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Antidoping 1-100 Flashcards

(100 cards)

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1
Q

Cos’è la Biblioteca Nist?

A

(National Institute of Standards and Technology) È una biblioteca di spettri di massa per riconoscere molecole basandosi su un indice di somiglianza.

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2
Q

Qual è l’isotopo di riferimento per la massa atomica e molecolare?

A

Isotopo 12 del C.

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3
Q

Cosa indica la perdita di 20 Da?

A

-20 = HF, da corticosteroidi sintetici e diuretici.

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4
Q

Cosa corrisponde la perdita neutra di 32 Da dagli esteri metilici?

A

-32 = metanolo.

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5
Q

Qual è la relazione tra proteine plasmatiche e effetto matrice?

A

Direttamente proporzionale.

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6
Q

Sono necessarie caratteristiche da acido/base forte per la ionizzazione soft?

A

No; necessita di un centro ionizzabile o doppietto solitario.

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7
Q

Qual è il ruolo dell’11-ketoandrosterone in analisi antidoping?

A

Ormone steroideo simile al testosterone, usato per verificare somministrazione esterna.
Strutturalmente è una forma ossidata del testosterone con chetone in posizione 11. E’ endogeno, indipendente dal testosterone, per cui la concedntrazione resta invariata in caso di somministrazione esterna

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8
Q

Come si definisce il potere di risoluzione?

A

Capacità di distinguere due picchi adiacenti.

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9
Q

Come si calcola la risoluzione in ppm?

A

106*[(maccurata – mesatta)/maccurata]

mesatta = calcolata; maccurata = sperimentale.

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10
Q

Quali molecole si legano all’acido sialico in proteomica?

A

hCG e EPO.

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11
Q

Qual è il valore energia sorgente El?

A

70 eV.

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12
Q

In LLE è conveniente estrarre tutto con una sola aliquota?

A

No, meglio più estrazioni con piccoli V.

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13
Q

Elenca 3 modalità SPE.

A

Fase diretta, fase inversa e scambio ionico.

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14
Q

Qual è l’utilizzo dell’accoppiante ionico in RP HPLC-MS?

A

Uso come controione.

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15
Q

Cosa indica la perdita di 44 Da diuretici acidi?

A

CO2 (esempio della furosemide).

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16
Q

Cosa indica la perdita di 64 Da diuretici?

A

SO2.

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17
Q

Perché è favorita la formazione di frammenti B e Y in proteomica?

A

Perché il legame peptidico è labile, si formano ioni B e Y tramite rottura del legame ammidico; gli ioni Y sono spesso più stabili grazie alla formazione di ioni acilio.

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18
Q

Cos’è il tropilio e quando frammenta?

A

Ione m/z 91 derivato del toluene o simili; frammenta spontaneamente in EI dando perdite successive di 26 (etilene); contrazione dell’anello 7-> 5-> 3

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19
Q

Da quali molecole si forma il tropilio?

A

Da benzeni con un C in alfa.

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20
Q

Cos’è il tetraidrogestrinone?

A

Steroide anabolizzante di sintesi, simile al gestrinone.

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21
Q

Cosa è l’acido perclorico?

A

Agente deproteinizzante usato per far precipitare le proteine.

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22
Q

L’ionizzazione ESI+ può avvenire solo su N?

A

No, basta un sito ad affinità protonica o doppietto solitario.

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23
Q

Scrivi l’equazione dello scambiatore anionico debole.

A

RNH3+ –> RNH2 + H+
MO- + H+ –> MOH.

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24
Q

hCG che pesa 22 kDa, quante cariche può ospitare?

A

Gonadotropina corionica umana; Z = 22.

