Lors de prélèvement sanguin, comment empêche-t-on la coagulation du sang prélevé?
Il faut ajouter des additifs dans les tubes de prélèvement comme des anticoagulants
Quelles sont les différences entre le plasma et le sérum ?
Le sérum n’a pas les protéines participant à la coagulation comme la fibrinogène.
Sinon plasma est sérum sont pareils: contiennent les deux toutes les protéines du sang, sauf les cellules sanguines.
Quand est ce important de prélever du plasma?
Lors de défauts de métabolisme de la chaine de coagulation, le plasma comprend toute sles protéines du sang et les prot de coagulation
Quelles sont les choix de méthode pr investiguer les protéines du sang
1 ) Les tests qualitatives (+/-): test de grossesse
2) Profilage protéique (électrophorèse): quelle prot apparait et quand
3) Quantitative: méthode spécifique pr chaque protéine
Comment fonctionne la méthode de profilage protéique de l’électrophorèse bidirectionnelle (brièvement)? Quand l’utilise t-on?
On étale un gel en 2D et on regarde le patron des différentes protéines en un seul temps.
Donc très coûteux, très long et en recherche
De quoi est composé 75% du sang?
60% Albumine
15-20% Anticorps (protéines du plasma)
Ainsi, le protéome du plasma est majoritairement composée d’Albumine et d’anticorps, toutefois nous avons dit que plus de 10 000 de protéines étaient présentes. Ceci signifie que les autres protéines sont présentes en très petites quantités. Sachant cela, comment ça influe notre technique clinique?
On utilise ainsi une technique de profilage protéiques, pour voir les différentes quantités présentes de protéines.
Permettent de séparer les principales protéines du sérum selon leur charge nette spécifique.
On ne voit que les protéines les plus abondantes: test rapide et simple
Ne s’intéresse pas seulement à une protéine, voir des changements pour plusieurs protéines. Interprétation de la variation du profil.
Quelles sont les 5 zones (habituelle) de séparation de l’électrophorèse?
1) Albumine
2) Alpha-1-globulines
3 Alpha-2-globulines
4) Beta-globulines
5) Gammaglobulines
Nommer les 3 “principes/étapes” qui sous-tendent à l’électrophorèse
1- On place un mélange de protéines dans une solution à un pH précis
2-Différentes protéines vont posséder une charge globale différente (à un pH donné)
3- Si on applique un courant électrique au système, il y aura séparation des différentes protéines en fonction de leur charge propre.
Qu’est ce qui traduit une gammapathie monoclonales sur l’électrophorèse?
Des pics monoclonaux d’anticorps.
Une gammapathie monoclonale est une tumeur des cellules qui produit des anticorps.
Quelles sont les utilités cliniques conventionnelle de l’électrophorèse?
1) Dépister des pics monoclonaux d’anticorps
2) Quelques autres conditions cliniques (comme des états inflammatoires, des atteintes hépatiques et atteintes importantes des glomérules du rein)
Nommer 3 des principales protéines sériques
1) Albumine
2) Immunoglobuline: IgG, IgA, IgM
3) Transferrine
4) A-2 macroglobuline
5) Antitrypsine
6) Glycoprotéine acide
7) Haptoglobine
8) Complément: C3,C4
Que permet l’électrophorèse capillaire à haute résolution (8 fractions)?
Isoler la protéine la plus importante, permet de quantifier directement les protéines par électrophorèse plutôt que par dosage
Est-ce qu’on peut faire un diagnostique à partir de l’électrophorèse?
Non, on doit prendre en compte le reste de l’état du patient.
Que permet de voir l’électro à haute résolution?
- Inflammation : aiguë, subaïgue et chronique
- Anémie ferriprive
- Déficiente en AAT (antitrypsine)
(p.12)
Ou sont synthétiser la plupart des protéines sériques?
Dans le foie
Où circule les protéines sériques?
Dans le sang et l’espace extravasculaire (oedoème)
Comment le corps sait-il qu’une protéine est vieillissante?
Des modifications des sucres s’effectuent sur la protéine, le foie peut ainsi la reconnaitre et la dégrader.
Les petites protéines peuvent simplement passer à travers les glomérules du reins, recapté par les tubules, puis dégradée en a.a
Qu’est ce que la glycosylation?
Ajout de chaines glycanes (chaines de monosaccharides) sur un a.a spécifique d’une protéine.
Quel % des protéines sont des glycoprotéines?
50%
Qu’est ce qu’une glycoprotéine sérique?
C’est une protéine contenant des chaines oligosaccharides (glycanes) liées de façon covalente au radical d’un a.a spécifique contenu dans le sérum
Par qui sont produits les anticorps?
Les lymphocytes B
Quelle est la structure la plus retrouvée chez les principales protéines du sérum?
Structure globulaire
Nommer 8 raisons pour lesquelles les glycanes sont importantes en sciences biomédicales.
1) Régulation de la durée de vie des glycoprotéines: perte acide sialique permet la reconnaissance du foie
2) Récepteur de l’hépatocyte pour les asialoglycoprotéines
3) Trafic et sécrétion extracellulaire (acheminer la cell au bon endroit)
4) Reconnaissance intercellulaire (surface membranaire)
5) Ciblage à des domaines subscellulaire précis
6) Processus métastatique (modification des glycanes)
7) Modulation des propriétés physicochimiques
8) Protection contre la protéolyse de protéases
