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Antidoping > 401-487 > Flashcards

401-487 Flashcards

(87 cards)

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1
Q

Perdita 29

A

CH3N

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2
Q

Stimolanti in EI-GC/MS

A

H20 (18); HCN(27);CH3(15); CH3O- (31); CH3OH (32)

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3
Q

Steroidi in EI-GC/MS

A

H2O (18); CH3 (15); CH2CO (42); CH2=CH-OH (acetaldeide) (44); CO2 (44);
formaldeide (30); CO (28)

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4
Q

Diuretici in EI-GC-MS

A

SO2 (64), Cl (35), HCl (36), dietilammina (45), CH3 (15)

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5
Q

Farmaci che agiscono sul beta recettore in EI-GC/MS

A

Cl (35), HCl (36), CH3BO (42)  caso in cui la
molecola è stata derivatizzata prima con acido boronico; CH3 (15)

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6
Q

Diuretici ormotici e plasma volume expanders in EI-GC/MS

A

CH2CO (42); CH3COOH (60), O-CH2-CH2
(44)

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7
Q

Stimolanti in ESI-LC/MS

A

CH3 (15); H20 (18); CH3NH2 (31); H2 (2); CO (28); CH2=CH2 (28); NH3 (17);
NH2-CH-=NH (43 o 44?), CH2CO (42); CH3OH (32), acido benzoico (122).

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8
Q

Steroidi in ESI-LC/MS

A

HCl (36). Nb: se la molecola non contiene Cl o se non vediamo picchi isotopici
nello spettro (Cl 37) possono essere 2 molecole di H2O. ; acetone + H2O =76

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9
Q

Rule of thumb

A

la stabilità degli ioni molecolari diminuisce nel seguente ordine: aromatici > alcheni
coniugati > alcheni > alchini > c carbonilici > alcani lineari > eteri > esteri > ammine > acidi carbossilici >
alcoli > alcani ramificati.

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10
Q

Effetto tossico ed effetto dopante, differenze?

A

Effetto tossico provoca danni all’organismo, effetto
dopante modifica le prestazioni sportive

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11
Q

Cosa può interferire con l’analisi LC-MS del sangue?

A

la presenza di proteine che danno effetto matrice
 dobbiamo deproteinizzare

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12
Q

Differenza tra SPE online e offline

A

offline viene fatta dall’operatore su una o più cartucce, online
viene fatta dallo strumento programmato su 10-100-1000 campioni.

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13
Q

cos’è il fluido celebrospinale

A

detto anche liquor o liquido cefalorachidiano che rappresenta la
composizione del SNC rispetto al sangue

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14
Q

con cosa si analizza il sangue e perché?

A

Essendo fatto al 92% da acqua, si utilizza la cromatografia HPLC.

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15
Q

Volume totale sangue umano

A

5L

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16
Q

La diluizione semplice può essere considerata come una tecnica di preparazione del campione?

A

si, nel
caso di analiti molto concentrati. Porta ad una diminuzione del rumore.

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17
Q

Cos’è il recupero in fase di estrazione delle proteine?

A

è la resa di estrazione globale.

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18
Q

Perché non si usa l’etanolo per deproteinizzare?

A

perché forma un azeotropo difficile da distillare, in cui
c’è sempre una certa quantità di acqua.

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19
Q

Come si misura l’effetto matrice?

A

Per misurare l’effetto matrice si confronta la risposta dello analita infuso continuamente con e senza presenza della matrice, iniettando quest’ultima nel sistema cromatografico.

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20
Q

Vantaggio SPE vs LLE?

A

L’SPE non viene ripetuta ed è automatizzata.

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21
Q

% di estrazione in LLE

A

%E=(100*D)/(D+Vw/V0) dove D è il coefficiente di distribuzione

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22
Q

Scambiatori forti e deboli in SPE?

A

(SCX  scambiatori cationici forti; SAX  scambiatori anionici forti;
WAX  scambiatori anionici deboli; WCX  scambiatori cationici deboli)

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23
Q

Cosa si utilizza per la valutazione quantitativa in SPE

A

Lo standard interno (rapporto di estrazione
rispetto alla quantità di standard inserito.

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24
Q

Cosa si usa in MS come standard interno?

A

Composti marcati non radioattivi (deuterio, C13).