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25
Qual è la definizione di risoluzione LC?
Capacità di distinguere due picchi vicini.
26
Cos'è SBSE?
Stir bar sorptive extraction; assorbimento dell’analita su un’ancoretta magnetica.
27
A cosa serve la beta glucoronidasi?
Enzima che scinde il legame con acido glucoronico.
28
Qual è la perdita neutra dei metaboliti di C6H8O6?
Acido glucoronico insaturo (M-176).
29
In ESI, gli steroidi possono perdere acetone come perdita neutra?
Sì.
30
Cos'è M+23?
Addotto con sodio.
31
Con che sorgente puoi fare imaging?
AP-MALDI, MALDI e DESI.
32
Nomina 2 sorgenti hard.
EI, ICP.
33
Qual è il pH del sangue e dell'urina?
7.4-7.8; 4.4-8.0.
34
Quali sono i componenti inorganici principali nel sangue?
Cl, I, K, Mg, Fe, Na (stato ionizzato).
35
Da cosa dipende la capacità estrattiva dell'SPE?
Materiale estraente, forza dell’interazione e saturazione dei siti.
36
Cosa sono gli ioni acilio nella frammentazione di Bimann?
Derivano dalla scissione del legame peptidico.
37
Qual è la struttura del frammento A di Bimann?
Scissione CH-C=0; NH3+ + NL.
38
Puoi analizzare i polialcoli in El? Come?
Sì, ma solo con derivatizzazione (TMS).
39
Tra OE°+ e EE+ chi frammenta spontaneamente?
OE°+.
40
Nomina 3 solventi miscibili con l'acqua.
Metanolo, ACN, THF.
41
A cosa servono le fasi stazionarie grafitiche?
Per interazioni idrofobiche e separazione di isomeri.
42
Quali sono gli svantaggi dell'ESI?
Effetto matrice e di sali; risposta diversa in base alle proprietà elettrochimiche.
43
Com'è collegato il nandrolone con la gravidanza?
Prodotto collaterale dell’enzima aromatasi che converte ormoni sessuali M in F; livelli maggiori durante la gravidanza per la maggiore produzione di estrogeni
44
Qual è l'intensità relativa del picco base in El?
100%.
45
A cosa serve la zirconia come fase solida in SPE?
Eliminare effetto matrice dei lipidi.
46
Lo ione EE+ forma facilmente lo ione OE?
No, raro.
47
A cosa servono i metalli pesanti come deproteinizzanti?
Eliminare effetto matrice tramite precipitazione.
48
Quali sono le perdite isobare a 44?
CO2, C2H4O, acido acetico, metilidrazina.
49
Cos'è HILIC e a cosa serve?
Cromatografia liquida a interazione idrofilica; per separazione analiti polari.
50
Qual è la perdita di 73 in GC MS di analiti derivatizzati?
TMS (trimetilsilile).
51
Cosa indica la perdita M-15?
Radicale metile.
52
Qual è la classe di composti che subisce serie di frammentazione con Dm 44?
Espansori di volume di plasma; Delta 44 = OCH2CH2 = unità glicoliche
53
Atomo che ha due isotopi abbondanti tra B, I e F?
B (Boro) - 11/10
54
Testosterone ed epitestosterone hanno diversi frammenti m/z?
Si
55
Pro CI rispetto El?
Ione molecolare ben visibile; esiste la variante APCI a P atm; non necessaria la vaporizzazione del composto
56
THG cos'è?
Steroide anabolizzante di sintesi, simile al gestrinone (presente nella pillola anticoncezionale)
57
Regola di Stevenson?
Nel caso di una specie asimmetrica, quando avviene la frammentazione OE˙+->EE+ + R°, la carica positiva resta sul frammento (carbocatione) a energia di ionizzazione minore
58
Frammentazione caratteristica androgeni con OH?
- 44 = etenolo (tautomero dell’acetaldeide)
59
Numero ponti disolfuro insulina?
2
60
IRMS cos'è?
Isotope Ratio MS: è una tecnica utilizzata per ricercare le quantità relative di isotopi stabili di alcuni elementi, solitamente C. Definisce l’origine di un metabolita umano definendo la percentuale di possibilità che il metabolita sia stato acquisito dall’esterno (tecnica ©-IR-MS). E’ detta anche TC = thermal combustion.
61
Delta C13 (12C-13C) cos’è?
Rapporto 12C/13C che ha una differenza di x1000 rispetto ad un riferimento zero, ossia il VPDB (minerale a base di C). Permette di stabilire l’origine degli steroidi, composti ricchi di C, utilizzando uno standard.
62
Lipidi danno effetto matrice?
Si
63
Funzionamento APCI?
tecnica di ionizzazione soft che avviene a P atm. Il campione, introdotto in fase liquida, viene prima nebulizzato e vaporizzato grazie all’uso di un riscaldatore. Successivamente, un potenziale elevato viene applicato a un ago chiamato elettrodo a corona, generando una scarica elettrica che ionizza il gas ausiliario (solitamente azoto). Gli ioni del gas così formati trasferiscono la carica al campione attraverso reazioni chimiche, producendo gli ioni molecolari analizzabili.
64
Idroclorotiazide è acido diprotico o amminoacido?
Acido diprotico (2 N sulfonamidici)
65
