Électrophorèse (Biochimie) Flashcards Preview

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Flashcards in Électrophorèse (Biochimie) Deck (52):
1

2

Qu'est ce qui se passe aux protéines lorsqu'il y a une infection:

L'albumine diminue due à un cataabolisme accentuée mais les globulines sont augmentés en raaison de la synthèse d'anticorps contre l'agent infectieux.

 

3

Quel est l'utilité de l'électrophorèse:

Sépare et quantifie les différentes protéines sériques.

 

4

Quels sont les substances électrophorésées:

Protéines, lipides, hémoglobiunes et iso enzymes

 

5

Électrophorèse:

Technique de séparation non gravimétrique

 

6

Tout système électrophorétique doit contenir 3 ingrédients essentiels:

  1. un champ électrique
  2. des particules chargées
  3. un milieu conducteur dans lequel le mouvement se produit

 

7

Iontophorèse:

La migration des petits ions

 

8

Plusieurs facteurs peuvent affecter la vitesse de migration des ions:

  1. support
  2. voltage
  3. dimensions de la molécule
  4. pH du tampon (FI)
  5. charge de la molécule
  6. la température

9

Pourquoi utilise-on des protéines chargées négativement:

Car les protéines chargées positivement exhibent plus d'adsorption (sur le support) que ceux chargées négativement.

 

10

Électrophorèse libre:

le milieu est liquide avec le tampon à un tel pH

 

11

Électrophorèse de zone:

Le milieu est un support trempé dans un tampon à un tel pH.

 

12

Quels sont les différents types de support:

  • papier
  • acétate de cellulose (5 zones)
  • gels d'agar
  • gel d'acrylamide (plus que 20 zones)
  • gel d'amidon
  • gel d'agarose (12 zones)

13

Lors d'une électrophorèse de protéine de routin, qu'est ce qui peut faire que la migration des protéines semble plus rapide que d'habitude:

  1. executer la procédure à une température plus basse
  2. utiliser un tampon ayant un pH plus élevée
  3. utiliser un tampon ayant une plus grande FI
  4. ajuster le courant à un niveau plus bas

 

2 - utiliser un tampon ayant un pH plus élevée

14

Quelle circonstance entrainera le regroupement des bandes de protéines tout près du point d'application lors d'une électrophorèse:

  1. un tampon avec un pH neutre
  2. un tampon avec une faible force ionique
  3. un voltage trop élevé
  4. un temps d'électrophorèse prolongé

 

1 - un tampon avec un pH neutre

15

Qu'est ce qui se passe lorsque la force isoélectrique augmente:

Le nuage ionique est plus fort, la mobilité diminue et la résolution augmente.

 

16

Qu'est ce qui se passe lorsque la force ionique diminue:

Le nuage ionique diminue, la mobilité augmente et la résolution diminue.

 

17

Quel est la meilleure force ionique:

Entre 0.01-0.1 M

 

18

Cercle vicieux:

Quand le temps augmente, le courant augmente, la température augmente et la force ionique augmente.

 

19

An increase in which of the following would increase the movement of particles through a solution in electrophoresis:

  1. voltage applied to the electrophoretic system
  2. viscosity of the solvant
  3. size and symmetry of the particles
  4. all of the above

 

1 - voltage applied to the electrophoretic system

 

20

Which of the following proteins will show the greaatest net negative charge in a pH 8.6 buffer:

  1. protein A with an isoelectric point of 7.5
  2. protein B with an isoelectric point of 8.0
  3. protein C with an isoelectric point of 8.6
  4. protein D with an isoelectric point of 9.6

 

1 - protein A with an isoelectric point of 7.5

21

An increase in the ionic strength of the electrophoretic buffer while operating at constant current will cause the voltage to _______, the electrophoretic migration of macromolecules to _________, and the separation of macromolecules to __________.

