Microscopie

Question 1

en MO observation de

Answer 1

tissus, cellules, hématies, bactéries

Question 2

≠ MO

Answer 2

microscopie conventionnelle
à fluorescence
confocale

Question 3

résolution MO (conventionnelle et à fluorescence)

Answer 3

10mm - 200nm

Question 4

en ME observation de

Answer 4

cellules, organites (ribosomes, mitochondries, lysosomes, noyaux), virus, atomes et molécules

Question 5

≠ ME et résolution

Answer 5

MET
MEB
résolution: 100µm - 10nm

Question 6

en microscopie à sonde locale obs de

Answer 6

prot, aa, ADN/ARN, atomes

Question 7

≠ microscopie à sonde locale

Answer 7

AFM: microscopie à force atomique → 10nm-1nm
STM: microscopie à effet tunnel → 10nm-0,5nm

Question 8

amplitude

Answer 8

la distance entre une crête ou un creux et la position de repos

Question 9

longueur d’onde

Answer 9

cycle

distance entre 2 crêtes consécutives

Question 10

longueur d’onde augmente →

Answer 10

fréquence diminue
énergie diminue
résolution diminue

Question 11

longueur d’onde croissante

Answer 11

rayons gamma < rayons X < UV < lumière visible < IR < micro-ondes < ondes radio et TV

Question 12

lumière bleue (λ =488nm) par rapport à lumière rouge (λ=650nm)

Answer 12

+ grande fréquence
transporte + d’énergie
résolution sup

Question 13

image observée en 2 temps

Answer 13

image réelle créée par objectif

image virtuelle créée par oculaire

Question 14

lentilles

Answer 14

lentilles de l’oculaire
lentilles du condenseur de type Abbe
lentilles de l’objectif

Question 15

lentilles de l’oculaire

Answer 15

lentille oculaire
lentille du diaphragme
lentille du champs
projettent l'image sur la rétine = oculaire Huygenien
grossissement X5 - X10

Question 16

lentilles du condenseur de type Abbe

Answer 16

organisées en doublet ou en triplet
concentration lumière sur l’échantillon/ le spécimen
processus de correction des aberrations optiques

Question 17

lentilles de l’obj

Answer 17

comprennent un ménisque et le lentilles hémisphériques frontales (tout en bas)
processus de correction des aberrations optiques
organe le + important du microscope
grossissement X0,5 - X100

Question 18

microscopie à (épi)fluorescence

Answer 18

résolution de même ordre que microscopie conventionnel (10mm-200nm)
source de lumière = lampe à Xe ou Hg
présence de filtres et de miroirs
mise en jeu fluorochromes

Question 19

fluorochromes

Answer 19

possèdent souvent

• structures cycliques aromatiques
• résidus tryptophane (indole)

Question 20

FITC

Answer 20

fluorochrome lumière verte

déplacement de stokes ~ 30nm

Question 21

immuno-fluo

Answer 21

le + souvent fluorochromes sont exogènes = introduits dans le tissu par les AC (couplés à des fluorochromes, spé pour le tissu examiné)
déterminer la loc. tissulaire d’un épitope (aka site Ag)

Question 22

immuno-fluo directe

Answer 22

Ac primaire couplé avec le fluo

l’Ac primaire reconnait l’épitope (aka site Ag)

Question 23

immuno-fluo indirecte

Answer 23

Ac secondaire couplé avec le fluo

l’Ac secondaire reconnait le fragment Fc de l’Ac primaire → amplifie le signal

Question 24

fluorochromes émettent photon (signal) après excitation

Answer 24

photon de longueur d’onde donnée est absorbé
e- passe sur orbital d’énergie sup
e- repasse sur orbitale initiale: accompagne l’émission d’un photon d’énergie inf à celle du photon absorbé

Question 25

déplacement de Stokes aka stockes shifts

Answer 25

= l'écart entre la longueur d'onde du pic d'émission et celle du pic d'absorption longueur d'onde émise est + grande que celle de l'onde absorbée chaque fluorochrome: spectre + pic d'excitation et spectre + pic d'émission

