Analisis Proteomico De Las Modifica Ioned Posttraduccionales Flashcards
(8 cards)
1
Q
El conocimiento de la secuencia nucleotídica y transcriptómica de una proteína no es suficiente para conocer su función
A
Interacciones proteína-proteína
2
Q
Interacciones proteína-proteína
A
Para conocer la función -> ¿cómo interactúa con otras proteínas?
3
Q
- La interacción de las proteínas se clasifica en:
A
- Ocurren entre dominios en una misma cadena polipeptídica
- Las que ocurren entre dominios de diferentes cadenas polipeptídicas
- Las que ocurren de en complejos formados entre proteínas dependientes
4
Q
- Se han identificado distintas metodologías para evaluar las interacciones:
A
- Rayo x
- ELISA (ensayo enzimático de inmunoabsorción)
- Doble híbrido Y2H
- Microarreglo de proteínas
- Microscopia electrónica
- Inmunofluorescencia
- FRET (Energía fluorescente transferida por resonancia)
5
Q
Metodos para identificar su interaccion proteina-proteina
A
Y2H (yeast two hibrid screening; técnica de doble híbrido en levadura)
FRET (Flourescense resonance energy transfer):
6
Q
Y2H (yeast two hibrid screening; técnica de doble híbrido en levadura
A
- Doble hibrido. Técnica que detecta interacción entre dos proteínas.
1. Factor de transcripción es separado en dos partes;- Dominio de unión a DNA
- Dominio de activación
- A estos dominios se les unen las proteínas cuya interacción se quiere analizar.
3. Silas proteínas tienen interacción, se Unirán los dominios del FT y por lo tanto se verá la transcripción del gen reportero
- A estos dominios se les unen las proteínas cuya interacción se quiere analizar.
7
Q
FRET (Flourescense resonance energy transfer):
A
- Método microscópico que puede monitorear la interacción en tiempo real.
- Las proteínas se marcan con fluoróforos aceptores y donadores; al haber interacción se observa la fluorescencia
- CFP se excita a 436nm; emite 480nm (azul)
B) Cuando hay interacción entre ambas proteínas, VFP (acepta se excita a 480nm, pero emite una luz amarilla
8
Q
Ventajas de FRET
A
se puede medir el tiempo de interacción entre las proteínas.
