dos eritrocitos
- anticorpos A B e D (IgM; identifcam, respetivamente, grupo A, B e rh+ caso ocorra hemeaglutinacao)
1) procedimento
- 3 gotas de sangue
- gota de cada anticorpo em cada gota de sangue
2) resultados
(pe) se hemoaglutinacao com anticorpo A e com o D, A+
3) dador e recetor
dador universal
O- (sem antigenio A B e D)
recetor universal
AB+ : nao tem nenhum anticorpo no soro
TECNICAS DE AGLUTINACAO PARA DETETAR ANTICORPOS
- sangue de grupos sanguineos conhecidos p determinar os anticorpos no soro vendo se ocorre aglutinacao com os antigenios do sangue
a) procedimento
- cada soro tem dois tubos onde sao adiconados eritrocitos A e B p ver onde ha aglutinacao
b) resultados
(pe) se soro 1 aglutina com eritrocitos A e B, esse individuo tem anticorpos A e B no soro logo nao tem nenhum na superficie do eritrcito logo é O
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pessoa nunca contactou com antigenio e tem anticorpos contra ele
- reacoes cruzadas
- pe, contacto com bacterias ou polens com epitopos semelhantes e montamos resposta com anticorpos anti B
pessoa AB sem anticorpos anti A e B apesar de tmb contactar com polens e bacterias
- linfocitos no timo, qnd sao autorreativos, sao destruidos (seriam prejudiciais e iriam causar doencas autoimunes)
TITULACAO ( p transf aglutinacao em semi quant)
- reagente em concentracao fixa e o outro cada cada vez mais diluido
- diluicao ocorre ate atravessar zona de equivalencia e entrar pos ou pro zona
- titulo do antig ou Ig atraves da ultima diluicao que houve aglutinacao
a) imp clinica
- pe, doente com autoanticorpos (doenca autoimune) alem de saber se tem ou nao p aglutinacao, a titulacao permite saber se tem muitos ou poucos (gravidade) ou saber se terapeutica esta a funcionar (diminuicao dos autoanticorpos)
- pe, determinar o titulo do virus de uma pessoa infetada
b) procedimento
- (na aula titulamos anticorpo, mantendo constante antigenio)
- 7 tubos cujo diluicao anticorpo aumenta de tubo p tubo
- pipetar hemacias (antigenios da superf) p todos os tubos (mm quantidade)
- incubar e observar se ocorre aglutinacao
c) resultados
- quando deixa de haver aglutinacao, significa que passamos da zona de equivalencia p pos zona (excesso de antigenio)
d) imp clinica do titulo de heme-aglutininas
- doencas imundodeficientes (num doente que nao produza anti A ou B, se for doenca recente ainda vai ter alguns em circulacao e o titulo vai ser maior)
PRECIPITACAO
- antigenios soluveis (na agluti sao insoluveis e de grandes dimensoes ou em superf de celulas)
- mais lenta
a) procedimento
imunodifusao radial de macini
- gel onde temos componente embebido (na aula eram anticorpos) e em cada poço uma amostra de liqudio que pode ter mais ou menos antigenio
- antigenios migram em direcao ao anticorpo
- atingem zona de equivalencia e precipitam (poco com maior concentracao, quanto mais se difundem mais a concentracao de antigenio se dissolve
- diamentro do halo proporcional a concentracao de antigenio no poco (teve de diluir muito, “perder muita concentracao”” p poder precipitar)
- tracada curva padrao q relaciona quadrado do diamentro com a concentracao, sendo normalmente sigmoide
- tecnica quantitativa