Brainscape's Knowledge GenomeTM

Browse over 1 million classes created by top students, professors, publishers, and experts.


See full index

mikrobiologisk och immunologisk metodik > Analys av antikroppar och antigen för immunodiagnostik > Flashcards

Analys av antikroppar och antigen för immunodiagnostik Flashcards

1
Q

Vad finns det för immunologiska metoder som används inom klinisk immunologi ?

A
  • Detektion med hjälp av synen: agglutination och precipitation
  • Detektion med hjälp av maskin/apparat: ELISA eller ELISA SPOT, FACS och CLIA
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Hur fungerar metoder för immunbrist/transplantation ?

A
  • Mäta totalmängd antikroppar IgG, IgM eller IgA
  • Mäta koncentration av komplementfaktorer
  • mäta cytokiner
  • Ex. ELISA eller flödescytometri
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Hur fungerar metoden för autoimmunitet ?

A
  • Mäta mängden specifika antikroppar som binder till självantigen
  • EX. är immunofluorscens eller ELISA
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Hur fungerar metoder för allergi och överkänslighet ?

A
  • Mäta mängden antikroppar som binder till allergen

- ImmunoCap (typ ELISA)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Vad är Agglutination och precipitation?

A

Agglutination:
antikroppsmediernad ihopklumpning av olösliga partiklar såsom bakterier, celler eller plaskulor täckta av antigener

Precipitation:
antikroppsmediard utfällning av lösliga molekyler

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Vad kan antikroppar korsbinda? och vad behöver antikroppar och antigen?

A
  • Antikroppar kan korsbinda partiklar och molekyler och skapa stora nätverk.
  • Kräver att varje antigen och antikropp har mer än ett bindningsställe
  • Nätverken kan vara synliga för blotta ögat.
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Ge exempel på en agglutination ?

A

Exempel som hörts tidigare är blodgruppsbestämning, ABO.

• Antikroppar mot syfilisantigen på gelatinpartiklar mäts i en spädningsserie

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Det finns olika agglutinations test, nämn två.

A

Direkt Coombs test = Direkt Antiglobulin Test (DAT)
-> Används tex vid misstanke om autoimmun hemolytisk anemi vid nyfödda banr

Indirekt Coombs test = Indirekt AntiglobulinTest (IAT)
-> Används för blodgruppering och korstest

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Hur fungerar precipitation ?

A
  • Antigenspecifik antikropp ingjuten i gel
  • Antigen tillsatta i olika koncentrationer i brunnar i gelen
  • När antigen diffunderar ut i gelen bildas en synlig utfällning
  • Arean på utfällningscirkeln är proportionell mot antigenkoncentrationen i provet.
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Vad används Dubbel Immunodiffusion (Ouchterlony) och hur fungerar det?

A
  • Diagnostik av allergisk alveolit, en IgG-medierad sjukdom som främst uppstår vid upprepad inandning av organisk damm.
    • Dubbel immunodiffusion är en semikvantitativ äldre metod som fortfarande används för att den är enkel och kan användas för att detektera antikroppar mot en stor mängd olika antigener. Ex: mögelantigen, antigen från fjädrar och avföring från fåglar etc.
    • Om patienten har antikroppar mot allergenet bildas utfällnings reaktion som syns tydligt efter Coumassiefärgning av proteiner.
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Vad gäller för antikroppar och antigen i en lösning vid maskinell undersökning ?

A
  • Komplexbildning sker även om mängdförhållanden är långt ifrån ekvivalenszonen för precipitation.
  • Vid en konstant antikroppskoncentration sker komplexbildningen snabbare ju högre koncentrationen är av antigenet (inom ett visst intervall)
  • används ex vid kvantifiering av immunoglobuliner eller komplementfaktorer
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Metoder som utförs av ljusspridning finns, vad innebär följande ljusspridnings metoder ?

  • Turbidimetri
  • Nefelometri
A
  • > Nefelometri är ökning av ljusspridning per tidsenhet

- > Turbidimetri är minskning av ljusgenomsläpplighet per tidsenhet.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Vad utgår Solid phase immunoassays ifrån? Vilka metoder utgår från detta “sätt”

A

Immunoassays i vilka antigen eller antikropp är bunda till en fast fas såsom botten på en ELISA-platta eller en plastkula, medan de andra reaktanterna är fria i lösning.

  • ELISA
  • ELISA SPOT
  • CLIA
  • RIA
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Vad kan den fasta fasen var i immunoassays ?

A

> > Fasta fasen kan vara en slät yta i en brunn på en 96 hålsplatta, ofta plast med kan även vara andra material
den fasta fasen kan också vara en kula, oftast i plast

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Vad är sandwich ELISA? när används denna metod?

