Uso diagnóstico de anticuerpos

Question 1

Cómo funciona la técnica ELISA

Answer 1

detecta antígenos específicos con anticuerpos marcados

Question 2

Qué célula secreta anticuerpos?

Answer 2

células plasmáticas <– linfocitos B

Question 3

Cuál es el procedimiento de una prueba ELISA directa?

Answer 3

• inmoviliza antígeno en la palca
• añade anticuerpo para antígeno de interés marcado con enzima
• añade sustrato que reacciona con la enzima –> señal visible (cambia color)
  Ciclos de lavado intermedios

Question 4

Cuál es el procedimiento de una prueba ELISA indirecta?

Answer 4

• inmoviliza antígeno en la placa
• añade anticuerpo para antígeno de interés (sin marcar)
• añade anticuerpo secundario para el primer anticuerpo marcado con enzima
• añade sustrato que reacciona con la enzima –> señal visible (cambia color)
  Ciclos de lavado intermedios

Question 5

Cuál es procedimiento de una prueba ELISA tipo sándwich?

Answer 5

• se inmoviliza un anticuerpo de captura
• se añade muestra con antígeno de interés –> se une al anticuerpo de captura
• añade anticuerpo de selección marcado con enzima que se une al complejo anticuerpo de captura-antígeno (puede ser 1 o 2 / directa o indirecta)
• añade sustrato que reacciona con la enzima –> señal visible (cambia color)
  Ciclos de lavado intermedios

Question 6

Para qué se usa una citometría de flujo?

Answer 6

identificar y cuantificar diferentes poblaciones celulares en suspensión

Question 7

Qué son los cluster of diferentiation?

Answer 7

antígenos en la membrana celular
específicos para la célula o su linaje

Question 8

Cómo funciona la citometría de flujo?

Answer 8

Marcan CD con anticuerpos
las células pasan una por una en solución por un laser
Dispersa el laser dependiendo del tamaño de la célula y sus proteínas expresadas (marcadas con anticuerpos)

Question 9

Cómo funciona una prueba Southern blot?

Answer 9

• aísla DNA
• corta DNA con enzimas de restricción
• separa secuencias de DNA por electroforesis
• transfiere fragmentos de DNA del gel a una membrana de nitrocelulosa
• hibridación: añaden sondas marcadas radioactivamente para la secuencia de DNA de interés
• se guarda la membrana de nitrocelulosa con una película de rayos-x fuera de la luz para que las sondas radioactivas la marquen

Question 10

Cuál es la diferencia del northen blot con el southern blot?

Answer 10

El northen blot es para RNA
usa DNAsas antes de la electroforesis

Question 11

Cuál es la diferencia del western blot con el southern blot?

Answer 11

El western blot detecta proteínas
usa anticuerpos marcados en vez de sondas