VL 1 Flashcards
(34 cards)
1
Q
(Folie 12) LUCA
A
Last universal common ancestor
- Bakterien, Archaea und Eukarya stammen von LUCA ab
- bei Bakterien 16S Ribosomale RNA
2
Q
Prokaryoten vs. Eukaryoten
A
3
Q
Nährmedien
A
- enthalten Makroelemente
- C,H, O,N, P, S, K, Mg, Na, Ca, Fe
- Mikroelemente
- Co, Mn, Mo, Ni, Se, W, V, Zn …
- Vitamine
- Thiamin
- Pyridoxal
- Biotin
- Folsäure
- Cobalamin
4
Q
Komplexmedien
A
- Trypton, Pepton, Hefe oder Fleischextrakt
- wenig definiert
- angereichert an Peptide, Nukleotidem und Vitaminen
- Trypton
- Gemiskjgn
- Pepton
- krsjg
5
Q
Minimalmedien
A
- Zusammensetzung genau definiert
- enthalten nur Komponenten, die Organismus unbedingt braucht
6
Q
Kulturgefäße
A
Nährmedien und Kulturgefäße müssen vor Anzucht frei von anderen Bakterien/Sporen (‘Kontaminanten’) sein - dies wird durch Sterilisation z.B. einem Autoklaven erreicht
7
Q
Sterilisation
A
Befreiung eines Materials von lebenden Mikroorganismen oder deren Ruhestadiuen (Sporen)
8
Q
Verfahren der Sterilisation
A
- thermisch
- trockene Hitze
- feuchte Hitze (Autoklavieren)
- chemisch
- Ethylenoxid, Formaldehyd
- Strahlung
- gamma-, beta-Strahlen, Mikrowellen
- Sterilfiltration
- Filtration durch Filter mit einer Porengröße von nominal 0,02 mikrometer
9
Q
Sterilisation im Autoklaven
A
- Sterilisierkammer
- durch dichten Deckel verschlossen
- Erhitzen von Wasser bei Überdruck
- durchströmt Sterilisiergut
- Sicherheitsventil verhindert zu starkes Ansteigen des Innendrucks
- Prinzip eines Dampfkochtopfes
- Standard-Betriebsbedingungen
- 121°C
- 2 bar (2000 hPa)
- 15-20 min
10
Q
Pasteurisierung
A
- Teilsterilisation
- tötet vegetative Zellen
- nicht Sporenstadien von Pilzen und Bakterien
- 5-10 min auf 75-80°C
- Kurzzeiterhitzung 20-40 s auf 71-74°C
- Hocherhitzung 2-5 s auf 85-87°C
- Ultrahocherhitzung 1-2 s auf 135-150°C
11
Q
Desinfektion
A
- vernichtung pathogener Mikroorganismen
- selektiv wirksame Maßnahme
- Verhinderung Übertragung Krankheitrreger
- Vernichtung saprophytischer Mikroorganismen (Lebensmittelindustrie, Oberflächendesinfektion)
12
Q
Binäre Zellteilung
A
- aus 1 macht 2
- exponentielles Wachstum
13
Q
Mikrobielles Wachstum: Petri dish: agar
A
14
Q
Mikrobielles Wachstum: Erlenmeyer
A
15
Q
Wachstumskurve einer statischen Kultur
A
- nur ein Nährmedium
- kein neues Medium
- lag Phase
- Neusynthese von Transportproteinen und Enzymen
- exponential or log phase
- hauptsächlich Ribosomen
- Postexpo
- Flagellen (bei manchen, z.B. e.coli), Chemotaxis
- wenn Nährstoffbedingungen schlechter werden
*
16
Q
Isolierung einzelne Kolonien auf Agar Nährplatte
A
drei Strich Methode
17
Q
Gesamt-Zellzahlbestimmung in Zählkammer
A
quantifizierung
18
Q
Lebend-Zellzahl-Bestimmung
A
Verdünnung und Ausplattieren
Rückrechnung
19
Q
Trübungsmessung
A
- Spektrophotometer
- Streuung des Lichts von Partikel in der Probe
*
20
Q
binäre Zellteilung
A
- Teilen in der Mitte
- Bildung Septum in der Mitte der Zelle
- Einstülpung Zellwand
- Zellwand muss wachsen
21
Q
Untersuchung Zellwandsynthese
A
- Markierung Zellwand mit Vancomycin-FL-Färbung
- bindet an D-Ala-D-Ala von Peptidoglykan
- fluoreszenzmikroskopische Aufnahmen
- nur die bereiche färben, die neusynthetisiert werden
- Bacillus
- zuerst überall neusynthese
- Längenwachstum
- zeitpunkt der Teilung überwiegend in Septum
22
Q
Mechanismen der Zellwandsynthese und Zellteilung
A
23
Q
e.Coli Zellteilung I
A
- Längenwachstum
- repliziert Chromosom
- Trennung der Chromosomen, Nukleoide
- Vorraussetzung für nächsten Schritt
- Z-Ring-Bildung
- FtsZ: Protein, filamentous temperature sensitive
24
Q
FtsZ
A
- Ürotein für Zellteilung
- filamentous temperature sensitive
- Punktmutation isolieren
- bei 30° funktional
- WT bei 42° normal
- ftsz Mutante wird lang, keine Septumbildung mehr
- Tubulin homolog
25
e.Coli Zellteilung II
1. 2. 3. Z-Ring Bildng
* Signal für nächsten Schritt
4. Divisombildung
5. Einschnürung Septum
6. Teilung
26
Divisom - Bakterielles Zytoskelett
* Proteinkomplex zuständig für Peptidoglykansysnthese wird an FtsZ-Ring rekrutiert
* neues Septum kan ausbilden
27
MreB - Bakterielles Zytoskelett
* Protein auch zuständig für Zellteilung
* Aktin Homolog
* für Längenwachstum wichtig
* filamentös, kurz
* wandern um Zelle um
* gebunden mit Peptidoglykan maschinerie
28
(!) Bakterielles Zytoskelett - Crescentin
* Protein
* zuständig für Halbmondform *caulibacter*
* abgewandte seite von Crescentin wird mehr Peptidoglykan gebildet
29
Woher weiß Zelle wo die Zellmitte ist?
MinCDE System
30
MinCDE System - Mutanten Experiment
* Mutanten der Gene können nicht Septum in Zellmitte bilden
* können Mitte nicht lokalisieren
* minizellen beinhalten keine DNA
* können sich nicht vermehren
31
MinCDE System Komponenten
* MinC:
* Inhibitor der Z-Ring Bildung
* MinD:
* bildet Membrananker für MinC
* ATPase Aktivität
* MinCD bildet *in vivo* einen heterodimeren Komplex
* MinE
* verdrängt MinCD von der Membran
* möglicherweise durch Auflösung des Heterodimers
32
MinCDE Oszillation
* Mechanismus der Zellmitte-Lokalisierung und Septumbildung in der Zellmitte
* System oszilliert zwischen den Polen
* wandern von einen Zellpol zur nächsten
* MinC-GFP markiert
* MinE-GFP markiert
* Modellaufstellung
* Lokalisierung FtsZ, MinCD und MinE
* MinCD wandert zu Polen, gefolgt von MinE, welches MinCD verdrängt
* über Zeit gesehen in der Mitte der Zelle Konzentration von MinCD am geringsten
* so kann in der Mitte FtsZ ausbilden
33
mittiges FtsZ-Ausbildung : Nukleoid-Ausschluss
*
34
Bakterielle Zellteilung alles