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25
Clenbuterolo
anabolizzante in doping, farmaco beta agonista. Non è volatile ma può essere derivatizzato.
26
Come vengono analizzati i corticosteroidi?
Con SPE su materiale apolare. Sono visibili in matrice cheratinica. L’estrazione viene fatta con solvente.
27
Stanolozolo
steroide anabolizzante androgeno. Ioni: [𝑀+𝐻]+ e frammenti con perdita di CH₃ (m/z 15) e scissioni degli anelli steroidei.
28
Salvinolina
allucinogeno. Estrazione basica con K2CO3.
29
Difetto di massa dell’ossigeno
ossigeno è considerato 16 come massa ma la sua massa esatta è meno  15.997 quindi più ossigeni ci sono maggiore è il difetto di massa. Questo permette di riconoscere i metaboliti ossidrilati
30
Cosa può dare interferenza?
Proteine (tolte con RAM), composti polari  fosfolipidi  testa polare e coda idrofobica.
31
Spettro di massa
grafico cartesiano che rappresenta le intensità sull’asse delle y e il rapporto m/z sull’asse delle x. 563. Tipi di analisi ch
32
Tipi di analisi che possiamo fare
untarget (quando non sappiamo la molecola di provenienza); target (bersaglio), notes/unotes quando abbiamo delle sostanze note ma non sappiamo se presenti nel campione; unnotes/unnotes quando abbiamo sostanze che sappiamo che esistono ma non hanno una struttura a noi nota.
33
La volatilità è proporzionale al PM?
No, dipende da relazioni intermolecolari
34
Cos’è il coefficiente di partizione? Dipende dai valori di pH?
? Valore che descrive l’affinità dell’analita per FS. P = [X]oct/[X] H2O; dipende dai valori di pH
35
Come i sostituenti elettron attrattori influenzano le funzioni acido/base?
La pKa diminuisce, quindi riduce la basicità
36
Come i sostituenti alettron donatori influenzano le funzioni acido base?
La pKa aumenta, quindi la molecola diventa più basica (acidità diminuisce)
37
Anfolita
Una molecola che quando si discioglie in acqua può comportarsi sia da acido che da basa (es. Ar-NH2)
38
SDLLE
Single drop LLE (solo in una goccia)
39
Descrivi l’interazione polare CN-SPE?
Permette di estrarre composti che hanno una parte polare (OH in un aromatico) e allo stesso tempo interagisce con interazioni idrofobiche con policiclici aromatici grazie alla sua catena
40
Descrivi eluizione guidata da pH di una basa tramite materiale SCX-SPE?
(Scambiatore cationico forte) l’eluizione è fatta in una soluzione con un pH tale da rendere neutro l’analita (pH>pKa catione di 2 unità
41
Come può essere attivato dal pH un assorbente SPE a scambio anionico debole?
Soluzione con pH
42
Quando si utilizza l'SPE a fase inversa a coppie anionici?
Per composti ionici che hanno anche una porzione apolare
43
Descrivi quando è importante il controllo del pH in SPE?
Nel determinare ritenzione ed eluizione dei composti ionizzabili nella fase inversa; controllando il pH della fase mobile si può controllare l’idrofobicità relativa di un composto ionizzabile
44
Quali solventi si usano per SPE silica (RP)?
FM polare (acquosa) o moderatamente polare e FS non polare  attraverso interazione idrofobiche estraggo analita non polare
45
SDME
E tecnica che usa fibra in silice fusa rivestita da una piccola quantità di FS adsorbente. Si usa poco solvente o niente. Estrazione e purificazione in un unico step
46
SCX con cosa carico e con cosa eluisco?
CAB: Per cationi carico con acido (solfonati) eluisco con base
47
SAX
ABA: per acidi, carico con base (ammonio quaternario) eluisoc con acido
48
SBSE cos’è?
Tecnica di estrazione in fase solida simile all’SPME ma che sfrutta delle ancorette magnetiche. Aumenta l’area superficiale e di conseguenza migliore l’efficienza dell’estrazione
49
M+40
addotto con il potassio
50
pH per caricamento propranololo:
acido
51
Quando si usano gli addotti?
Si usano con quei composti che non hanno azoto o (…) e quindi danno difficilmente ioni positivi o negativi. Si usano addotti con fluoruro per quel che riguarda ioni negativi e addotti con ammonio per quel che riguarda ioni positivi
52
Ordine di grandezza del sodio nel sangue?
g/L oppure mmol/L
53
Quali isotopi hanno abbondanza maggiore del 2% e quali minore del 5%?
Maggiore del 2% cloro e bromo. Minore del 5% ossigen
54
Diagramma di breakdown?
Per valutare l’intensità di ioni in funzione della CE  quello con abbondanza maggiore viene usato per analisi quantitativa solitamente l’intensità è alta al tempo 0 e per CE=0, poi si riduce.
