Substratlära och odlingsteknik

Question 1

Vad är bakteriers sammansättning ?

Answer 1

Sammansättning:
Ca 70% vatten
Av torrvikten 50% protein, 25% RNA, 22% annat och 3% DNA

Question 2

Vad kräver bakterien ca 50% av ?

Answer 2

C
Utgör ca hälften av cellens torrsubstans. Tillgång till kol i relativt
höga koncentrationer.
Olika bakterier utnyttjar olika kolkällor.
Autotrofa- oorganiskt bundet kol i form av CO2
Hetrotrofa- nedbrytning av organiska föreningar som kolhydrater
och proteiner

Question 3

Hur mycket utgör kvävet i en bakterie ?

Answer 3

N
Kväve utgör 12-15% av torrvikten, krävs i förhållandevis höga
koncentrationer
Fritt atomosfäriskt kväve N2 – enklaste kväve källan kan bara
utnyttjas av ett fåtal bakterier
Flest oorganiska källor som ammoniumsalter (NH4+) och
nitrater (NO3-)

Question 4

Vad gör Mg för bakterien

Answer 4

Mg stabiliserar ribosomerna, cellmembranen och

nukleinsyror – enzymatiska processer- MgSO4

Question 5

Vad gör Ca för bakterien ?

Answer 5

Ca- viktig vid stabilisering av cellvägg och

sporbildning- CaCl2

Question 6

Vad gör Fe för bakterien ?

Answer 6

Fe- enzymer i ffa respirationskedjan, FeSO4

Question 7

Vad kallas ämnen som bakterien själv inte kan syntetisera ?

Answer 7

-> Ämnen som inte bakterien själv kan syntetisera kallas ofta
tillväxtfaktorer.
-> Vissa bakterier kräver inga tillväxtfaktorer andra bakterier kräver
många tillväxtfaktorer.
-> Viktigt att tänka på vid framställning av odlingssubstrat
-> Generellt behöver gram-positiva bakterier mer tillväxtfaktorer än
gram-negativa

Question 8

Vad är bakteriologins 5 l ?

Answer 8

1. Inockulering – odling av ett prov på ett medium för produktion av en kultur
2. Isolering – separering av en art från en annan
3. Inkubation – i lämplig miljö som tillåter
   växt
4. Inspektion –hur ser det ut och växer
5. Identifikation - identifikationsmetoder

Question 9

Vad innebär det att en bakterie Inockulerar och isolerar ?

Answer 9

• Om en individuell bakteriecell separeras
från en annan cell och har plats att växa till på en näringsrik yta - kommer den att bilda
en koloni - bestående av många celler
• En koloni består av en species/art.
CFU= colony forming Units

Question 10

Ge exempel på utodlingstekniker ?

Answer 10

• Utstryksodling
• Spädningsodling
• Spridningsteknik
• Gräsmatteteknik
• Kvantitativ odling

Question 11

Vad innebär ett tre stryk?

Answer 11

Man gör ett primärtstryk, ett sekundärt stryk och ett tertiär stryk

Question 12

Vilka odlingsmedium finns det?

Answer 12

1. Fysisk form
2. Kemiska karaktäristika
3. Funktionell typ/ syfte med mediet

Question 13

Vad är den fysiska formen för medium? Vilka olika finns de?

Answer 13

A, Flytande medium

Vattenbaserade lösningar som
inte stelnar i rumstemperatur
- buljong, broth
Innehåller tex köttextrakt, pepton mm

B, semisolid
Trögflytande konsistens -
vanligen använt vid 
motilitets test - rörlighets 
test

C, Fast medium
Fast yta - kolonier växer på
ytan - vanligen i Petriskålar

Question 14

Vilken är den vanligaste av medium ur fysiska medium?

Answer 14

C1, Fast medium som kan bli flytande/stelnar

*Absolut vanligaste mediet
- innehåller oftast agar (från sjögräset agar agar)
Smälter vid 100°C och stelnar igen vid 42°C
Hanterbart vid 45-50°C - skadar inte dig eller bakterierna

Question 15

Vilka medium ingår i kemiska karaktäristika ?

Answer 15

-> Syntetiska
Rena organiska och oorganiska komponenter
Bestämda mängder
Reproducerbara

-> Icke syntetiska medium
Minst en icke kemiskt definierbar beståndsdel extraherad från djur,
växter eller svampar- ex blod, serum, köttextrakt, infusioner

-> Infusioner- rika på vitaminer, mineraler, proteiner och andra organiska
näringsämnen
Andra vanliga substanser är mjölk, jästextrakt, soja, pepton

Question 16

Vilka medium ingår i Syftet med mediet/funktionen?

