Zellbiologie Flashcards
1
Q
Amphipathisch
A
Membranen haben zwei Enden, hydrophiler Kopf und Lipophiler Schwanz
2
Q
Micelle
- hydrophobe moleküle
A
Hydrophobes zentrum „lipid monolayer“
- kohlenwasserstoffe haben gleiche affinität zu elektronen = gleiche ladungsverteilung)
3
Q
Vesikel
- hydrophile Moleküle
A
=Liposom
Hydrophimes Zentrum
„Lipid bilayer“
Moleküle mit polaren (O und N haben geößere Affinität zu e- als C und H) = ungleiche Ladungsverteilung
4
Q
Glycerin
A
=dreiwertiger Alkohol
Speicherform, häufigste Vertreter amphipatidcher Moleküle in Membranen
5
Q
Fettsäuren
A
Palmitinsäure (C16)
Stearinsäure (C18) gesättigte
Ölsäure (C18) ungesättigte (Doppelbindung)
6
Q
Glycerinester z.B. triglyceride
A
Nicht in Membranen
7
Q
Phospholipide
Cholesterin
A
z.B. Phosphatidylcholin (hat einen Schwanz mit KNICK/Doppelbindung)
Polarer Kopf
Cholesterin versteift den Bereich zw. den Phospholipiden
-> Abschnitt erhöhter Fluidität
Die Konzentration ungesättigter Fettsäuren bestimmt die „Flüssigkeit“ einer Membran
8
Q
Membranproteine
A
Eine Wand ohne Türen und Fenster ist nutzlos
=Lipiddoppelschicht (Lipid bilayer) mit Integralen Mambranproteinen
9
Q
Durchmesser Membran
A
5nm.
10
Q
Dipeptid
A
Aminosäure + Aminosäure
=Proteine
11
Q
Proteine
A
Bestehen aus verschiedenen hydrophilen und hydrophoben Aminosäuren
COO-
H3N-C-H
R
12
Q
Polar ungeladene Proteine
A
Serin mit R (CH2OH) Threonin +CH3 Asparagin +H2N-C=O Glutamin 2(+CH2) +H2N-C=O Cystein CH2+SH Glycin nur +H Tyrosin + CH2+6Ring ges. mit OH
13
Q
Polar geladene Proteine
A
Lysin Arginin Histidin Glutaminsäure Asparaginsäure
14
Q
Hydrophobe Proteine
A
Alanin Isoleucin Leucin Methionin Phenylanin Tryptophan Valin Prolin
15
Q
Aufgaben Proteine
+ Synthese
A
- geben den Zellen Struktur (Zytoskelett)
- Kommunikation mit dem Extrazellulärraum (Kanäle und Transporter, Signalproteine)
- Machen Zellen beweglich (Zytoskelett)
- Ermöglichen Stoffwechselprozesse (Enzyme)
= werden von im Zellkern lokalisierten Genen kodiert
16
Q
Funktion Kommunikation Zelle mit Außenwelt
& Problem
A
- Einschleusen nützlicher Moleküle (Glukose, AS)
- Export Schädl. Substanzen
- Aufrechterhalten des Ionengradienten K+i>K+e
- Aufrechterhalten des Membranpotentials (innen negativ)
- Signalweiterleidung
Problem Lipiddoppelschicht nur wenig durchlässig für große und geladene Moleküle
17
Q
Mechanismen Kommunikation Zelle-AW und Art von Transport
A
- Einfache Diffusion
- Kanäle
- Transporter (Carrier)
Entweder Akiver Transport (Carrier)
Oder Passiv
Entlang des elektrochemischen Gradienten
18
Q
Transporter (Carrier)
A
Transporter Aktiv oder Passiv (Uniporter)
- Symporter (co-transport Glukose mit Na+ - sekundär aktiv) -> Gradient
- Antiporter: Austausch
- > primär (Na+K+ ATPase - primär Aktiv ATP abhängig)
- > sekundär (Na+ und Ca+) -> Gradient
19
Q
Signalweiterleitung über G-Protein gekoppelte Rezeptoren 1
A
- Ligand bindet an Rezeptor
- Trimeres aßy-Untereinheit G-Protein tauscht GDP durch GTP aus.
- Die alpha-Untereinheut des G-Proteins aktiviert Phospholipase C (PLC)
- PLC spaltet PIP2 zu Diaglycerol (DAG) und IP3
- IP3 setzt Calcuim aus dem endoplasm. Retikulum frei.