Question 26

filtres low pass

Answer 26

laissent passer ondes avec longueur inf. à une valeur donnée

Question 27

filtres high-pass

Answer 27

laissent passer ondes avec longueur sup. à une valeur donnée

Question 28

filtres band pass

Answer 28

laissent passer ondes avec longueur comprise dans intervalle donné

Question 29

ex filtre d'excitation destiné à exciter un fluo. par une lumière bleue pour obtenir signal vert

Answer 29

filtres d'excitation passe bas: laisse passer que ondes bleues miroir dichroïque dévie les ondes bleues vers échantillon ondes bleues excitent FITC miroir dichroïque laisse passer ondes vertes émises vers l'oculaire from FITC ondes vertes arrivent jusqu'au capteur

Question 30

marquages w/ couples de fluo.

Answer 30

pics d'émissions éloignés: marquage double | pics d'émissions très rapprochés: pas de distinction entre signaux émis (impossible à lire)

Question 31

marquage de fibroblastes en culture

Answer 31

noyaux → DAPI (bleu) actine → FITC (vert) tubuline des MT → Texas Red (rouge)

Question 32

fluorochromes d'origine transgénique

Answer 32

gène codant pour une prot fluo. d'origine naturelle est fusionnée avec le gène codant une autre prot construction introduite dans des cellules distribution et dynamique de la prot d'intérêt taguée peut être observée car la prot de fusion obtenue est fluo

Question 33

GFP (prot fluo verte)

Answer 33

première prot fluo découverte | prix Nobel 2008

Question 34

GloFish

Answer 34

gènes de prot fluo sont sous le contrôle du promoteur du gène codant pour de chaînes légères de la myosine (prot µ)

Question 35

Brainbow mouse

Answer 35

explorer connectivité du cerveau | mélange de 4 fluorochromes ≠ → 100 nuances

Question 36

réfraction

Answer 36

fléchissement de l'onde par lentille

Question 37

interférence

Answer 37

sommation des amplitudes de 2 ondes "après" la lentille: constructive/ destructive

Question 38

diffraction

Answer 38

création d'ondelettes secondaires par l'obstacle

Question 39

lentille convergente: angle de déviation

Answer 39

+ important - pour les ondes éloignées du centre - pour les ondes courtes

Question 40

convolution

Answer 40

modification du signal par un système optique

Question 41

équation rayon de la PSF

Answer 41

r = 1,22λ /2NA

Question 42

équation de l'ouverture numérique

Answer 42

NA = n x sinµ

Question 43

équation D | plus D est petite plus la résolution K est bonne

Answer 43

D = 0,61λ /NA

Question 44

λ des électrons MET

Answer 44

λ = h/mv

Question 45

prix nobel de chimie 2014 | microscopie à fluo à nanodimension

Answer 45

Eric Betzig, William Moerner, Stefan Hell

Question 46

découverte e- | prix nobel 1906

Answer 46

Joseph John Thompson

Question 47

établie nature ondulatoire des e- | prix nobel 1929

Answer 47

Louis de Broglie

Question 48

découvre constante de Plank | prix nobel 1918

Answer 48

Max Plank

Question 49

1er MET

Answer 49

Ruska, Berlin 1932

Question 50

résolution max MET

Answer 50

0,1 nm (0,07 nm en 2006)

Question 51

résolution max MEB

Answer 51

1-5nm

Question 52

canon à électrons

Answer 52

- filament = cathode, émission thermoionique des e- (2700°C) - cylindre de Wehnelt: concentre e- vers l’axe central - anode: accélère les e- - faisceau d’e- accéléré et projeté du sommet de la colonne vers échantillon

Question 53

lentilles électromagnétiques

Answer 53

- création champ magnétique: déforme et fait tourner FE change distance focale assure cohérence du FE - défauts: déformables, imparfaites, sujettes à des aberrations - changement de leur épaisseur: changer distance focale

Question 54

détecteur d’Everhard-Thornley

Answer 54

capte e- secondaires | e- captés sont transformés en photons transmis dans un analyseur: photomultiplicateur