Answer 16

Generellt medium-

Designade för att man ska kunna odla fram ett
så brett spektrum av mikroorganismer som
möjligt.
-Icke syntetiska
-Ex. nutrient agar, brain heart infusion, BHI,
trypticase soy agar, TSA

Question 17

Vad innebär berikat medium ?

Answer 17

Innehåller komplexa organiska substanser som tex. Blod,
serum, hemoglobin, eller specifika tillväxtfaktorer så som
vitaminer och aminosyror

Bakterier som kräver tillväxtfaktorer och komplexa
näringsämnen för att växa kallas: fastidious/kräsna

Ex. Streptococcus pneumonie - växer på blodagar

Question 18

Varför används selektiva medium? När är denna typ viktig?

Answer 18

- Designade för en speciell 
grupp/grupper av bakterier
- Viktigt vid isolering av bakterier från 
komplexa med mkt bakterier tex saliv, 
faeces, vatten, jord mm

• Ex MSA - mannitol salt agar - hög koncentration NaCl (7,5%). Selekterar för
  Staphylococcus - tål höga saltkoncentrationer

Question 19

Varför använda differential medium?

Answer 19

• Selekterar på storlek på kolonin eller färgomslag

• Vanligt med färg och pH-indikatorer i plattor för tex påvisande
av laktosjäsare- omslag till surt pH.

Question 20

Varför används transport medium?

Answer 20

• > För bevaring och preservering av olika organismer vid t ex transport från provtagning till utodling på laboratoriet ska hålla en viss tid
• > Ex Stuart’s och Amies transport medium

Question 21

Varför används analysmedium?

Answer 21

Olika sorters medium som används för att tex lösa
upp bakterier vid laboratorieanalyser- tex PBS vid
resistensbestämning

Question 22

Varför används beräknings medium?

Answer 22

Medium som används för att späda eller odla bakterier i för beräkning av antalet bakterier

Question 23

Från vilka källor i mediet hämtar bakterierna
makro- respektive mikroelement?
1. C
2. H och O
3. N

Answer 23

1. C- från organiska föreningar; främst glukos
2. H och O bland annat från vatten och ingående organiska
   och oorganiska substanser
3. N finns i protein och nukleinsyror, ammoniak eller nitrat

Question 24

Ge exempel på olika substrat ?

Answer 24

• Hästblodagar
• BHI-agar
• Streptokock-GBG-
  agar
• HI-agar
• Drigalskiagar
• Staphylococcus-agar
• Staphchrom-agar
• Mueller-Hinton-agar
• Saburaud-agar
• XLD-agar

Question 25

Tillverkning och kontroll av plattor, vad slags kontroller finns det?

Answer 25

F-kontroll —> förorening

Växtkontroll—> att de som ska växa växer och tvärtom

Övrig kontroll—>

1, tillverkningskontroll- vägt och mätt rätt
2, sterilkontroll 20°C och 32°C
3, positiv växt kontroll /negativ växt kontroll

Question 26

Vad finns det för miljökrav för bakterien ska växa?

Answer 26

• Temparatur
• Syre - koncentration
• pH- koncentration
• Tryck

Question 27

Vad är optimal temperatur för tillväxt av bakterier?

Answer 27

• Optimal temperatur
  någonstans mellan 20-
  40°C

De flesta vi bakterier vi odlar 35-37 °C

• Svamp vid 30 °C
• Campylobakter 42 °C

Question 28

Vad för pH ska det vara vid bakterie tillväxt?

Answer 28

-> De flesta mikroorganismer påverkas i hög utsträckning av pH och kan oftast bara tillväxa i vissa pH-intervall
-> Bakterier växer vanligt vis bäst vid pH 6-8
Svampar kan växa i pH 3-9

Question 29

Finns tre olika grupper av pH reglering vilka?

Answer 29

• ACIDOPHILER (A).Vissa bakterier gillar
  sura miljöer.
• NEUTROPHILER (B). Vid växt vid neutralt
  pH
• ALKALINOPHILER (C). Vissa gillar
  basiskt pH, tex bakterier som växer I
  alkaliska sjöar

Question 30

Behöver bakterier syra?

Answer 30

Olika bakterier har olika krav på närvaro av fritt syre för
tillväxt- vissa kräver även en viss mängd CO2 för att växa
optimalt

Question 31

Vad för tryck kräver bakterier ?

Answer 31

Den normala tillväxten är inte särskilt

beroende av tryck. Mycket högt tryck har dock avdödande effekt

Question 32

Hur uppnås anaerob odling?

Answer 32

• Ex: GasPak System
Uppnår anaerob miljö genom att låta vatten reagera med
natrium borohydride och natrium bikarbonat tabletter
som producerar vätgas och koldioxid.

• Vätet reagerar sedan med syret på en katalysator och det bildas mer vatten.
• Anaerobboxar med tillkopplad gas.