Вирусология Упражнения

Question 1

видове клетъчни култури според начина им на получаване

Answer 1

първични (без пасиране; запазена морфология на тъканта, от която произходжат);
диплоидни (могат да се пасират като на всеки 10 пасажа се прави кариотипен анализ да се види дали диплоидността е запазена);
трайни (издържат над 70 пасажа без увреждания; получават се както от трансформирани, така и от нормални тъкани)

Question 2

видове клетъчни култури според начина на посяване

Answer 2

монослойни/суспензионни

Question 3

видове хранителни среди според състава им

Answer 3

естествени (трудно се стандартизират);
полусинтетични (добавя им се животински серум);
синтетични (вместо животински серум, всичките вещества в него са заменени със синтетични такива)

Question 4

видове хранителни среди според предназначението им

Answer 4

растежни (10% FBS за намножаване на клетки;
поддържащи (5% FBS за жизненост на клетките)

Question 5

кои са фазите на растежната крива на клетки

Answer 5

lag/log/stat/death

Question 6

за доказване на какво са трите вида blotting?

Answer 6

northern - RNA
southern - DNA
western - protein

Question 7

какво са гнотобионти

Answer 7

стерилни животни, които са лишени от всякакви МО или имат 1 или няколко известни на експериментатора МО

Question 8

начини на заразяване в кокоши ембрион и количество на инокулума

Answer 8

в ХАМ - до 0.2 мл вирус;
в алантоисния сак - до 0.2 мл вирус;
в амниотичния сак - до 0.1 мл вирус;
в жълтъчния сак - до 0.5 мл вирус

Question 9

начини на заразяване на опитни животни

Answer 9

• дихателни пътища (до 0.5мл във всяка ноздра);
• интравенозно (в опашната вена, иглата се държи под остър ъгъл и се набожда последната 1/3 на опашката - за миши 1мл, за плъхове 2мл);
• вътремускулно (в бедрения мускул; за мишки 0.25мл, за плъхове до 1мл, за зайци до 5мл);
• вътрекоремно (главата на животното се държи надолу, за да може органите да се сместят към диафрагмата, 1мл);
• вътремозъчно (на големи животни чрез трепанация, на зайци през окото конюктивално, субконюктивално или корнеално);
• подкожно (в кожата зад тила, 0.5мл за мишки, до 3мл за плъхове);
• вътрекожно (депилация на козината, иглата е почти успоредна, получава се мехурче, ако е успешно, до 0.2мл);
• втриване (депилация, драскотини, заразяване)

Question 10

какво е вирусен титър

Answer 10

брой инфекциозни единици за единица обем

Question 11

какво е инфекциозна единица

Answer 11

най малкото количество вирус необходимно за предизвикване на инфекция

Question 12

методи за определяне на вирусен титър

Answer 12

базирано на вирусната инфекциозност (за вируси с ЦПЕ);
базирано на биологични/химични особености на вируса

Question 13

методи базирани на вирусната инфекциозност

Answer 13

плакоформиране/крайните разреждания

Question 14

видове ЦПЕ

Answer 14

• струпване, окръгляне, умиране на клетките;
• синцитии

Question 15

какво е ЦПЕ

Answer 15

Цитопатичният ефект представлява промените, които настъпват в клетката след заразяване с вирус. Тези промени могат да бъдат наблюдавани чрез светлинен микроскоп и могат да включват промени във формата и размера на клетката

Question 16

обвивки на кокошия ембрион (отвън –> навътре)

Answer 16

подчерупчеста ципа;
въздушна камера;
хорион-алантоисна мембрана;
алантоисен сак;
амниотичен сак;
жълтъчен сак;

Question 17

методи за изолиране

Answer 17

трикратно размразяване и замразяване на клетъчни култури;
ултразвук (КК);
пестикови хомогенизатори (тъкани)

Question 18

методи за пречистване

Answer 18

преципитиране на вируса;
центрофугиране (нискообортно; високооборотно;
плътностен градиент (зонално, изопикно);
ултрафилтруване;
хроматографски методи (неспецифични - нискомолекулноситова; специфична - афинитетна)т

Question 19

методи за доказване

Answer 19

индиректно (поява на ЦПЕ/реакция на хемаглутинация/реакция на хемадсорбция);
директно (електронна микроскопия, ELISA, PCR, Western blot, имунофлуоресценция)