- Calcium aktiviert andere Proteine
20
Q
Signalweiterleitung über G-Protein gekoppelte Rezeptoren 2
A
- Ligand bindet an Rezeptor
- Trimeres aßy-Untereinheit G-Protein tauscht GDP durch GTP aus.
- Die aplha Untereinheit des simulatorischen (Gaphas) G-Proteine aktiviert die Adenylatzyklase (AC), die des inhibidorischen (Gaphai) hemmt sie
- die Adenylatzyklase setzt ATP zu zyklischem AMP (cAMP) um.
- cAMP aktiviert Proteinkinasen.
21
Q
G-Protein
A
GDP alpha-Untereinheit
Bindet an den Rezeptor mit Sieben Transmembrandomänen und wird durch Ligand aktiviert
Zellkern Im und Export
22
Q
Auflösung Mikroskop / Auge
A
Auge: 100 um (mykro) 100.000 nm
Lichtmikroskop 200 nm
23
Q
Phasenkontrast
Dicke Hist. schnitte
Und Immunhistochemie
A
5-10 um dicke Schnitte
Die Verteilung von Proteinen kann durch Färbung mit spezifischen Antikörpern bestimmt werden.
24
Q
Floureszenzmikroskopie und Durchlichtmikroskopie
A
Flour. Direkte und Indirekte Immunfloureszenz (mit Sekundär antikörper)
Durchl. = Immunhistochemie
25
Elektronenmikroskop
Aufläsungsgrenze 2nm
Elektronenstrahl wird verwendet
„Durchlicht“ Transmissions Elektronen Mikroskopie
„Abtasten mit Schwermetall“ Raster Elektronenmisroskopie
26
Bestandteile Eukaryontischen Zelle
```
Cytosol (54%)
Mitochondrien (22%) 100/1000 stück 1,5um
Zisterenen rauhes ER (9%)
Zisternen glattes ER & Golgi Apparat (6%)
ZK 5-15 um (6%)
Peroxisomen 400 stück
Lysosomen 300
Endosome. 200 jeweils 1%
```
27
Cytosol
Hier finden viele Stiffwechselreaktionen und die Proteinsynthese statt
28
Zellkern
5-15um
- Enthält das Hauptchromosom, DNA und RNA Synthese
- Kernmembran (Kernskelett wahrscheinlich)
- Heterochromatin (dunkel) Euchromatin (hell)
- Nukleolus
- perinukleärer Raum (Aufhellung)
- Kernporen
29
ER
Synthese der meisten Lipide, Synthese von Proteinen die auf viele Organellen und die Plasmamembran verteilt werden
30
Golgi Apparat
Modifikation, Sortierung und Verpackung von Proteinen und Lipiden zwecks Sekretion oder Versand an andere Organellen
31
Lysosomen
Intrazellulärer Abbau
32
Endosomem
Sortierung von (durch Endocytose) aufgenommenem Material
33
Mitochondrien
ATP-Synthese durch oxidative Phosphorylierung
34
Chloroplasten (in Pflanzen)
ATP-Synthese und Kohlenstofffixierung durch Photosynthese
35
Peroxysomen
Oxidation von toxischen Molekülen
36
Struktur Zellkern
- Kernporen für Imp und Export (Proteine und RNAs bis 5000 Da frei duffusibel)
- Unter innerer Kernmembran liegt Kernlamina, ein Proteingeflecht aus Lamin (Intermediärfilament)
- Emerin bindet an Lamina A und C und an Chromatin = Mutationen in Emerin, Lamina A und C führen zu Muskeldystrophie
- Lamin B-Rezeptor (LBR) bindet an Lamin B und Chromatin = Mutationen in LBR führen zu Skelettdysplasien
37
Import Zellkern
Importin-aplha, Importin-ß, Fracht mit Kernlokalisationssignal = Ausbildung Komplex
- Diffundieren durch Kernpore
- Ran G-Protein (Monomeres GProtein) bindet an Importin-ß = Zerfall des Komplexes
38
Export Zellkern
Ausbildung Komplex Exportin (Protein) mit RanGTP (Monomeres GProtein) mit Fracht mit Exportsignal
- Transport durch Kernpore
- Hydrolyse des RanGTP zu Ran GDP = Auflösung Komplex
39
Chromosomen
Genomische DNA + Verpackungsproteine (Histone und Proteine) = Chromatin
- Spezifisches Bandenmusterbdurch Floureszenzfärbung von Metaphase- Chromosom
