Práctica 6: Enzimas de restricción Flashcards
(20 cards)
¿Qué son las enzimas de restricción?
Son endodeoxiribonucleasas que tienen la capacidad de cortar (digerir) DNA de doble cadena en una secuencia específica
¿En que consiste la tecnología del DNA recombinante?
En cortar una secuencia de DNA de interés para posteriormente ensamblarlas de forma deseada y obtener una molécula de DNA artificial?
¿Dónde podemos encontrar las enzimas de restricción?
En bacterias, donde desempeñan un papel protector contra bacteriófagos destruyendo su DNA para evitar la replicación en la bacteria
Contemplando que la función de las enzimas de restricción es digerir el DNA de los bacteriófagos ¿También se ve afectado el DNA de la bacteria?
No porque el material genético de la bacteria se encuentra protegido por metilación
¿Cuántas secuencias suele reconocer una enzima de restricción?
Únicamente una secuencia específica en la cuál realiza el corte endonucleolítico
¿Cómo se nombran las enzimas de restricción?
En base a la bacteria de la cuál fueron aisladas: La primera letra del género, las dos primeras letras de la especie y el orden de descubrimiento
¿La enzima se limita a un solo corte?
No, depende si el sitio de corte específico se encuentra en varios lugares de la molécula de DNA original
Cuando la enzima de restricción realiza varios cortes debido a que el sitio de corte específico se encuentra en varios lugares del DNA ¿Cómo se llama el producto de dichos cortes?
Fragmentos de restricción
¿Que son propiamente los fragmentos de restricción?
Segmentos de doble cadena de DNA producidos por la acción de una enzima de restricción que actúa sobre un DNA más largo
Si el DNA lineal presenta 4 sitios de reconocimiento para una enzima de restricción ¿Cuántos fragmentos de restricción se obtendrán y con que características?
5, la característica es que serán de menor peso molecular que la cadena original
Si el DNA circular presenta 4 sitios de reconocimiento para una enzima de restricción ¿Cuántos fragmentos de restricción se obtendrán?
4
¿Que características tiene que tener la secuencia de reconocimiento para generar mayor número de fragmentos?
Deben de ser más cortas dichas secuencias
¿Que avances presentó la tecnología del DNA recombinante en la biología molecular?
Permitió aislar, secuenciar, manipular, conocer la estructura y función de genes individuales derivados de cualquier tipo de célula
¿Cuál es la finalidad de usar enzimas de restricción en la tecnología de DNA recombinante?
Fabricar moléculas recombinantes cuyas secuencias funcionales puedan ser en última instancia reconocidas e interpretadas de forma adecuada por la maquinaria celular
¿Que son los RFLP?
Restriction Fragment Length Polymorphism/Polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción?
Sabemos que podemos analizar el DNA que provenga de cualquier material biológico pero, ¿Que hacemos si es demasiado escaso?
Lo amplificamos por PCR
¿Podemos decir que PCR es el paso previo al análisis de RFLP
Si
¿Que puede alterar los sitios de reconocimiento de enzimas de restricción en los individuos?
Mutaciones o regiones polimórficas que varían entre los individuos
¿Qué es un marcador genético?
Un segmento de DNA con una ubicación física conocida en un cromosoma que puede ayudar a vincular una enfermedad hereditaria con el gen responsable
¿Que puede generar fragmentos de restricción cuya longitud varía?
La modificación de los sitios de reconocimiento que como sabemos puede verse alterado en regiones polimórficas
