Spectrométrie de masse Flashcards

Question

Quelles sont les limites de la LC-MS/MS ?

Answer 1

* Composé doit être ionisable et volatil * Transitions propres à l’analyte d’intérêt * Séparation chromatographique (molécules isobariques et composantes de la matrice qui peuvent causer de la suppression d’ion) * Suppression d’ion * Méthode manuelle (CV analytique n’est pas aussi constant et aussi faible que si on a seulement des sources d’erreurs provenant de l’appareil) * Appareils et protocoles non standardisés (Importance des CQ externe)

Answer 2

**Par définition**, une pré-colonne est composée de la **même phase stationnaire que la colonne analytique**. La pré-colonne sert donc à protéger la colonne analytique en évitant de la surcharger inutilement avec des composés non essentiels au dosage. Une **SPE** est plutôt considérée comme une **chromatographie préparatoire**

Answer 3

Un S/N idéal \>20; S/N minimal de 10

Answer 4

Le carryover doit est \<25% la valeur de la LLMI lorsqu'on passe un échantillon négatif

Answer 5

MS en tandem permet de **sélectionner l’analyte** et d’être donc **moins stricte sur les conditions chromatographiques** étant donné que la transition observée est caractéristique à l’analyte. Temps de rétention plus court. Toutefois, un minimum de rétention est nécessaire pour minimiser la suppression d’ions et les inteférences de molécules isobariques

Answer 6

l’analyte d’intérêt est **ionisé** dans la source d’ionisation, **sélectionné** par l’analyseur de masse selon son **ratio M/Z** (masse/charge) puis **détecté** par un amplificateur d’électron. Résultats présentés sur un chromatogramme avec abondance relative de l’ion M/Z en fonction du temps

Answer 7

**_SRM_** : Single reaction monitoring Analyse d'**une seule transition de masse** (1 m/z sélectionné en Q1 et 1 m/z sélectionné en Q3) **_MRM_** : Multiple reaction monitoring Analyse de **plus d'une transition de masse** (\>1 m/z sélectionné en Q1 et/ou \>1 m/z sélectionné en Q3)

Answer 8

**_Product ion scan_** (ou daughter ion scan) : Q1 : Sélection d'une m/z pour l'ion précurseur Q2 : Fragmentation Q3 : Scan de tous les fragments produits **_Precursor ion scan_** (ou parent ion scan) : Q1 : Scan de tous les ions précurseurs Q2 : Fragmentation Q3 : Sélection d'une m/z pour les fragments produits ***\* Application typique : Acylcarnitines***

Answer 9

**Sépare les ions en fonction de la stabilité de leur trajectoire dans un champ électrique oscillant** * Un quadripôle est composé de 4 "rods" (2 positives et 2 négatives) chacune ayant un courant continu et un courant alternatif (radio-fréquence). * Les gros ions sont davantage influencés par le courant continu que par la radio-fréquence. * Les petits ions sont davantage influencés par la radio-fréquence que les gros ions. * **Les ions dont la trajectoire sera stabilisée se renderont au détecteur (sortiront du quad)** _Exemple d'analyse d'ions positifs:_ * Rod négatives : Filtre passe bas * Le courant continu attire les ions positifs vers les rods. * La radio-fréquence appliquée modifie plus facilement la trajectoire des petits ions. Les gros ions finiront par être éliminés à cause du courant continu qui les attire vers les rod. Les petits ions répondent au courant alternatif et modifient leur trajectoire en conséquence, leur permettant ainsi de sortir du quadripôle si leur trajectoire est suffisamment mofifiée par la RF * Rod positives: Filtre passe haut * Le courant continu positif repousse les ions positifs vers le centre du quadripôle. * La trajectoire des petits ions est plus sensible à la radio-fréquence que les ions avec une m/z élevée. La trajectoire des gros ions leur permet donc de sortir du quadripôle, alors que les plus petits ions seront perdus en conséquence de la RF.

Answer 10

* MALDI (principe d'ionisation) : * Bruit de fond élevé et CV plus élevé pour l’ionisation * Mycobactéries : Difficile de libérer les protéines. Nécessite un prétraitement d’échantillon particulier * Nombre minimal de bactérie pour permettre la détection (ça prend une colonie : \>10⁵bactéries) * Échantillons provenant de culture de sang moins efficace que si on utilise directement une colonie * Temps d’analyse plus long (30-40 minutes vs 5-6 minutes) * Moins bon % d’identification (mais résultats valide) * Utilisation de certaines géloses pour faire pousser les bactéries peut mener à de faibles scores ou % de confiance * Colonies très petites difficiles à identifier * Requiert l’utilisation de colonie isolée : 1 seul type de bactérie, sinon ID échoue * Certaines bactéries sont difficiles à différencier (Ex: *E. coli* et *Shigella spp*)

Answer 11

* ICP : Ionisation de l’échantillon par une torche à plasma (T° = 6000-10000 °C). Production d'atomes neutres ou ionisés * MS : Sélection des ions selon leur m/z (quadripôle) * Identification des éléments basée sur la présence des isotopes individuels ou ratio entre les isotopes (abondance) ## Footnote ***(!) On regade des éléments/atomes, pas des molécules comme en spectrométrie de masse***

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