3 solventi immiscibili in acqua?
esano, ottano e cloroformio
66
IAE?
Estrazione di immunoaffinità, in cui si hanno degli anticorpi bloccati all’interno di una cartuccia, così da aumentare la selettività della fase estraente. Ha una variante semisintetica MIP (polimeri a stampo molecolare), in cui si utilizzano degli anticorpi sintetici (caffeina-teofilina).
67
Analisi top down proteine?
Analisi di proteine intere
68
Quante cariche ha albumina che pesa 67kDa?
67
69
Quante cariche ha insulina che pesa 5kDa se frammento m/z è 1126?
5
70
Quali sono atomi che danno alfa cleavage?
O,N,S
71
Proteine più abbondanti nel sangue?
Albumina, immunoglobuline e fibrinogeno
72
Definizione ione molecolare?
Ione a valore maggiore di m/z, ottenuto per estrazione/addizione di un elettrone da una molecola attraverso una sorgente hard (EI), quindi senza scissione.
73
Si può interrompere il vuoto in SPE?
Si
74
In quale tecnica si usa di più la derivatizzazione?
EI
75
Reactive DESI?
Desorption electrospray ionizzation: tecnica soft a P atm che usa reattivi chimici (derivatizzanti) per rendere più polari/ionizzabili composti difficilmente ionizzabili in ESI. Ad esempio, agli steroidi si aggiunge l’idrossilammina così da ottenere delle ossime cariche, ottenendo un segnale più intenso ed aumentando la sensibilità.
76
RDB?
Ring and double Bonds; è un fattore di correzione che tiene conto del numero di anelli ed insaturazioni.
77
Ioni M+18?
Addotti con ammonio [NH4]+
78
Cosa hanno in comune K H e R?
3 aa basici (K=lisina; H=istidina; R=arginina)
79
Due glicoproteine usate come dopanti?
hGC e EPO
80
Forze nei processi RP-SPE?
Van der Waals, dipolo-dipolo, dipolo - dipolo indotto, (legami H), non covalente
81
Accoppiante ionico?
Specie ionica idrofobica usata in IP
82
Cosa hanno in comune ioni di McL e ione molecolare (IM)?
derivano dalla stessa molecola analita, sono ioni positivi osservabili nello spettro di massa, si formano durante la ionizzazione (es. EI), forniscono informazioni strutturali utili all’identificazione. Sono entrambi ioni radicali da EI, provenienti dallo stesso analita; permette di determinare il PM; in entrambi la carica può essere localizzata su tutta la molecola o su eteroatomi, se presenti, da cui parte la frammentazione.
83
Perdita neutra da ioni negativi di acidi grassi?
CO2= 44
84
Cosa sono EPO stealth e come si analizzano?
Sono eritropoietine semisintetiche, in cui è presente polietilenglicole (PEG); si analizzano con PMF = peptide mass fingerprint andando ad identificare il frammento caratteristico.
85
Tempo pH e T per azione della beta glucoronidasi?
tempo=h pH=7; T=50°C
86
Il picco base in EI-MS è lo ione più intenso?
Si, ha intensità del 100% e su di esso vengono normalizzati gli altri picchi
87
Limiti della diluizione?
Non si può effettuare se l’analita è presente in C troppo basse, perchè si rischierebbe di perderlo
88
Testosterone e Epitestosterone?
Due epimeri in posizione 17 (OH sopra e sotto il piano); il rapporto T/E permette di capire se l’assunzione è esogena (T/E >4)
89
Ioni OE+° da peptidi?
Sono nei frammenti Z per rottura omolitica promossa da sorgente ETD + IPA; n° dispari di e-
90
Solventi SPE per interazione polare?
In ritenzione: solventi apolari come esano, toluene; In eluizione: solventi polari come MetOH e ACN
91
Materiali apolari in SPE?
C4, C8, C18, CH, Ph
92
Per SPE è necessario il vuoto?
Per il condizionamento no, per tutte le altre fasi si.
93
N° di cariche che ospita insulina?
PM=5800 Da. Può avere z=5 (più abbondante), ma anche z=4 o z=6.
94
Attivazione CID nelle proteine?
Collision induced dissociation: metodo per indurre la frammentazione per attivazione collisionale, generando ioni B e Y.
95
Famiglie di composti che producono ioni a delta M = 14?
Idrocarburi (14 = CH2)
96
DDA?
Data dependent acquisition / Dried droplets analysis.
97
LLE?
Estrazione liquido-liquido che prevede il passaggio di un soluto da un solvente ad un altro immiscibile. Procedura usata in fase pre-analitica.
98
Eluenti per cromatografia delle proteine?
Acqua, ACN e metanolo
99
Sequence coverage per bottom UP?
Sequenza di copertura. Indica il n° di peptidi che sono stati riconosciuti come ioni nella separazione cromatografica e nello spettrometro di massa e che permettono di identificare le proteine (>30%)
100
Classe di dopanti che vengono estratti con metilazione estrattiva?
Diuretici

Antidoping (5 decks)

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