- Karyotyo: Chromosomenmuster in einem Zellkern
- Telomere (Ende des Chromosoms mit repetitiven DNA Sequenzen)
- Centromer (besonder Verdichtungsstelle, Anheftungsstelle für Kinetochor und Trennung Schwesterchromatiden während ZT)
40
Gen - messerger RNA - Protein
1. Gen Transkription in ZK (ca. 20.000 Gene human)
Ein Gen ist der Abschnitt der eine RNA erzeugt
- zw. 100 bis 1 Millionen Nukleotide bilden ein Gen
- rund 3000 Gene auf Chromosom
2. Ribonucleinsäure Translation im Cytoplasma an Ribosomen = Protein
Bearbeitung:
Exon (Expressed Region) und Intron (Intragenic region) in Genen
41
Euchromatin und Heterochromatin
- Euchromatin (hell, aufgelockert) aktiver Bereich
Stellen im Zellkern
```
- Heterochromatin (dunkel, dicht) Stellen,
Inaktive Teile (werden nicht transkribiert) entlang der Kernmembran und um Nukleolus
```
42
Nukleolus Bestandteile und Bildung
- fibrilläres Zentrum
- granuläre Komponente
- dichte fibrilläre Komponente
Bildung:
Zusammenlagerung der dür ribosomale RNA kodierende Gene = Nukleolis Organisatoren (200 Genkopien auf 5 Chromosomen)
43
Funktion des Nukleolus
- Synthese ribosomaler RNA
| - Zusammenbau der großen und kleinen ribosomalen Untereinheit (endgültiger Zusammenbau der Ribosomen im Cytoplasma)
44
Proteasom und Zerlegungszyklus
Abbau im Proteasom:
- reagiert auf UBIQUITIN (76 As lang),
- hat eine Faßartige Struktur (26S groß),
- ATP abhängiger Abbau
1. Ribosom trifft auf Startkodon (mRna) -> Proteinsynthese
2. Faltung am Chaperon-Komplex (Posttranslationale Faltung)
3. Bei Aggregierten (fehlerhaften) Proteinen entweder Rückfaltung durch Chaperone an Proteinomplex = Proteasom -> Proteinfragmente
45
Aufbau eines Zentrosoms (nicht membranumhülltes Organell)
Mutter und Tochterzentriol mit je 9 Mikrotubuli Triplets (Zentriol ca. 0,5 um lang und 0,2 um dicker Zylinder)
- durch Vebindungsfasern verbunden
- Perizentrioläre Matrix (y-Tubulin, Pericentrin, Centrin)
- Distale und Subdistale Anhängsel
- Mikrotubuli - und + Ende (schnlles Wachstum)
46
Aufgaben Zentrosom
- Primäres Minkrotubulus-Organisationszentrum (MTOC) -> Es gibt auch MTOCs ohne Zentriolen
- Ausbildung von Basalkörperchen
47
Das Zentrosom während der Zellteilung
1. Frühe G1 Phase: Auflösung der rechtwinkligen Anordnung
2. S Phase: Duplukation der Zentriolen
3. G2 Phase: Trennung der Zentrosomen und Aufbau der perizentriolären Matrix
4. Aufbau des Spindelapparates = Mitose
48
Mikrotubuli
- bestehen aus Heterodimer-Einheiten = a- und ß-Tubulin(moleküle)
- 13 Protofilame te bilden eine Zylinder mit durchmesser 25 nm
- + (schnell) und - (langsam) wachsendes Ende
- mind. 6 Gene kodieren für a- und ß-Tubulin
49
Zentriol vs Zentrosom
Zentriol: 9 MT Tripletts bilden ein Zentriol (unterwinander durch mikrofilamente verbunden)
Zentrosom: zwei Zentriolen ergeben das Tentrosom, ein Organell, wo die Zentriolen organisiert sind MTOC
50
Mikrotubuli Gifte
- Colchicin verhindert Polymerisation von Tubulin (Aubildung des Spindelapparates) von Tubulin
- Taxol (Chemotherapeutikum stabilisiert MT -> Zellteilungsgift)
51
Zyklus Zellteilung
=Zyklus aus Chromosomenverdopplung, Chromosmentrennung und Zellteilung
G0 Phase: Ruhephase, Zellen teilen sich nicht
G1 Phase (gap): Erste Phase des Zellteilungszyklus (nur biochemisch aber nicht morphologisch messbar)
