TEMA 15 - Ingeniería Genética (sin terminar) Flashcards
resolver una (23 cards)
EVAU
Tecnología del ADN recombinante
definición + fases
DEFINICIÓN: tecnología trata de insertar un gen seleccionado (exógeno) en un vector de clonación, para introducirlo en una célula que actúa como huésped y en la que se fabrica una proteína codificada por el ADN del gen insertado.
FASES:
1. Aislamiento y obtención del gen de interés
2. Selección del vector de clonación y formación de ADN recombinante
3. Inclusión del ADN recombinante en un hospedador
4. Selección de las células clonadas y expresión de los genes exógenos en el hospedador
EVAU
Vector de clonación
definición + tipos
Pequeñas moléculas de ADN capaces de replicación autónoma dentro de una célula huésped, que se utiliza para insertar la secuencia de ADN exógeno.
TIPOS:
→plásmido
→genoma vírico
→fago
→cósmido
→cromosoma bacterianos artificiales
EVAU
O.M.G
definición
Organismo Modificado Genéticamente, organismos cuyo material genético se ha alterado artificialmente.
EVAU
Endonucleasa de restricción
definición
Enzima bacteriana que reconoce y corta el ADN por una secuencia específica.
Es importante utilizar las mismas endonucleasas de restricción para cortar el vector de clonación y el gen de interés para que se puedan unir (extremos cohesivos vs extremos romos)
→Se utiliza mucho en la inserción de genes en vectores de clonación.
EVAU
Igeniería genética
definición + ejemplos
DEFINICIÓN: Conjunto de tecnicas que permiten manipular el material genético de los organismos. Se utiliza para modificar el ADN de un organismo o para transferir genes.
EJEMPLOS:
→producción de insulina humana
→producción de la hormona de crecimiento
→producción de hormonas sexuales (estrógenos y progesterona)
EVAU
PCR
definición + material necesario + pasos + aplicaciones
Definición: Reacción en cadena de la polimerasa, es una tecnica de amplificación de ADN que permite obtener un número elevado de copias de un fragmento de ADN en un termociclador
Material necesario:
1. Fragmento de ADN
2. ADN polimerasa que resista a altas temperaturas sin desnaturalizarse (Taq polimerasa, obtenida de la arquea termófina Thermus aquaticus)
3. Cebadores específicos/primers
4. Disolución de desoxinucleótidos trifosfato (Con las cuatro bases del ADN)
Pasos:
1. Calentamiento y desnaturalización de ADN, separación de las hebras
2. Enfriamiento, actuación de los cebadores
3. Ciclos de amplificación, síntesis de las cadenas complementarias, repetición para una producción exponencial
Aplicaciones:
1. Detección de especies de organismos de interés
2. Estudios forenses
3. Relaciones evolutivas
4. Detección de enfermedades genéticas
*RT-PCR
LIBRO
¿Cuales son los 2 métodos de secuenciación del ADN y para que se utilizan?
1. Secuenciación del ADN por el método de Sanger→Se utiliza para averiguar la secuencia de nucleótidos
2. Técnicas de secuenciación masiva→Se utilizan para secuenciar genomas
LIBRO
Proyecto Genoma Humano
falta por dar
LIBRO
Hibridación de ácidos nucléicos
definición + material + tipos
DEFINICIÓN: Se utiliza para localizar la región del cromosoma se localiza el gen de interés. Se da gracias a la capacidad de apaeramiento entre secuencias complementarias de cadenas de ácidos nucléicos.
MATERIAL: Se utiliza una sonda (molécula de ac. nucléico monocatenario)
TIPOS:
1. Hibridación ADN-ADN (por transferencia de tipo Souhern)
2. Hibridación ADN-ARN (por transferencia de tipo Northern)
LIBRO
Mutagénesis dirigida
definición
La mutagénesis dirigida es una técnica de biología molecular utilizada para crear mutaciones
puntuales en una cadena de ADN para obtener proteínas modificadas.
LIBRO
ADN sintético
definición
La síntesis de secuencias programadas de oligonucleótidos de ADN.
Se realiza mediante la adición de nucleótidos al extremo de la cadena en crecimiento.
LIBRO
Plásmido
definición
clonación en procariotas
→Moléculas de ADN circular
→Se replican con independencia del cromosoma bacteriano
→Tienen origen de replicación propio
→Se utilizan mucho como vectores de clonación
LIBRO
Genómas víricos
definición
clonación en procariotas
→Pequeñas moléculas de ADN viral
→Tienen origen de replicación propio
→Se utilizan mucho como vectores de clonación
*Se suele utilizar el genoma fago lambda
LIBRO
Cromosomas bacterianos artificiales
definición
clonación en procariotas
→Moléculas de ADN circular artificial
→Tienen origen de replicación muy estable
→Se utilizan mucho como vectores de clonación para fragmentos grandes de ADN
LIBRO
Requisitos de las células hospeadoras para poder ser utilizadas en los procesos de clonación
- Deben ser crecimiento rápido
- No pueden ser patógenas
- Deben presentar mecanismos que les permitan captar moléculas de ADN del medio externo e incorporarlo a la propia célula
LIBRO
Genomas de virus
definición
clonación en eucariotas
Se utilizan para tranformar células animales
→Se utilizan retrovirus o ADN virus
LIBRO
Cromosomas artificiales de levaduras
definición
clonación en eucariotas
→Se denominan YAC (yeast artificial chromosomes)
→Se utiliza mucho la Shaccharomyces cerevisiae
LIBRO
Genomas de virus
definición
clonación en eucariotas
Se utilizan para tranformar células animales
→Se utilizan retrovirus o ADN virus
LIBRO
Plásmidos Ti
definición
clonación en eucariotas
→Se utilizan para tranformar células vegetales
→Este plásmido lo contiene la bacteria Agrobacterium tumafaciens
LIBRO
Métodos de introducción del ADN a la célula
- MICROINYECCIÓN→se inyecta directamene el ADN clonado en células animales
- ELECTROPORACIÓN→se utilizan descargas eléctricas que alteran la permeabilidad de la membrana
- PISTOLA DE GENES→se disparan microproyectiles revestidos de ADN al interior de la célula
- LIPOSOMA→pequeña vesícula formada por una bicapa lipídica. En su interior se encuentra el ADN
LIBRO
Clonación
definición + 2 tipos
DEFINICIÓN:
La obtención de organismos genéticamente idénticos (morfológica y fisiológicamente)
TIPOS:
1. Por disgregación de células embrionarias.
Cuando el embrión se encuentra en estado de mórula→cada célula se comporta como si fuese un nuevo cigoto.
Tiene el mismo fundamento que la formación de gemelos
2. Por tranferencia del núcleo desde una célula embrionaria a un ovocito →OVEJA DOLLY
LIBRO
CRISPR-Cas
definición + aplicaciones
DEFINICIÓN:
Sistema de manipulación y edición de genes
APLICACIONES:
→Silenciar genes
→Editar genes
LIBRO
CRISPR-Cas
proceso
CRISPR es un sistema que utiliza un guía (ARN) y una proteína (Cas9) para dirigirse a zonas elegidas del ADN (gen diana) y cortar (tijeras moleculares).
Con esto se puede inactivar el gen o introducir moldes de ADN modificado genéticamente (editarlo).
