Laboratorio Flashcards
1
Q
studio di citotossicità
A
cheratinociti umani immortalizzati + H2O2
valutare apoptosi e alterazioni permeabilità di membrana
2
Q
colorazione nuclei e apoptosi
A
Hoechst, solco minore DNA, fluorescente -> conteggio delle cellule
Annessina V, verde -> fosfatidilserina
3
Q
alterazione permeabilità
A
Trypan blue colora cellule morte
4
Q
test di Ames - componenti
A
valutare capacità mutagene
- E. Coli WP2: mutazione puntiforme AT in trpE + uvrA (manca riparazione).
- terreno Luria Bertani: triptone, estratto di lievito, NaCl, triptofano
- terreno minimo Davis Minimal Agar: potassio fosfato, glucosio e citrato, ammonio solfato, magnesio solfato, agar agar
5
Q
test di Ames - procedimento e risultati
A
- contare i batteri con spettrofotometro
- inserzione del mutageno nel batch test (no controllo non trattato e di crescita)
- calcolo frequenza di mutazione
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