S Phase (synthesis): Replikation der genomischen DNA
G2 Phase: Vorbereitung auf Mitose
M Phase (mitosis): Teilung Zellkern, Zytoplasma und Organellen
- 24h; Interphase und Teilung (wiederholt)
52
Tumorsupressorproteine und Cycline
- Zyklisch erscheinende Proteine = Cycline binden an konstant vorhandene Cyclinabhöngige Kinasen (CDK) = aktivieren Cdk
=> Phosphorylierung von Zielproteinen
- Das Retinoblastom-Protein (Tumorsupressorprotein) inaktiviert den Transkriptionsfaktor E2F
- Inaktivierung durch Phosphatasen (Abspaltung) und durch Abbau der Cycline (nach Kopplung mit Ubiquitin) im Proteasom
- Tumorsupressorproteine hemmen Zelleachtum und Protoonkoproteine (auf Rna Viren) stimulieren Zellwachstum
Cycline sind Mitogene Stimuli (Wachstumsfaktoren) und bilden Komplexe mit den cdk
53
Hyperphosphorilierung
| Hypophosphorilierung
Retinoblastom Protein und Cyclin D oder E Komplex -> Phosphatase des Proteins und Aktivierung des Transkiptionsfaktor E2F = Aktivierung ZZ
Retinoblastom Proteinund besetzt E2F Traskriptiosfaktor = inhibiert
54
Mitose I
Prophase: Chromosomen kondensieren, Mikrotubuli zerfallen, Ausbildung der Mitosespindel
Prometaphase: Auflösung der Kernhülle, Anheftung der Spindelmikrotubuli an die um die zentromere liegenden Kinetochoren
Metaphase: Anordnung der Chromosomen in der Mitte zwischen den Spindelpolen in Äquatorialebene (Metaphasenplatte)
55
Mitose II
Anaphase: zwei dunkle flecken ggüber - Trennung der beiden Schwesterchromatiden
Telophase: Chromosomen sind an den Polen angekommen, Dekondensierung des Chromatins = Endspiralisierung, Ausbildung einer neuen Kernhülle
Cytokinese: Zellteilung (Teilungsfurche mit Aktin und Myosin)
56
Mitose III
| Hyper und Hypoploide Zellen
Menschen haploider Chromosomensatz 23 für Geschlechtszellen, Zellen dipolid Chromosomen: 46 Chromosomen: 44 Autosomen und 2 Genosomen)
Polyploide Zellen (mehrere Chromosomensätze)
- Syncytium (Fusion): Makrophagen oder Syncytiotrophoblasten in Plazenta (3n möglich)
- Plasmodium (Kernspalte): Hepatozyten Kernteilung ohne Zellteilung (exponentiell von 2n)
- Endomitose (Nur 1 Kern Ausbilung): erhöhte Chromosmenzahl weil Mitose bis zur Anaphase aber ohne Telophase abläuft -> bleibt ein Kern -> Megakaryozyten im Knochenmark (immer 2n)
- Endoreolikation (nicht mehr Teilungsfähig): gleiche Chromosomenzahl aber mehr DNA Gehalt weil SPhase ohne Trennung der Schwesterchromatiden - Trophoblastzellen in Plazenta
57
Meiose
Verringerung der Chromosomenzahl und Austausch gen. Material zw homologen Chromosomen = REKOMBINATION
Reifeteilung 1: Trennung homologer Chromosomen
Reifeteilung 2: Trennung der Schwesterchromatiden (analog Mitose)
Bsp. für nicht stattgefundene Trennung: Trisomie 21)
58
Reifeteilung I
Trennung der Homologen (Mutter und Vater)
1. DNA Replikation
2. Paarung der Homologen Chromosomen
3. Homologe Chromosomenpaare stellen sich an der Spindel auf(hier Doppelstranbrüche= analoge Fragmente werden ausgetauscht)
4. Zellteilung I (Zelle enthät jeweils ein Homoges Chromosom)
5. Zellteilung II (Zelle enthält jeweils ein halbes homologes Chromosom)
Reifeteilung II -> Befruchtung -> DNA Replikation -> normale Zellteilung
59
Prophase I wichtig für Oozyten
1. Leprotän (Kondensation Chromosomen)
