powerpoint 4 Flashcards
(33 cards)
O que são mini-STRs?
versão otimizada dos STRs tradicionais, desenvolvidos para amplificar fragmentos curtos (<150 pb), ideais para DNA degradado ou de baixa qualidade
Qual é a principal vantagem dos mini-STRs em relação aos STRs convencionais?
Conseguem amplificar DNA altamente degradado devido ao tamanho reduzido dos fragmentos.
Frente: Qual a principal diferença entre STRs tradicionais e mini-STRs?
Nos mini-STRs, os primers estão mais próximos da região de repetição, reduzindo o tamanho do fragmento amplificado.
o que garante que se possa usar mini strs
- Os miniSTRs mantêm a especificidade e a variabilidade dos STRs tradicionais, permitindo comparações entre perfis genéticos e a continuidade com bases de dados forenses existentes.
Frente: O que permite a análise multiplex nos mini-STRs?
Kits comerciais que amplificam múltiplos loci simultaneamente, melhorando a eficiência e o poder de discriminação.
- Desvantagem da aproximação
: o número de loci (ou polimorfismos) que podem ser amplificados em simultâneo é mais limitado, comparado aos megaplexes de STRs convencionais, que conseguem amplificar dezenas de loci de uma só vez.
Q: O que são artefactos de adenilação incompleta na PCR?
A: Quando há excesso de DNA no PCR, podem surgir dois picos (com e sem nucleótido A na extremidade 3’), confundindo a leitura dos alelos.
* Isto pode ser confundido com um alelo verdadeiro e que o ajuste da quantidade de DNA é essencial para evitar essa ambiguidade.
Q: O que são alelos nulos nos mini-STRs?
São alelos que não amplificam devido a mutações pontuais na região de ligação do primer, especialmente na extremidade 3’.
nos alelos nulos que alteraçoes de resultados pode haver se estiverem em sitis diferentes
se a mutaçao estiver no meio da zona de hibridaçao - , o primer até pode ligar-se parcialmente, mas com menor eficiência, causando desequilíbrio nos picos heterozigóticos
se a mutação estiver na extremidade 3- onde a ligação do primer precisa ser perfeita para que a DNA polimerase inicie a síntese, a amplificação falha completamente para esse alelo. Isso leva à ausência total do alelo no resultado, mesmo estando presente no DNA
- Q: Como contornar alelos nulos
: Usando primers alternativos para permitir a amplificação do alelo mutado.
Q: Quais são os requisitos dos mini-STRs?
A: Alta heterozigotia (>70%), elevado poder discriminatório, consistência entre laboratórios, baixa taxa de mutação, produtos de PCR cim tamanho <150 pb e localizaçao afastada ou em cormossomas distintos
vantagens principais dos mini-STRs?
Análise de DNA degradado, maior sensibilidade, compatibilidade com equipamentos tradicionais de STR.
desvantagens dos mini-STRs?
A: Nem todos os loci STR podem ser convertidos em mini-STRs; menor número de loci por multiplex.
Por vezes o genótipo obtido com os STRs tradicionais difere do genótipo obtido com os miniSTRs.
Q: Por que os mini-STRs são úteis em impressões lofoscópicas?
A: Permitem amplificar DNA em baixa quantidade ou degradado, como em impressões latentes com células epiteliais.
Q: Por que os mini-STRs são eficazes em casos de agressão sexual?
A: Identificam DNA degradado por tempo, lavagens ou ambientes acido da vagina ou minoritário (ex. esperma em secreções vaginais) mesmo após tempo prolongado.
Q: Como os mini-STRs são usados em testes de parentesco?
A: Permitem amplificação de DNA mesmo em amostras antigas, exumadas ou mal conservadas.
Q: Qual a importância dos mini-STRs na identificação de vítimas?
A: São eficazes em restos mortais em decomposição, carbonizados ou esqueletizados.
importancia geral dos mini str em dna degradadi
Por serem desenhados para amplificar fragmentos curtos, conseguem contornar a degradação e ainda gerar resultados, em comparação entre STR tradicionais (amplificam fragmentos de 100-400 pb) e mini-STRs (70-150 pb).
Como se comparam os mini-STRs com STRs em casos de DNA degradado?
A: Mini-STRs amplificam fragmentos entre 70–150 pb; STRs convencionais, entre 100–400 pb.
O que indica a correspondência de alelos em todos os loci entre amostra e referência?
para fazer a analise , analisaram locis de str especificos e em cada locus, sao obsrvados dois alelos, se os alelos da referencia com o da vitima corresponderem há A: Confirmação de identidade genética (ex: escova de dentes da vítima e amostra biológica).
Como se faz a comparação genética quando não há referência direta da vítima?
Usa-se o perfil genético dos familiares e herança dos alelos para inferir compatibilidade.
Se em todos os loci, pelo menos um alelo da vítima coincide com o que era esperado como herdado pelo filho, e o outro pode ser alelo livre, ou seja, sem conflito com o perfil da mãe dizzemos q é compativel \
Q: O que são InDels bi-alélicos?
A: Polimorfismos com presença ou ausência de pequenas sequências de DNA; apenas dois alelos possíveis- com ou sem inserçao
só tem didrença num ou poucas pb
🔹 Também chamados de DIPs.
Q: Quais são as principais características dos InDels?
A: Alta estabilidade, baixa taxa de mutação, bialélicos, fragmentos curtos, genotipagem fácil.
Q: Qual a diferença em poder discriminatório entre STRs e InDels?
InDels: bi-alélicos → menos poder discriminatório.
🔸 STRs: multi-alélicos → maior poder discriminatório.
✔️ No entanto, InDels são mais estáveis e confiáveis.
