Aplicaciones De Los Microarreglos De DNA RNA y Proteinas Flashcards
(21 cards)
Metodología que permite la identificación de moléculas de ADN o ARN mediante hibridación en una estructura de vidrio o silicona. Se ocuparon los Tag SNPs.
Microarreglos
Fundamento de los microarreglos
- Hibridación por acidos nucleícos (coplementaridad)
- Detección por fluorecencia (BN marcadas)
- Se obtiene señal en donde hay hibridación
- Permite la lectura de miles de variantes en un solo ensayo
Tipos de microarreglos
- ADN
- ARN
- Metilación
- Proteínas
Proceso de microarreglos
- se distribuyen oligonucleicos (15-25) sintetizados en lab sobre estructura de silicona
- Cada oligonucleico contiene miles de copias
- Se agregan fragmentos de ADN, derivados de librerias
- Las variaciones se analizan de manera simultanea
- Resultado en fluorecencia
Características de librerías
- Colecciones de clones de DNA
- Se generan al tener celulas del organismo a estudiar (extraccion de DNA)
- Corte con enzima de restriccion
- Fragmentos de restriccion de distintos tamaños
- Unión al vector y clonar en bacterias o levaduras
Microarreglos de ADN
Diseñados para la identificación de un polimorfismo específico en cada celda
Actualmente cómo se utilizan?
Chips de 50,000 variantes
ADN
En cada celda se encuentra
un oligonucleico especifico para cada SNP
La variante tiene fluoróforo diferente
oligo
Genotipos CC CA AA
polimorfismos bialelicos
Usos del microarreglo de ADN
forense
ciencias de salud
Uso forense en microarreglos de DNA
- Peril genético permite la identificación de individuos mediante amplificación de microarreglos SNPs
Ciencias de salud en microarreglos de DNA
- Análisis de polimorfismos en enfermedades metabólicas
Microarreglos de ARN
- Extracción de DNA
- Amplificación de cDNA
- Adherencia al microarreglo del cDNA (dna complementario)
- Mismo pricipio de hibridacion
- La intensidad de la fluorescencia es directamente proporcional al nivel de expresión del gen
permite conocer la expresión diferencial entre un paciente y otro.
Microarreglos de RNA
Microarreglos de RNA usos
Ciancias de salud
Microbiológia
Microarreglos de RNA ciencias de salud
- Análisis comparativo de células sanas y células enfermas
- Análisis comparativo entre tejido
- Análisis comparativo entre tejidos
Microarreglos de RNA microbiológia
Estudios de patogenicidad
* Resistencia bactenana
Microarreglos de RNA posibles aplicaciones
- Diagnóstico de enfermedades de manera temprana
- Estudios de cáncer
- Guías de tratamiento
- Estudio de nuevos fármacos
Microarreglos de Metilación
- La metilación es la transferencia de grupos metilo en el carbono 5 de la citocina presentes en las islas CpG.
- S-adenosil metionina (donante de metilos)
- Mediado por ADN metiltransferasas.
- La metilación silencia o inactiva los genes.
- Altamente asociado al desarrollo de cáncer
analisis de microarreglos de metilación
- Human Methylation 450 Beadchip (Illumina)
- Cubre el 99% de genes referenciados y 250,000 islas CpG