2. Zygotän (Ausbildung synaptonemaler Komplex)
3. Pachytän (Komplex ausgebildet, Austausch des gen. Materials Crossing Over)
4. Diplotän (Auflösung Komplex, Chiasmata (überkreuzende Chromatiden von Chrssoing over) werden sichtbar)
5. Diakinese
60
Zelltod I
Nekrose: unkoordiniert, kein genetisches Programm
- Organellen schwellen an (Ionengradient durcheinander) evtl. Entzündung
- Zerplatzen der Zelle und des Zellkerns (Karyolyse)
- Auslaufen des Zellinhalts
Apoptose: prgrammierter Zelltod, generisches Orogramm
- Kondensierung der Organellen und des Zellkerns (Karyopyknose): Versunklung
- Zelle bleibt lange intake
- Zerfall in membranumhüllte apoptotische Körperchen (Karyorrhexis)
- Phagozytose der Zelltrümmer
61
Zelltod II Apoptose
Extrinsischer Weg:
Entzug von Wachstumsfaktoren,
Inteinsischer Weg: Todesrezeptor aktiviert durch Bax gegen Bcl (Tumornekrosefaktorrezeptor) und Caspasen, Apaf 1 und Cyt c bilden Komplex= Apoptosom
Durch: Oberflächlichenveränderung, Dna Fragmentierung, Chromatinverdichtung
62
Endoplasmatisches Retikulum
- Membrannetzwerk
- Synthese von Proteinen:
- Ca2+ Speicher
- Synthese von Lipiden
63
Sunthese von Proteinen am ER
Synthese von Proteinen:
1. Durchgangsstation für sezernierte Proteine und integrale Membranproteine: rauhes ER sind freie Ribosomen cytoplasmatische und nukleäre Protine
2. Endständiges Signalpeptid
3. Co-translationaler Transport in das Lumen
4. Faltung der Proteine durch luminale Chaoerona
5. Glykosylierung an NH2 Grupoen von Asparagin
64
Proteinsynthese Biochemische Strukturen
Signalerkennungs-Partikel SRP und Ribosom (mit tRNA= Signalpeptid auf wachsender Polypeptidkette) verbinden sich an Membran
Membran des rauhen ER:
- SRP-Rezeptorprotein,
- Ribosomen-Rezeptor,
- Protein Translokator
Danach wird SRP abgelöst und wiederverwendet
65
Golgi Apparat Funktionen
- Synthese von Kohlenhydraten
- Prozessieru g NH2-gekoppelter Zuckerreste
- Glykosylierung von Proteinen an OH-Gruppen
- Verteilerstation: Lysosomen, trans-golgy-netzwerk, Sekretorische Vesikel
66
Golgi Apparat Aufbau
- Trans-Seite
- und Cis- Seite (von und zum ER)
- Sekretorische Vesikel (runde Kugeln außenrum)
- Trans-Zisternen, Mediale Zisternen, Cis- Zisternen
- Cis-golgi-Netzwerk
67
Exozytose am Golgiapparat
Abknospung eines Transportvesikels
- Anterograder Transport
- COP II-Hülle induziert von ER zum Golgi
- COP I-Hülle vom Golgi zum ER
- Vom Trans-Golgi Netzwerk gelangen Vesikel zur Plasmamembran in Sekretgranula=induzierte Sektretion oder Sekretorische Vesikel=konstituive Sekretion
68
Exozytose
Golgi Expzytose und Abgabe Sekretorischer Vesikelan frühes und spätes Endosom
69
Endozytose
1. Mikropinozytose mit Clatrinkäfigen oder Caveola
2. Makropinozytose (Faltenwurf Zellmembran)
= gelöste Stoffe
3. Phagozytose (ungelöste, korpuskuläre Stoffe)
4. Autophagosom
70
Endo- und Exozytose im Überblick
1. Mikropinozytose mit Clatrinkäfigen oder Caveola
2. Makropinozytose (Faltenwurf Zellmembran)
= gelöste Stoffe
3. Phagozytose (ungelöste, korpuskuläre Stoffe)
4. Autophagosom
Bei der Phagozytose (1) werden größere Partikel (z.B. Bakterien) von der Zellmembran umflossen. Das so entstandene Phagosom fusioniert mit einem primären Lysosom. Es entsteht ein sekundäres Lysosom (Phagolysosom), in dem die Partikel abgebaut werden.
