Toksologiske tests Flashcards
Hvad angiver ADI?
ADI (”Acceptable Daily Intake”) angiver den mængde af et stof, der kan indtages dagligt, uden nogen nævneværdig sundhedsrisiko, gennem et helt liv.
Hvordan fastsættes ADI?
En ADI-værdi bestemmes ud fra toksikologiske langtidsundersøgelser med dyr. Først fastlægges NOAEL (”No Observed Adverse Effect Level”), dvs. et eksponeringsniveau som dyrene kan tåle som livslang belastning, uden at udvikle påviselige toksiske skader. Normalt udføres undersøgelserne med flere doser. I tilfælde af flere undersøgelser af forskellige effekter vælges normalt den laveste NOAEL.
Derefter divideres NOAEL (eller et andet udgangspunkt såsom benchmark dosisniveau/BMD) med en sikkerhedsfaktor (SF). Størrelsen af SF er valgt, for at tage højde for usikkerheder i ekstrapolering af data fra dyr til mennesker og individuel variation. Den mest almindelige SF er 100 (10-1000), hvori der tages højde for at mennesker kan være 10 gange mere følsomme overfor stoffet end forsøgsdyr og at en del af befolkningen kan være 10 gange mere følsomme end den gennemsnitlige variation, altså en individuel følsomhed.
Hvad angives ADI værdier i?
mg (stof) pr. kg legemsvægt pr. dag
Jo højere ADI des…
større mængder af en forbindelse kan indtages, uden at udgøre en sundhedsrisiko.
Hvad angiver LD50?
Den dosis hvor halvdelene af dyrene dør.
Hvad angiver NOAL?
“No adverse effekt level” = Den dosis hvor der ikke er en statistisk forskel til kontrollen.
Hvad er formålet med fixed-dose procedure forsøg og hvordan forløber dette?
For at finde ud af om et kemikalie er akut toxisk kan man lave en række forsøg som kaldes for ”the fixed dose”. Her giver man kemikaliet i forskellige doser og ser hvor mange der dør. Når man har givet den højeste dosis og der efter 14 dage ikke er sket en reaktion vil man kalde det for ikke toksisk.
Hvilke dyrearter bruges til fixed-dose procedure?
Man kan bruge forskellige dyrearter i forhold til testens formål.
Hvor mange dyr bruges til hvert dosisniveau i fixed-dose procedure?
10 dyr til hvert dosis niveau.
Hvad er dosis niveauerne i fixed-dose procedure?
5, 50, 500 og 2000 mg/kg
Hvor lang tid varer fixed-dose procedure forsøget?
fra 24 timer til 14 dage.
Hvad er formålet med Repeat dose toxicity forsøg?
Dette forsøg laves for at finde den dosis hvor der ikke længere er en effekt.
Hvor lang tid varer Repeat dose toxicity forsøg?
Oftest 28 eller 90 dage.
Hvilke dyrearter anvendes til Repeat dose toxicity?
To forskellige dyrearter hvor den ene ikke skal være en gnaver.
Hvilken kurve kan man lave på baggrund af Repeat dose toxicity?
En dosis-responskurve
Hvad kan man finde ud fra en dosis respons kurve?
LOAEL (low adverse level) som er den laveste dosis der giver et signifikant respons.
NOAEL (no adverse effekt level) som er den dosis hvor der ikke er en statistisk forskel til kontrollen. NOAEL afhænger af hvilken dosis forsagsudføren har valgt.
Hvad er BMD (Benchmark dose) og hvordan beregnes den? Hvad skal man tage højde for når man fastlægger BMD?
En grænseværdi man kan beregne ved kurve fitting af nogle data’er. Her bestemmer man hvor mange dyr man vil acceptere reagere på en pågældende dosismængde. Man skal tage højde for spredningen når man fastlægger BMD.
Hvilke forsøg laves, når man kigger på reproduktion og beskriv disse forsøg?
- Et forsøg hvor man eksponerer dyr helt fra befrugtningen og kigger på det gennem generationer. Her vil man kigge på alle parameter som er relevante for reproduktionen. Da man kører to generationer igennem vil man kunne undersøge alle trin i cyklusen. Dette forsøg kræver dog rigtig mange forsøgsdyr.
- Et teratoginetests studie hvor man kigger på misdannelse af fostre. Man går altså ind og kigger på udviklingen af fostre. De fleste vitale organer udvikler sig i midten af drægtigheds perioden.
Hvad er mutagener?
Kemiske stoffer, der er i stand til at reagere med cellens DNA og der ved fremkalde mutation som kaldes mutagener.
Nævn 3 måder hvorpå mutationer kan foregår?
- Frame-shift mutation
- DNA streng hvor der er forsvundet en base, hvilket giver en anden nukleotid sammensætning.
- DNA streng hvor der er sket en addering, der er tilsat et nyt basepar. Dette vil også ændre nukleotid sammensætningen
Hvilke tests kan man lave for at undersøge, hvorvidt der er sket en mutation?
Ames test (bacteriel gen mutation)
Chromosome aberration
Mammalian gene mutation
Hvis ingen af de overstående test er positive går man videre til at lave in vivo test som f.eks.:
Micronucleus test
Hvad går Ames test ud på?
Går ud på at se om der er vækst på forskellige agar. Hvis der kommer vækst på Histidin frit medie vil der være opstået en pludselig mutation.
Hvad går Chromosome aberration ud på?
Med denne test vil man direkte kunne se om der er sket noget på selve kromosomet, nærmere bestemt hvorvidt der er sket en ændring i kromosomets form eller antal. Der kan enten være tale om en afspaltning af kromosom eller en indsnævring mm.
Hvad går Mammalian gene mutation ud på?
Denne test kan undersøge om en række kemikalier er i stand til at lave DNA skade som fører til en gen mutation.
Her vil man f.eks. bruge nogle cellelinjer som indeholder 6-thioguanine, da det er toksisk mod celler med genet HGRT. Dette skyldes at HGRT vil omdanne 6-thioguanine og den metabolit der kommer vil slå cellen ihjel. På den måde kan man se at hvis der er vækst vil der være sket en mutation af HGRT som gør at den ikke vil omdanne 6-thioguanine og derfor vil cellen ikke blive slået ihjel.