  1. increase, increase, increase
  2. increase, increase, decrease
  3. decrease, decrease, increase
  4. decrease, decrease, decrease

4 - decrease, decrease, decrease

22

If the ionic strength of the electrophoretic buffer is increased from 0.1M to 1.0M and the system is operated at the same fixed voltage when using each buffer concentration, which of the following describes the results that would likely be seen when using the 1.0M buffer, as compared to the results seen with the 0.1M buffer:

  1. electrophoresis separation would be achieved in shorter time with the 1.0M buffer, with greater resolution
  2. the electrophoresis pattern would be distorted, and the macromolecules may be denatured when using the 1.0M buffer
  3. electrophoretic separation would be achieved in a shorter time with the 1.0M buffer, with decreased resolution
  4. the electrohporetic separation time would have to be increased 10 fold to account for the 10 fold increase in buffer concentration

 

2 - the electrophoresis pattern would be distorted, and the macromolecules may be denatured when using the 1.0M buffer

23

The net charge of a macromolecule is determined by the total number of charged groups withihn the macromolecule. The charge associated with the zeta potential of a macromolecule in an electrohporetic environment compares in which of the following ways to the net charge on the macromolecule itself:

  1. the zeta potential is greater than the net charge
  2. the zeta potential is less than the net charge
  3. the zeta potential is equal to the net charge
  4. the zeta potential has no relationship to the net charge

 

2 - the zeta potential is less than the net charge

24

When considering the factors that influence the mobility of macromolecules, the relaxation effect would tend to __________ electrohporetic mobility, because there is a momentary _________.

  1. lower, formation of a double layer of charge about the macromolecule
  2. increase, neutralization of charge around the macromolecule
  3. lower, electrical field that acts in the opposite direction to the applied field
  4. increase, enhanced electrical field that acts in the same direction aas the applied field

 

3 - lower, electrical field that acts in the opposite direction to the applied field

25

Electro-osmosis is the migration of supporting medium counterions and solvent toward the appropriate electrode. This net flow of counterions and solvent is in the opposite direction tot he migration of the macromolecules of interest. Which of the following statements best describes the effect of electro-osmosis:

  1. electro-osmosis will only affect the final positions of the macromolecules but not their separation
  2. electro-osmosis will prevent macromolecule separation from occuring
  3. electro-osmosis is the mechanism by which electrophoretic separation of macromelcules occurs
  4. electro-osmosis only occurs in capillary electrophoresis and is the mechanism of separation in the relatively new technique

 

1 - electro-osmosis will only affect the final positions of the macromolecules but not their separation

26

The discontinous solvent system used to enhance electrophoretic resolution in which movement comes to a stop because of a lack of net charge is:

  1. isotachophoresis
  2. disk electrophoresis
  3. isoelectric focusing
  4. gel electrophoresis

 

3 - isoelectric focusing

27

Is the following statement true or falsa and why. A thinner electrophoretic support is associated with a greater sensitivity:

  1. true because a thinner support will require less sample to produce a detectaable spot
  2. true because a thinner support will allow more exposure to air
  3. false because a thinner support can hold less sample
  4. false because a thinner support can hold more solvent and effectively dilute the sample

 

1 - true because a thinner support will require less sample to produce a detectaable spot

28

It is known that pH influences the charge of an analyte and, if set appropriately, can enhance electrophoretic mobility. In an attempt to improve separation of serum proteins, the analyst set the pH of the buffer at an extremely basic level. Following electrophoresis, it was determined that the desired results were not achieved. Which of the following explains why the modification was not successful:

  1. at the very basic pH, the proteins may have been denatured
  2. at the very baasic pH, the proteins may have been dissociated
  3. at the very basic pH, the fraction of current carried by buffer hydroxyl ions resulted in poorer separation
  4. all of the above are possible explanations

 

4 - all of the above

 

 

29

Which support medium is most used in immunoelectrophoresis:

  1. polyacrylamide gel
  2. agarose
  3. agar
  4. starch gel

 

2 - agarose

 

30

One of the advantage of capillary electrophoresis over other types of electrophoresis is the potential to separate uncharged analytes. The separation of uncharged analytes is made possible in this technique by:

  1. the very short migration distance, which allows diffused uncharged analytes to be isolated along with charged analytes
  2. the lack of electro-osmosis, allowing the migration of uncharged analytes
  3. the use of micelles
  4. the use of more powerful methods of detection

 