- Durch Pinozytose (2) werden unspezifisch gelöste Stoffe aufgenommen. Das frühe Endosom (pH 6-6,5) fusioniert mit einem primären Lysosom zum späten Endosom (pH 5-6), das zum sekundären Lysosom (Zerlegung durch viele Hydrolasen) ausreift.
! Endosome werden wiederverwertet
- Bei der Exozytose (3) werden Partikel typischerweise im Golgi-Apparat in Vesikel eingeschlossen und an der Zellmembran in den Extrazellularraum abgegeben.
- Bei der Transzytose (4) werden Endo- und Exozytose miteinander gekoppelt. Die Vesikel durchwandern die Zelle und der Vesikelinhalt wird am anderen Ende der Zelle wieder nach außen abgegeben
71
Mitochondrien
- Herkunft eingefangene Bakterien Rickettsien
- Werden von Mutter vererbt
- 0,2-0,5 um
- Durchlässig bis 5 kDa
- Intermembranraum
- Innenmenbran (Cristae, Tubuli oder Sacculi gefaltet)
- Matrix
72
Genom Mitochondrien
Matrix (enthält ringförmiges Genom von etwa 16.500 Basenpaaren) - Mensch 3x10^9 vs. 3x10^4
- Problem: enthalten ca. 850 versch. Proteine aber codiert nur für 13
- Lösung: Nukleär kodierte Proteine werden kn die Mitochondiren transportiert
- Andocken des Proteins am TOM-Komplex (translocase of the outer membrane):
1. Translokation in den Intermembranraum
2. Lateraler Einbau in die äußere Membran
3. Translokation in den Intermembranraum und Umleitung zum SAM-Komplex (sortimg and assembly machinery)
73
Mitochondiren Andocken eines Proteins an einen TIM-Komplex
(Translocase of the inner membrane):
1. Lateraler Einbau in die innere Membran
2. Translokation in die Matrix und Umleitung zu Oxa1 (cytocheome ocidase activity1)
3. Import löslicher Proteine in die Matrix über den TIM23-Komplex
74
Funktion der Mitochondiren
- Gewinnung von ATP durch Aufbau eines Protonengradienten über innerer Membran (Atmungskette, ATP Synthase-> ADP+P)
- Entkopplung des Protonengradienten durch speziellen Transporter in braunem Fett dient zur Wärmeerzeugung (Winterschläfer)
- Fettsäureabbau in Matrix
- Zitrat-Zyklus in Matrix
- Harnstoff Sythese in Matrix
- Synthese von Steroidhormonen (Tubulus und Sacculus)
75
Peroxisomen
- 0,2-0,5 um und kristalline Matrix aus hoch konzentrierten Enzymen
- Fettsäureabbau (lange&verzweigte)
- Entgiftung von Schadstoffen durch Oxidation
- Abbau von H2O2, Cholesterin und Gallensäuren
- Synthese von Plasmalogrn (Etherlipid)
76
Entgiftung von Schadstoffen durch Oxidation der Peroxisomen
O2 -> Oxidase (RH2 wird oxidiert zu R) -> H2O2 (radikale, giftig) -> Katalase (R‘H2 zu R‘)-> H2O
77
Paraplasma - cytoplasmatische Einschlüsse
| Glykogen
Glykogen: Glukose Speicher: wichtig für Stiffwechselprozesse - Entgegen des osmotischen Drucks
- ß-Partikel von 10 bis 40 nm Durchmesser
- a-Partikel bis zu 200 nm (beide va in der Leber, Niere, Unteruserüsen, Vaginalepithel
- Darstellung durch Best‘sches Karmin oder PAS-Färbung im Lichtmikroskop
- schwarze Partikel um Elektronenmikroskop
78
Paraplasma - cytoplasmatische Einschlüsse
| Lipidtropfen
- Energiespeicher Fettlösl. Vitamine EDeKA (va in Fettzellen, Leben, Steroidhormonproduzierenden Zellen)
- Vitamin A-Speicher
- Cholesterin- Speicher
- Darstellung durch Sudanrot im Lichtmikroskop; dunkle homogene Vesikel im EM
79
Paraplasma - cytoplasmatische Einschlüsse
| Ferritin
Speicherform von Eisen
