201-300 Flashcards
(100 cards)
1
Q
LOD
A
Limit of detection
2
Q
LOQ
A
Limit of quantification
3
Q
Accuratezza
A
Vicinanza al valore vero
4
Q
Precisione
A
Vicinanza tra i valori ripetuti
5
Q
Selettività
A
Riconoscimento analita in presenza di interferenti
6
Q
Sensibilità
A
Pendenza della retta di taratura (m)
7
Q
Stabilità
A
Capacità di un analita di non degradarsi nel tempo
8
Q
Perché si usa l’alta risoluzione?
A
Per avere informazioni sulla precisa composizione elementare, riuscendo a distinguere ioni isobari
9
Q
cos’è MSMS breakdown
A
Curve gaussiane che indicano l’energia di collisione (CE) migliore per avere la più alta sensibilità su uno
specifico frammento originato dallo ione precursore
10
Q
L’intensità dipende dal flusso?
A
No, dipende dalla concentrazione
11
Q
Cos’è l’IMR
A
Limite massimo di residui; massima quantità legalmente ammessa di un residuo di sostanza (es. pesticida, farmaco veterinario) in un alimento o mangime
12
Q
Densità urina
A
Maggiore all’acqua (circa 1 g/ml) -> 1,015 - 1,022 g/mL
13
Q
Metodi di preparazione del campione
A
Diluizione, pre-concentrazione, estrazione, purificazione
14
Q
Clean-up
A
Purificazione della matrice
15
Q
La trappola ionica ha un’accuratezza di 0,1 ppm
A
No, perché è a bassa risoluzione ed ha valori alti in ppm (50-200 ppm)
16
Q
Ionizzazione corticosteroidi
A
APCI
17
Q
HFPA
A
Acido eptafluorobutanoico, usato per la determinazione della tetradotossina (TTX)
18
Q
MIMS
A
Membrane Introduction Mass Spectrometry (inserimento dell’analita su membrane semipermeabili)
19
Q
DLI
A
Direct liquid introduction
20
Q
FIA
A
flow injection analysis: introduzione con pompa a siringa nella sorgente
21
Q
GLC
A
Cromatografia gas-liquido per separare gli analiti vaporizzati nei capillari (colonne SCOT/WCOT).
Colonne capillari rivestite da oli siliconi.
22
Q
Bleeding
A
Rilascio della fase solida in analizzatore, aggiungendo così delle interferenze
23
Q
On column
A
Lavorare in splitless e avere massima riproducibilità nell’iniezione
24
Q
Liner
A
filtri di lana per facilitare accoppiamento GC-MS
25
Purge and trap
sistema di flusso dinamico per analisi dello spazio di testa. È un sistema in cui un fluido gassoso viene fatto transitare nel campione, trascinando via le molecole di
composti organici volatili all’interno di una trappola fredda che va a ricondensare i composti volatili,
facendoli tornare allo stato liquido.
È un classico metodo dinamico di concentrazione.
26
Cone voltage
Potenziale applicato allo skimmer all’ingresso dello strumento
27
Helix Pomatia
Miscela di enzimi arilsulfatasi e beta-glucoronidasi che facilita la scissione dell’estere solfonato; lavora a
pH 5.2
28
Colonne chem-elut
Tipologie di colonne per RP
29
FS Strata x3
Materiale polimerico a scambio cationico
30
Permetilazione
Tutti i gruppi OH vengono trasformati in eteri metilici, impedendo la deprotonazione dell’alcol ed il fatto che stabilisce legami H.
31
Cross-link
Noti come “AGE”, sono biomarcatori usati come segnali precoci di diabete, provenienti dalla derivatizzazione delle proteine
32
Vantaggi HILIC rispetto alla fase normale diretta
Si può usare acqua, per cui è possibile agire come nella reversed phase sia in SPE che in cromatografia
33
SFC
Cromatografia a fluido supercritico. Tra i fluidi più importanti vi è la CO2 supercritica, spesso utilizzata
per separare i lipidi dato che la CO2 è un ottimo solvente per questi ultimi. Sia GC che HPLC.