3 - the use of micelles

31

In most types of electrophoresis, interactions between analyte and the support medium have been minimized. Which of the fo9llowing types of electrophoresis considers analyte-medium interactions important:

  1. capillary electrophoresis
  2. micellar electrokinetic chromatography
  3. electroblotting
  4. electrochromatography

 

4 - electrochromatography

32

What will be the effect on the final electrophoretic pattern when horizontal electrophoresis is used and the surface of the medium is open to air:

  1. all electrophoretic bands will remain on the side of the medium to which of the sample will be applied
  2. all electrophoretic bands will appear on the opposite side of the medium to which the sample will be applied
  3. convective flow will result in a distorted finaol electrophoretic pattern
  4. the final electrophoretic pattern will be compressed

 

4 - the final electrophoretic pattern will be compressed

33

Considering only the effect of time on electrophoretic separation, the separation of bands __________ with time, and diffusion of bands __________ with time:

  1. increases, increases
  2. increases, decreases
  3. decreases, increases
  4. decreases, decreases

 

1 - increases, increases

34

Considering serum protein electrophoresis using an agarose gel medium, the main purpose of the medium is:

  1. to allow electrophoretic migration of proteins to occur
  2. to provide a site to bind the protein to, once separation is complete
  3. to bind the stain for visualization of the separated proteins
  4. to prevent other macromolecules, such aas lipids, from interfering with serum protein electrophoresis

 

2 - to provide a site to bind the protein to, once separation is complete

35

Which of the following chemicals is used for fixation following serum protein electrophoresis:

  1. dilute acetic acid
  2. ponceau S
  3. sodium dodecyl sulfate
  4. saturated sodium hydroxide

 

1 - dilute acetic acid

36

Serum used as the sample for electrophoretic analysis in clinical laboratories contains many groups of macromolecules. Examples include amino acids, serum proteins, lipoproteins, glycoproteins, and others. Suppose an analyst is interested in performing serum protein electrophoresis. How does the analyst prevent other groups of macromolecules from interfering with the analysis of serum proteins:

  1. by selecting a medium that will only allow the electrophoretic migration of serum proteins
  2. by selecting an electrophoresis voltage that will only cause migration of serum proteins
  3. by selecting an electrophoresis time that will allow all other macromolecules to migrate completely off the medium and leave only serum proteins
  4. by selecting a stain that will only visualize the desired serum proteins

 

4 - by selecting a stain that will only visualize the desired serum proteins

37

In routine clinical electrophoresis, the most common means used to provide quantitative information about the zoned that have seperated invovles the use of:

  1. mass spectrometry
  2. densitometry
  3. laser induced fluorescence
  4. electrochemical techniques

2 - densitometry

 

38

Following electrophoresis, it was determined that the desired results were not obtained. All of the expected zones showed very slow migration. Which of the following would be a likely solution for this slow migration:

  1. change to a support medium with a smaller pore size
  2. decrease the voltage used for the analysis
  3. change the pH of the buffer to a value closer to the isoelectric point of the analytes
  4. decrease the ionic strength of the buffer

 

4 - decrease the ionic strength of the buffer

39

L'hémolyse du spécimen affecte comment l'électrophorèse:

Il y aura une augmentation dans la zone bêta-globulines

 

40

Vous examinez un profil d'électrophorèse des protéines d'un patient et vous remarquez une bande inhabituelle au point de départ de l'électrophorèse qui n'est pas présente dans le contrôle normal. Si le patient est en bonne santé, quelle est la cause la plus probable de la bande inhabituel du profil:

  1. un échantillon de plasma a probablement été appliqué à la place du sérum
  2. le tampon utilisé dans l'électrophorèse avait un mauvaus pH
  3. un milieu de support inapproprié a été utilisé pour l'électrophorèse
  4. le patient a probablement une anomalie génétique

 

1 - un échantillon de plasma a probablement été appliqué à la place du sérum

41

Quelle est la cause probable si la bande  d'albumine apparait déformée et large sur une électrophorèse des protéines sériques:

  1. pH incorrect du tampon électrophorétique
  2. instrument pas branché
  3. surcharge de spécimen durant l'application
  4. un matériel de support inapproprié est utilisé