- Eisen-Protein-Komplex von 14 nm Durchmesser (24 Apoferritin-Moleküle umgeben bis zu 4000 Fe(OH)3 Moleküle (va in blutbildenden Zellen)
- Darstellung durch Berlinernlau-Reaktion
Fe III wird in Proteinkomlex gespeichert. <-> Hämosiderin: Fe(OH)3-Aggregate ohne Apoferritin (gefährlich Hämosiderose)
80
Paraplasma - cytoplasmatische Einschlüsse
| Lipofusin
- Überreste von Lysosomen mit nicht weiter abbaubarem Material
- Alterspient = Lipofuszin (va in Neuronen, Kardiomyozyten, Zona reticularis, Nebenniere)
81
Zytoskelett
Funktion:
- Fortbewegung der Zelle
- Aufrechterhaltung und Ausbildung der Zellform
- Intrazellulärer Transport
Familien:
- Mikrofilamente/Aktinfilamente (Aktinzytoskelett) 7 nm Durchmesser
- Intermediärfilamente 10 nm
- Mikrotubuli 25 nm (= Größe Ribosomen)
82
Mikrotubuli Zytoskelett
Aus a und ß-Untereinheiten
- Mikrotubuli-assoziierte Proteine (MAPs) sorgen für die Stabilisierung der Minrotubuli und vermitteln die Wechselwirkung mit anderen Zellbestandteilen
- Motorproteine sorgen für einen Transport zum Plus-Ende (Kinesine) und zum Minus-Ende (Dyneine - Hinrichtung zum Zentrosom): Transportieren Molekül(komplexe) und Organellen(Nervenzellen)
- Mikrotubuli bilden die Grundlage beweglicher Oberflächenstrukturen, der Kinozilien (2-5um lang, Atemwege) und Flagellen (länger, gleicher Aufbau)
83
Axonema
Mikrotubuli Basis Skelett ist Axonema aus (9x2)+2 Mikrotubuli
- 9x2 Duplett außen und 2 in der Mitte
84
Unbewegliche Kinozilien
unbewegliche Kinozilien/ Flagellen führen zu Kartagener-Syndrom (100% situs inversus - Zilien schlagen in falsche Richtung aus, 50% mit situs inversus wenn zilien sich nicht bewegen):
- Chronische Atemwegsinfekte (Flimmerepithel defekt)
- Herabgesetzte Mobilität der Spermien
- Situs inversus (Asymmetrie der Ausbildung an den Enden)
85
Aufbau der Kinozilien
| an Flimmerzellen
- (9x2)+2-Struktur Axonema
- Mikrotubulus-Doublette (A-Tubulus und B-Tubulus -> Zusammenhalt mit Dyneinarmen) außen
- zentrales Mikrotubulus-paar (verbunden über innere Scheide mit Speichen)
- Umgeben von Plasmamembran (über Halsregion mit Sektglasbrücken)
- Spitzenverdichtung (verhinder zu lang werden)
- Basalplatte
- Verankert in Basaler Fuß mit MTOC (Mikrotubulistripletts (verbunden durch Nexin)
- > ohne zentrales Paar) = Basalkörperchen (Kinetosom)
- Fest in Wurzelbündel (Centrinfilamente)
86
Krümmung eines Axonems
- Dynein als Motorprotein: Doubletts werden durch Querverbindungen im Cilium festgehalten
- im Basalkörperchen verankert
- Gleiten der Boubletts führt zur Biegung: Mikrotubuli verschieben sich zueinander/ Abknicken des Kinoziliums
87
Aktin-Zytoskelett
- Quantitativ bedeutsamstes Protein (5-20% des Gesamtproteins)
- Aktinmolekül: Zusammenlagerung globulärer Aktin-Monomere (G-Aktin) zu Aktin-Filamenten (F-Aktin), dabei wird ATP hydrolysiert (ADP bleibt gebunden)
- Aktin-Filamente haben ein schnell wachsenden Plus- zmjnd langsam wachsenden Minus-Ende
88
Aktin-assoziierte Proteine
Regulieren die Organisationsform des Aktin-Zytoskeletts
- Profilin erlaubt Polymerisation (ADP wird gebunden)
- Verhindert die Polymerisation von G-Aktin: Thymosin ß4 (bindet an Aktin-Monomer)
- Erhöht die Polymerisation von G-Aktin: Arp (actinrelatedprotein)-2,3- Komplex: Induziert Arp-2,3-Komplex (auch WASP (WiskottAldrichSydromProtein)
- Erhöht die Depolymerisation von F-Aktin: Cofilin