34
QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe)
È un sistema molto efficiente che permette di abbinare il processo di estrazione e di purificazione, che
coinvolge sia un processo di estrazione con salting-out (in acetonitrile) che un’estrazione SPE in fase
dispersa (d-SPE) per rimuovere interferenze legate alla matrice.
35
Effetto matrice
Di solito con composti molto polari si vede nel primo tratto del cromatogramma, ma si può osservare anche nella parte terminale nel caso di un cromatogramma RP eseguito con gradiente
36
Parametri fondamentali da considerare in SPE
Fase estrattiva, saturazione dei siti, fasi di lavaggio, interazioni, ritenzione, pH
37
Tratto caratteristico degli androgeni
Sono privi di azoto
38
Range in cui cade lo ione molecolare più abbondante negli steroidi
Range m/z=180-300 a seconda del numero di atomi di ossigeno
39
Regole McL (caratteristiche ione molecolare)
Sono tre:
È lo ione con massa maggiore, quando z=1; ha numero dispari di elettroni (OE.+); deve essere in grado di
generare ioni importanti nella regione ad alti valori di massa, per cui vicino a se stesso, per perdita di
specie neutre. RULE OH THUMB (regola massima): più è stabile la specie e meno frammenta.
40
Forze dei processi RP-SPE
sono idrofobiche, polari e ioniche, con un ordine crescente di intensità energetic
41
Accoppiante ionico
Un accoppiante ionico per anioni può essere il tetradecilammonio, per cationi il dodecilsolfato di sodio
42
Acido perclorico nei campioni di plasma e urine
è usato per deproteinizzare plasma e urine in preparazione all’analisi spettrometrica, abbassando
drasticamente il pH e precipitandone le proteine
43
Cosa sono EPO Stealth e come si analizzano
sono eritropoietine modificate con PEG o altre modifiche glicosidiche per mascherarne l'origine. Si
analizzano con metodi MS ad alta risoluzione dopo digestione o top-down
44
ESI o APCI per derivati del colesterolo
è preferibile ESI perché questi composti ionizzano male e richiedono l’uso
di addotti in modalità negativa
45
Da che nucleotide si ha la formazione dello ione tropilio
Lo ione tropilio (m/z 91) si forma da idrocarburi alchilbenzenici, come il toluene; non deriva da un
nucleotide
46
HRMS (definizione)
Spettrometria di massa ad alta risoluzione, usata per identificazioni accurate (ppm) e formula bruta
degli ioni
47
Frammentazione (o attivazione?) CID
CID (collision-induced dissociation) è una tecnica di frammentazione che induce collisioni tra ioni e gas
inerti per generare ioni frammento
48
Famiglia di composti che produce una serie di ioni deltaM=14
La famiglia degli alcani ramificati o composti con catene alchiliche dà spesso frammentazioni con ΔM =
14 Da (serie omologhe).
49
Ione molecolare EI
lo ione molecolare è poco abbondante perché è uno ione radicale positivo instabile e tende a frammentarsi rapidamente
50
Alta risoluzione
consente di distinguere masse molto simili e attribuire una formula molecolare esatta agli ion
51
Solventi più pesanti o più leggeri dell’H2O
I solventi clorurati (es. cloroformio, diclorometano) sono più pesanti dell'acqua e si stratificano sotto la
fase acquosa nelle estrazioni LLE
52
Gli steroidi possono perdere acetone?
Sì, gli steroidi possono perdere acetone (58 Da) durante la frammentazione, per esempio nella rottura
del sistema ciclopentanoperidrofenantrenic
53
3 soft ionization
ESI, APCI e MALD
54
DDA
(Data Dependent Acquisition) è una modalità di acquisizione dati in spettrometria di massa dove
la strumentazione seleziona automaticamente gli ioni da frammentare.