 

3 - surcharge de spécimen durant l'application

42

Si un tampon d'électrophorèse a été dilué au lieu de l'utiliser à la concentration habituelle, comment électrophorèse va en être affecté:

  1. augmentation du taux de migration des protéines
  2. taux de migration des protéines diminués
  3. aucun changement dans le taux de migration des protéines

 

1 - augmentation du taux de migration des protéines

43

Quelle est l'importance de la force ionique du tampon utilisé dans l'électrophorèse en gel:

  1. pas de migration se produire si la force ionique de tampon est trop élevé
  2. augmentation de la force ionique se traduira par une tendance électrophorétique renversée
  3. la protéine sera dénaturée si la force ionique du tampon est trop élevée
  4. la coloration des fractions protéiques ne se produira pas si la force ionique du tampon est trop élevé

 

3 - la protéine sera dénaturée si la force ionique du tampon est trop élevée

44

Quelle est la définition du point isoélectrique (pI) d'une protéine:

  1. la protéine n'a pas de charge nette
  2. la protéine a une charge négative
  3. la protéine a une charge positive
  4. une protéine migre meilleurs durant l'électrophorèse

1 - la protéine n'a pas de charge nette

45

Vous venez d'assembler et vous mettez en marche une électrophorèse des protéines des patients sur gel ce matin, et ensuite vous aller pour une pause café. Lorsque vous revenez 45 minutes plus tard, vous colorez le gel et notez que les bandes n'ont pas migrées très loin du point d'application. Quelle est l'explication probable:

  1. une réaction chimique a eu lieu entre le tampon et tous les échantillons
  2. le courant ou le voltage sur l'instrument a été fixé trop bas
  3. trop d'échantillon avait été appliqué sur le gel

 

2 - le courant ou le voltage sur l'instrument a été fixé trop bas

46

Quelle technique nous permet de balayer la séparation des protéines par électrophorèse sur un support et d'effectuer leurs quantification:

  1. spectrophotométrie
  2. chromatographie
  3. densitométrie
  4. néphélémétrie

 

3 - densitométrie

 

47

Comment la charge nette des protéines dans un échantillon affecte la mobilité électrophorétique des fractions de protéines:

  1. elle est inversement proportionnelle à la mobilité électrophorétique
  2. elle est directement proportionnelle à la mobilité électrophorétique
  3. elle est égale à la mobilité électrophorétique
  4. il n'existe pas de relation entre la charge nette et la mobilité électrophorétique

 

2 - elle est directement proportionnelle à la mobilité électrophorétique

48

Dans un système d'électrophorèse, le _____ est l'électrode négative:

  1. anode
  2. optode
  3. cathode
  4. diode

 

3 - cathode

 

49

Quels colorants sont utilisés pour colorer un gel électrophorèse des protéines sériques:

  1. Coumassie bleu et le bromure d'éthydium
  2. Oil Red O et Amido Black
  3. Amido Black et Blue Coumassie
  4. Crystal Violet et Noir Amido

 

3 - Amido Black et Blue Coumassie

50

Comment la vitesse de migration affectée si la viscosité du milieu de support utilisé dans un système d'électrophorèse des protéines est trop épaisse:

  1. augmenter
  2. diminuer
  3. ne pas être affectée

 

2 - diminuer

 

51

Quelle est la définition d'endosmose:

  1. peut être éliminé par un système d'électrophorèse sur gel, si un gel chargé est utilisé
  2. est le mouvement de solvant, avec les ions fortement hydratées/chargés qui produit une force opposé du sens électrophorétique
  3. est le mouvement de l'eau vers le centre d'un gel d'électrophorèse ou bandes pour remplacer l'eau perdue par évaporation
  4. est un type d'électrophorèse lorsque la séparation est réalisée dans les circuits de fluide

 

2 - est le mouvement de solvant, avec les ions fortement hydratées/chargés qui produit une force opposé du sens électrophorétique

52

Quelle fraction de bilirubine traverse la barrière hémato-encéphalique dans l'ictère nucléaire et pourquoi:

Non-conjugée parce qu'ils sont plus solubles dans les lipides.