- Zerstückelt F-Aktin: Gelsolin, Cofilin
89
Aktin-Zytoskelett und Zellmigration
1. Extrazelluläre Stiumli (Wachstumsfaktoren, chemotaktische Signale, Matrixmoleküle) führen zur lokalen Aktivierung von
- kleinen GTP-masen, Lipidkinasen und Proteinkinasen
2. Aktivierung von WASp/Scar (durch Komplex mit anderen Proteinen in inaktiven Zustand)
3. Aktivierung des Arp2,3-Komplexes (Nukleationsfaktor)
4. Indikation von Verzweigungen bestehen der Aktin-Filamente
5. Lineares Wachstum durch Formin und Ena (Elongationsfaktoren)
6. Vorwärtsschieben der Zellmembran
7. Begrenzung des Längenwachstums durch Gelsolin (Kappenprotein)
8. Altern
9. ADF/Cofilin durchtrennt und depolymerisiert Aktin-Filamente
10. Profilin katalysiert den Austausch von ADP durch ATP
- (Pool aus ATP-Aktin mit Profilin)
- Winkel zwischen Mutter und Tochterfilament 70grad
90
Populationen von Aktin-Filamenten
- Lange Filamente im Zellinneren (Aktin-Filamente, Aktin-Profilin, Tropomyosin)
- Verzweigte Filamente an Zellmembran (Aktin-Filamente, Aktin-Profilin, Arp2/3-Komplex, Kappenproteine, ADF/Cofilin)
91
Verknüpfung und Verankerung F-Aktin
Verknüpfung F-Aktin: Fimbrin, alpha- Aktin, Filamin (Vernetzung 50nm)
- Aktinfilamente (je nach Abstand auch mit Motorproteinen)
- alpha-Aktin = kontraktiles Bündel: lockeres Bündel, Myosin-II kann eindiringen
- Fimbrin = paralleles Bündel: kein Eindringen möglich
Verankerung F-Aktin an Plasmamembran: Spektrim, Ankyrin, Dystrophin
- Phalloidin (Knollenblätterpilz): verhindert Depolimerysierung von Aktinfilamenten
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Vorkommen Filamente, Bürstensaum
- unter Plasmamembran (terminales Netz)
- in Zellausläufern (fingerförmig Filopoiden, flächig Lamellipoiden)
- an Zell-Kontakten
-in Mikrovill = Bürstensaum:
Akinfilamente verbunden durch Villin, Fimbrin, umgeben von Plasmamebran, verbunden durch Myosin-I, Calmodulin Seitenarme und über dem Plus-Ende des Minrovillus stark anfärbbarer Bereich (ähnlicher aufbau Kinozilien)
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Myosin
Im Aktin-Zytoskelett
- Motorprotein mit Carboxy und Amino-Ende (Gelenkregion)
- 2nm dicke Doppelwand aus zwei alpha-Helices
- unter ATP verbrauch (Hydrolyse) bindet mit Kopf an Aktinfilament (Bewegung vom Minus zum Plus-Ende
- über 10 verschiedene Vertreter
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Bewegungsformen Myosin
- Verschieben: Vesikel, vesikulärer Transport oder beliebliges verschieben von Aktinfilamenten in Zellperipherie
- Kontrkation: Ineinanderschieben von Aktinfilamenten
- Verschieben an Zellmembran (Plasmamebran)
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Intermediärfilmente
- Mechanisch sehr stabile, intrazelluläre Fasern
- Haben va Stützfunktion
- Arten: Cytokeratine (Epithelzellen), Vimentin (mesenchymale Zellen), Desmin (Muskelzellen bei Z-Scheiben), GFAP (Astrozyten und periphere Gliazellen), Neurofilamente (Nervenzellen), Lamin (Ubiquitär, Kernlamina)
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Aufbau der Intermediärfilmente
- 2 Carboxy (COOH) und Amino (NH2) vebunden durch alpha-helikaler-Bereich = Doppelwendel-Dimer (48 nm lang)
- Tetramer aus zwei verstetzt angeordneten Doppelwendel-Dimeren
- Verbundenen Tetramere bilden ein Geflecht