55
Eluenti per cromatografia delle proteine
dipendono dal tipo di cromatografia; si usano tamponi acquosi con sali e gradienti di pH o forza ionica,
spesso con modulatori come acido formico o ammonio acetato
56
Sequence Coverage per il bottom up
indica la percentuale di sequenza proteica ricostruita tramite frammentazione degli ioni peptidici (b/y) in MS
57
Regola di Stevenson
le rotture omolitiche (che generano radicali) in spettrometria di massa avvengono più
facilmente su legami deboli e vicino a centri elettron-donatori
58
Quali dopanti vengono estratti per metilazione estrattiva
sono quelli con gruppi acidi deboli (A⁻) che formano coppie ioniche con sali organici (es.
tertaesilammonio) e reagiscono con ioduro di metile nel toluene
59
Isobari 44.026 e 43.99: che molecole sono?
sono CO₂ e acetaldeide; distinguibili solo con spettrometria di alta risoluzione
60
Lavaggio SPE
serve a rimuovere interferenti: con solventi organici per neutri, tamponi per ionizzati. È uno step
selettivo e critico
61
Perdita di 32 da stimolanti
può indicare la perdita di metanolo (CH₃OH) o di un gruppo metile ossidato (CH₃O)
62
Lisina, istidina, arginina, cosa hanno in comune?
sono amminoacidi basici, tutti contenenti gruppi funzionali protonabili a pH fisiologico.
63
Per l’SPE è necessario il vuoto
No, per l’SPE non è necessario il vuoto. Il campione passa per gravità o sotto pressione, spesso a
pressione atmosferica
64
Metodo di ionizzazione per costicosteroidi
I corticosteroidi sono analizzati preferibilmente con tecniche di ionizzazione soft come ESI o APCI,
spesso previa derivatizzazione
65
i più importanti agenti deproteinizzanti
sono acido perclorico, acetonitrile e metanolo.
66
SPME
SPME (Solid Phase Micro Extraction) è una tecnica di prelievo diretto su fibra rivestita, utile per
campioni complessi senza uso di solventi.
67
Su quale principio di basano i RAM
nelle sferette entrano le molecole che devono essere fermate mentre le proteine grosse vengono
eliminate. Il meccanismo è simile all’esclusione dimensionale. Una volta eliminate le grandi
molecole, si inverte il flusso usando metanolo e si liberano le piccole molecole, ovvero gli analiti. La
FS è una silice diolica.
68
Che reazione c’è tra le proteine plasmatiche ed effetto matrice
Le proteine plasmatiche possono contribuire all’effetto matrice perché competono nella
sorgente con gli analiti, influenzando l’efficienza di ionizzazione
69
Con quale sorgente è possibile formare ioni deprotonati
ESi in modalità negativa
70
Posso interfacciare LC e MS usando sorgente MALDI
No, LC non può essere interfacciata direttamente con MALDI per incompatibilità tra flusso liquido e
ionizzazione sotto vuoto di MALDI
71
È possibile interrompere il vuoto tra i vari step SPE
Si, ma bisogna fare attenzione a non compromettere la separazione efficiente degli analiti e la pulizia del campione
72
In quali casi viene utilizzata la cromatografia RP con accoppianti ionici per LCMS in tossicologia
è usata quando gli analiti ionici devono essere resi neutri per una migliore ritenzione su fase C18
73
Cosa hanno in comune ioni acilio e ioni carbenio
i primi (generati da rottura sigma) e i secondi (alfa) generano una serie crescente dal 29 in su + unità 14.
74
È possibile interfacciare HPLC e EI-MS?
No, HPLC non è compatibile con EI-MS perché l’ionizzazione elettronica richiede il vuoto e analiti
gassosi, mentre HPLC lavora in fase liquida
75
Perché esistono preparazioni farmaceutiche di insulina con aa scambiati?
servono a modificarne la farmacocinetica, ad esempio per ottenere insuline ad azione rapida o
prolungata
76
La sorgente API più adatta all'analisi dei beta-bloccanti androgeni è ESI o APCI?
a sorgente ESI è preferita per i beta-bloccanti androgeni perché questi composti contengono gruppi
basici (ammino) ionizzabili positivamente in ESI
77
I lipidi possono essere causa dell’effetto matrice?