A
  • standard metoden för analys av proteiner i vätska
  • EX. mäta mängden IL-6 (cytokin) i vätska
Fördelar med metoden: 
- enkel metod
- kräver endast spektrofotometer 
- resultat erhålls snabbt från relativt enkla program 
- relativt billig metod 
Nackdelar med metoden: 
- Analys av ett protein i taget 
- relativt tidskrävande 
- känslighet kan ibland vara för låg för att kunna detektera
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Vad är ImmunoCap?

När används denna metod?

A
  • ImmunoCAP är en ELISA-liknande automatiserad metod.
  • Används för analys av allergenspecifika antikroppar (ffa IgE) för att diagnosticera allergier
  • Allergiska (atopiska) individer producerar IgE mot allergerner tex pollen
  • Analys av allergenspecifika IgE-antikroppar visar vilket allergen som patienter reagerar på.
  • Den automatiserade ImmunoCAP-metoden underlättar analys av antikroppar mot många olika allergener
17
Q

Hur laddar man en ImmunoCap maskin ?

A
  • Maskinen programmeras vilka allergener respektive patientprov ska testas för
  • Maskinen laddas med de Cappar som behövs.
  • Maskinen parar själv ihop rätt prov med rätt Cap. Solida fasen bestå av en kula
  • Ibland är kulan magnetisk och/eller färgad med en fluoroscerande färg för att underlätta tvätt och detektion
18
Q

Flödescytometri

    • vad liknar denna metod?
    • Vad gör kulorna i metoden ?
A

Hydrodynamisk fokusering:
Celler/kulor passerar genom flödescellen och lasern en och en
- metoden liknar sandwhich ELISA
- Kulorna är färgade med en eller flera fluorescerande färger som ger en distinkt fluorescensmönster
- Detektionsantikropparna är (direkt eller indirekt) märkta med fluorokromer
- Analysen baseras på flödescytometrisk detektion från fluoroscenssignal från kulor

19
Q

Vad finns det för Fördelar/nackdelar med kulbaserad flödescytometrisk?

A 
Fördelar: 
- Möjligt att göra multiplexanalys av många proteiner samtidigt 
- sparar tid 
- sparar provvolym 
- ger relativt bred analysintervall 
Nackdelar: 
- Relativt hög analyskostnad per prov
- kräver tillstånd till flödescytrometriska instrument 
- Kräver viss analysspecifik kunskap
20
Q

Vad är metodprincipen för kulbaserad flödescytometri multikomplexanalys ?

A

• Multiplexanalysen baseras på detektion av kombination av minst två olika fluorescenssignaler:
- färgkodade kulor
- fluorokrom märkta specifika detektionsantikroppar
Specifika captureantikroppar är kopplade till kulorna:

21
Q

Vad är det som ger möjlighet till multikomplex analys?

A

• Kulor med fluorescens i olika intensitet kopplas till olika detektionsantikroppar -ger möjlighet till att skapa multiplexanalys.

22
Q

Vad har Luminex för analysprincip?

A
  • Mha beads med olika klassifikationsfärger (CL) kan 50-500 olika proteiner analyseras samtidigt
  • Det finns färdiga analyskit (säljs av flera olika företag) eller så kan man själv designa sig egen analyspanel
23
Q

Vad betyder ANA?

A
  • anti nuclear antibodies
  • Antikroppar som bildas mot antigen(er) som finns i cellkärnorna
  • ANA associeras med systemisk bindvävs- och autoimmuna sjd.
    EX. sjögren eller SLE
24
Q

Hur kan man analysera ANA med hjälp av flödescytometri?

A
  • ANA screen: En helautomatiserad multiplexmetod för analys av autoantikroppar mot 13 olika kärnantigener mha magnetiska kulor – Luminexbaserad teknik
  • Analysen är en screening-metod och positivt utfall verifieras med annan metod Ex, ELISA
25
Q

Vad kan immunofluorescens upptäcka ?

A

• Kan upptäcka antikroppar mot “okända” antigener

26
Q

Vad finns det för nackdelar med ANA-analys av immunofluorescens ?

A
  • Låga antikroppsnivåer finns hos friska människor (mer prevalent hos äldre)
  • Svårt att tolka mönster och titer
  • Låg specificitet (flera sjukdomar associeras med fler än en sjukdom)

mikrobiologisk och immunologisk metodik (14 decks)

Brainscape helps you reach your goals faster, through stronger study habits.
© 2024 Bold Learning Solutions. Terms and Conditions