55
Definisci “energia di ionizzazione” in MS?
energia minima richiesta per allontanare un elettrone da una molecola/atomo.
56
Come si scrive un ODD electro ion formato con EI?
OE+°
57
L’ESI si utilizza solo con acidi e basi forti?
No, però con acidi e basi forti c’è una maggiore sensibilità. Si può usare anche con basi organiche.
58
In ESI l’intensità del segnale dipende del flusso?
No, dipende dalla concentrazione
59
L’ESI richiede proprietò acido-base?
Si
60
MALDI è adatta per MSI
sì
61
Scrivi 2 M+2 atomi (isotopic pattern) ?
Cloro (³⁵Cl ~75%, ³⁷Cl ~25%) e bromo (⁷⁹Br ~51%, ⁸¹Br ~49%)
62
Ionizzazione ESI + può avvenire solo su N?
No perché la protonazione dipende dal pH in soluzione, mentre in fase gassosa dipende dall’affinità protonica
63
Dove avviene la perdita di etino?
dal benzene ionizzato
64
Perdita di 45 diuretici?
Dimetilammina
65
Perdita 31 da diuretici
Metilammina
66
cosa differisce tra testosterone e nandrolone?
in nandrolone ha un CH3 in meno
67
Importanza tossicologica ketotestosterone?
? Inibisce l’enzima responsabile della conversione del cortisone nell’ormone cortisolo. Nei pesci è l’androgeno principale, svolge le stesse funzioni svolte dal testosterone nell’uomo.
68
Cos’è la glucoronazione?
È una derivatizzazione che fa l’organismo per rendere il composto + polare + solubile in H2O. Attiva una trasformazione chimica con formazione di leg covalente. Per rompere questo legame bisogna usare un enzima specifico.
69
Cos’è il tetraidrogestrinone
Steroide completamente sintetico prodotto dall’azienda BALCO con effetti anabolizzantI
70
clenbuterolo proprietà acido o base?
Basiche
71
quante sono le cariche degli steroidi?
una sola carica
72
Norcocaina e benzoilecgonina hanno lo stesso peso dello ione molecolare?
no
73
Acido miristico insulina
l’assunzione produce alto aumento del colesterolo. Facilita il legame dell’insulina con l’albumina nel plasma e nei fluidi interstiziali. Utilizzato per modificare la biodisponibilità dell’insulina→ amidifico il gruppo NH2 della lisina terminale con acido miristico (grasso) e aumenta l’idrofobicità molecolare.
74
Acido salicilico gonadotropino (o neuroamminico) ?
Per riconoscere origine esogena. Se è presente vuol dire che è stato introdotto tramite ingegneria genetica (casi di doping)
75
Che ruolo ha l’elettroforesi bidimensionale nella proteomica?
Tecnica di separazione che discrimina in pase al pI e alle dimenioni molecolari delle proteine. La separazione avviene su gel formazione mappa
76
Come possono essere digerite le proteine prima dell’acquisizione?
Degradate con enzimi come tripsina, chimotripsina e pepsina
77
78
Quali peptidi ottenuti con digestione saranno eluiti prima in un gradiente RPLC?
quelli a maggiore polarità
79
Quando è importante usare le ION MOBILITY per separare peptidi?
Per separare nell’ordine di grandezza dei millisecondi . la ion mobility, permette di separare isomeri con struttura spaziale diversa (es. proteine lineari e proteine globulari)
80
Struttura del frammento a di Biemann?
Ionizzazione che corrisponde alla perdita del gruppo carbossilico (CO₂) dall’ione b, ovvero a=𝑏 − 𝐶𝑂2 (Da controllare)​ .
81
È possibile estrarre selettivamente fosfolipidi da un composto biologico?
Si, con separazione non polare
82
Differenza tra ion exchange e ion pair in cromatografia?
ION PAIR: si usa una molecola con carica opposta a quelle dell’analita legato alla FS. Si parla di ION PAIR (coppia ionica) solo se il controione ha una sua idrofobicità che può modificare il tempo di ritenzione sulla FS
83
ION EXCHANGE
E: si usa una RP standard (RPC) e in soluzione si mettono molecole ioniche che interagiscono con l’analita rendendolo più neutro e affine alla colonna
84
Utilizzo accoppiamento ionico in RP HPLC-MS?
servono a riconoscere molecole molto polari modificando FS o FM. Es. ac trifluoroacetico
85
DDA?
Dried droplets analysis: lo spettrometro di massa seleziona gli ioni peptidici più intensi in una prima fase della spettrometria di massa tandem; quindi, vengono frammentati e analizzati in una seconda fase della spettrometria di massa tandem
86
Definizione risoluzione LC
è la capacità di separare due picchi cromatografici; dipende da efficienza della colonna, selettività e ritenzione.
87
Risoluzione TOF
10000

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