Sì, i lipidi possono causare effetto matrice, in particolare i fosfolipidi che interferiscono a tempi di
ritenzione elevati in cromatografia RP
78
Il picco base in EI-MS è sempre lo ione molecolare?
No, in EI-MS il picco base non è necessariamente lo ione molecolare; spesso è un frammento più stabile
e abbondante
79
È possibile usare la diluizione quale tecnica di preparazione del campione?
Sì, la diluizione è una tecnica di preparazione del campione semplice ed efficace per ridurre l’effetto
matrice, ma può abbassare la sensibilità
80
Che ruolo ha la spettrometria di massa ad alta risoluzione nello studio delle frammentazioni?
La spettrometria di massa ad alta risoluzione (HRMS) permette di distinguere frammenti con masse
molto vicine grazie alla precisione in ppm
81
Qual è il maggior limite della ionizzazione APPI?
è la bassa efficienza su analiti polari o poco volatili.
82
Indicare un accoppiante ionico per cationi ed uno per anioni
Un accoppiante ionico per cationi è l’acido ottano-solfonico (C8), mentre per anioni si usa
l’esadeciltrimetilammonio
83
Cosa sono ed è possibile analizzare via MS le preparazioni di EPO "stealth"?
Le EPO “stealth” sono preparazioni con glicosilazione alterata per evitare il rilevamento. Si analizzano
via LC-HRMS o tecniche immunochimiche
84
In quali condizioni di tempo, pH e temperatura agisce la betaglucuronidasi?
La betaglucuronidasi agisce a pH 5-7, a 37 °C, per 1-2 ore, in condizioni blande per idrolizzare i coniugati
glucuronati
85
In quali spettri di massa si osserva la formazione dello ione tropilio?
Lo ione tropilio si forma da idrocarburi aromatici alchilati in spettrometria EI, come il toluene (m/z 91)
86
Elencare almeno tre solventi organici immiscibili con acqua e indicare se sono più leggeri o più pesanti
di essa:
leggeri -> etil acetato, etiletere, ottanolo, esano, eptano, toluene; pesanti ->
CH2Cl2(diclorometano), CHCl3 (cloroformio), CCl44.
87
Solventi miscibili con H2O in LLE
metanolo, etanolo, acetonitrile, acetone, THF. Sono usati come
modificatori organici che danno ponti H.
88
Massa monoisotopica
massa esatta della specie prendendo l’isotopo più abbondante in natura
89
massa molecolare
massa mediata
90
Sangue (pH, densità, volume, composizione)
pH 7.35-7.45;
Densità 1.041-1.062 g/ml;
volume 5l;
composizione: acqua (92%), proteine (70 g/l), composti organici non proteici, Sali minerali.
91
Urina (pH, densità, volume, composizione)
ph 4.4-8 (circa 6);
densità 1.015-1.022 g/ml;
volume 1,6L;
composizione acqua (99%), composti organici (urea, ammoniaca, acido urico, creatinina, aa liberi), Sali minerali, tracce di vari metaboliti (acido ippurico) ormoni, vitamine ed enzim
92
Proteine nell’urina
La presenza di proteine nelle urine (proteinuria) è un indice di danno renale, in particolare a livello glomerulare.
93
TCA
Acido tricloroacetico
94
Esempi di modificatori organici
ACN E TCA
95
TIC
corrente ionica totale (sono i segnali del cromatogramma dovuti alla somma di tutti gli ioni che
arrivano al MS
96
Tipi di SPE
PH, CH, CN, 2OH, SCX, SAX, WCX, WAX
97
Interazioni in IAE?
VDW, dipolo- dipolo, dipolo-indotto, legame H (NO COVALENTI)
98
MIP
molecular imprinted polymers, polimeri a stampo molecolare (hanno alto PM e legano molecole
specifiche). Un esempio acetominofene ovvero il paracetamolo
99
MCX
mixed mode cation exchanger (= scambio cationico a modalità mista)
100
LLOQ
lower limit of quantification ( concentrazione limite, corrisponde al punto più basso della
retta di calibrazione)
