Técnicas de Indução da Desova em Ostra

Question 1

Abertura Não Destrutiva das Valvas

Answer 1

Para técnicas que envolviam injeção intramuscular, “testou-se um meio não destrutivo de abertura das valvas”. Para isso, foram testadas diferentes doses e tempos de anestesia. O relaxamento total foi definido pelo tempo em que “as ostras não respondiam a uma suave irritação do manto.

Question 2

Tratamentos de Indução

Answer 2

Foram testados seis métodos de indução da desova:

-Duas técnicas de choque físico
-Três técnicas de indução químicas
-Indução combinada de técnicas químicas e físicas
-Remoção física dos gâmetas (escarificação)

Question 3

Técnicas Específicas Investigadas

Answer 3

Choque por Emersão: Reprodutores (n=18 por grupo) foram deixados sem água durante a noite (17 horas).
Choque Térmico e de Salinidade: Reprodutores (n=18) foram submetidos a aumento gradual da temperatura (até 37 °C) e redução da salinidade (de 36 para 22 ppt), com repetição de ciclos de stress se necessário.
Adição de Suspensão de Esperma: Reprodutores (n=18 por grupo) foram expostos a uma suspensão de esperma.
Adição de Extrato de Esperma: Foi preparado um extrato de esperma seguindo métodos descritos para Pinctada maxima (Taylor et al., 2018), com centrifugação, homogeneização e liofilização do sobrenadante. Reprodutores (n=36 por grupo) foram expostos a alíquotas do extrato.
Injeção de Serotonina: Após relaxamento com MgCl2, reprodutores (n=18 por grupo) foram injetados com solução de serotonina (2 mM) no músculo adutor.
Combinação de Salinidade e Esperma: Reprodutores (n=18 por grupo) foram submetidos a redução da salinidade (de 36 para 22 ppt) e adição de suspensão de esperma.
Remoção Física dos Gâmetas (Escarificação): Este método envolveu o sacrifício de animais para recolha direta de gâmetas. Foi necessária escarificação de 17 reprodutores para obter 7 machos adequados.
Injeção de Neuropéptidos (APGWamide e Buccalin): Foram identificados neuropéptidos (“APGWamide e buccalin”) em S. glomerata que despoletam a desova. Reprodutores (n=40) foram relaxados com MgCl2 e injetados com uma mistura ou peptídeos individuais (40 μg de cada péptido em 10 μL de água destilada).

Question 4

Resultados e Conclusões

Answer 4

Índice Gonadal Baixo: Com “Índice gonadal baixo”, os resultados foram limitados:
“Não ocorreu desova quando foram utilizados os métodos de emersão, esperma e extrato de esperma”.
“Aumento da temperatura e diminuição da salinidade – apenas 1 macho desovou”.
“Injeção com serotonina – 4 machos desovaram”.
“Choque de salinidade e esperma – duas fêmeas e um macho desovaram, contudo também desovaram dois machos no controlo !”.

Índice Gonadal Muito Bom: Com “Índice gonadal muito bom”, houve desovas em todos os tratamentos investigados mais aprofundadamente (Ensaio 2):
“Salinidade e esperma – desovaram 80% das ostras (5 machos e três fêmeas)”.
“Neste método APGWamide e Buccalin – 90% da ostras desovaram (8 machos e uma fêmea)”.

Question 5

Conclusão Principal sobre a Eficácia dos Métodos

Answer 5

Este estudo demonstrou que os métodos de indução podem ser usados para aumentar o sucesso reprodutivo de S. echinata

A combinação de técnicas de indução química e física, usando a redução da salinidade e a adição de esperma, foi o método mais eficaz.” No entanto, os resultados com os neuropéptidos também foram muito promissores (90% de desova com APGWamide e Buccalin combinados).