genetica batterica Flashcards

(53 cards)

1
Q

Cosa studia la genetica?

A

Studia i meccanismi attraverso cui i caratteri sono trasferiti da un organismo ad un altro e sono espressi.

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2
Q

Quali sono le macromolecole informazionali alla base del flusso dell’informazione genica?

A

DNA (contiene le informazioni geniche) e RNA (intermediario che traduce le informazioni in proteine).

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3
Q

Quali sono le tre tappe fondamentali del flusso dell’informazione genica nei procarioti?

A

1- Replicazione del DNA; 2- Trascrizione (da DNA a mRNA); 3- Traduzione (da mRNA a proteina).

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4
Q

Cos’è il “genoma batterico” e da cosa è fondamentalmente costituito nei batteri?

A

È l’apparato che detiene l’informazione necessaria per la biogenesi, riproduzione, omeostasi e adattabilità della cellula. Nei batteri, è fondamentalmente costituito da DNA organizzato in un unico cromosoma circolare presente nel citoplasma (nucleoide).

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5
Q

Quali sono i tre componenti di un nucleotide?

A

Uno zucchero pentoso (ribosio per RNA, desossiribosio per DNA), una base azotata (purina o pirimidina) e una molecola di fosfato.

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6
Q

Come si forma un “nucleoside” e come si ottiene un “nucleotide”?

A

Un nucleoside si forma quando una base azotata si lega al C1 dello zucchero pentoso tramite un legame glicosidico. Un nucleotide si ottiene aggiungendo uno o più gruppi fosfato al nucleoside.

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7
Q

Che tipo di legame unisce i nucleotidi in una catena polinucleotidica?

A

Legame fosfodiestere (tra il gruppo fosfato in posizione 5’ di un nucleotide e il gruppo ossidrile in posizione 3’ dello zucchero del nucleotide successivo).

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8
Q

Descrivi brevemente la struttura secondaria del DNA (doppia elica).

A

È formata da due filamenti polinucleotidici orientati in senso antiparallelo, avvolti l’uno intorno all’altro. La stabilità è data dall’appaiamento specifico delle basi complementari (A con T, G con C) mediante legami idrogeno.

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9
Q

Oltre al cromosoma, quali altri “elementi genetici accessori” possono essere presenti nei batteri?

A

Plasmidi, profagi (genomi virali integrati), elementi genetici trasponibili.

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10
Q

Come è organizzato il DNA nel nucleoide batterico nonostante la sua grande lunghezza?

A

È organizzato in “domini superavvolti”, raggomitolato e compattato. La forma superavvolta occupa circa un quarto della cellula.

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11
Q

Qual è la differenza nel compattamento del cromosoma tra eucarioti e procarioti riguardo agli istoni?

A

Negli eucarioti è controllato dagli istoni (proteine cariche positivamente che formano i nucleosomi). Nei procarioti gli istoni sono assenti e sostituiti da proteine associate al nucleoide (NAP).

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12
Q

Quali enzimi controllano lo stato topologico (rilassamento/superavvolgimento) del DNA?

A

Le topoisomerasi: la DNA girasi (topoisomerasi di tipo II) introduce superavvolgimenti, mentre la DNA topoisomerasi I la rilassa.

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13
Q

Cos’è il “sito ori” e il “sito ter” nel cromosoma batterico?

A

o Sito ori (origine di replicazione): Punto preciso del cromosoma da cui inizia la replicazione bidirezionale.
o Sito ter (terminazione): Zona diametralmente opposta al sito ori dove termina la replicazione.

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14
Q

In che modo la maggior parte del DNA nei batteri è “codificante” rispetto agli eucarioti?

A

Nei batteri, gran parte del DNA è codificante per proteine (>98%). Negli eucarioti (es. Homo sapiens), questa percentuale si inverte (circa 2% codificante).

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15
Q

Cosa si intende per replicazione “semiconservativa” del DNA?

A

Ogni nuova doppia elica di DNA formata è costituita da un filamento parentale (originale) e un filamento neosintetizzato

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16
Q

Da dove inizia la replicazione del cromosoma batterico e come procede?

A

Inizia da un punto specifico (sito ori o oriC). La doppia elica si apre e la replicazione avviene su entrambi i filamenti, partendo dalla forcella di replicazione e muovendosi in direzioni opposte (struttura a theta).

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17
Q

Spiega la differenza tra “filamento leading” (guida) e “filamento lagging” (copia o ritardato) durante la replicazione.

A

o Filamento leading: Sintetizzato in modo continuo nella direzione 5’→3’ seguendo l’apertura della forcella.
o Filamento lagging: Sintetizzato in modo discontinuo, sotto forma di corti frammenti (frammenti di Okazaki), sempre in direzione 5’→3’, ma in direzione opposta all’avanzamento generale della forcella.

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18
Q

Quali sono le funzioni principali delle seguenti proteine nella replicazione: DNA elicasi, DNA primasi, DNA polimerasi III, DNA polimerasi I, DNA ligasi?

A

o DNA elicasi: Separa i due filamenti di DNA rompendo i legami idrogeno.
o DNA primasi: Sintetizza corti inneschi (primer) di RNA necessari per l’inizio della sintesi da parte della DNA polimerasi.
o DNA polimerasi III: Principale enzima di sintesi, aggiunge desossiribonucleotidi al filamento in crescita.
o DNA polimerasi I: Rimuove gli inneschi di RNA e li sostituisce con DNA.
o DNA ligasi: Lega i frammenti di DNA neosintetizzati (es. i frammenti di Okazaki) formando legami fosfodiesterici.

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19
Q

Cos’è il “proofreading” (correzione di bozze) effettuato dalla DNA polimerasi?

A

È la capacità dell’enzima DNA polimerasi di verificare la corretta incorporazione dei nucleotidi durante la sintesi e di rimuovere eventuali nucleotidi errati, correggendo così gli errori.

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20
Q

Cos’è la “trascrizione”?

A

È il processo di sintesi di un filamento di RNA (mRNA, tRNA, rRNA) utilizzando uno stampo di DNA. L’informazione genica viene copiata dal DNA all’RNA.

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21
Q

Quali sono i tre tipi principali di RNA presenti nella cellula batterica e le loro funzioni?

A

o RNA messaggero (mRNA): Trasferisce l’informazione genetica dal DNA ai ribosomi per la sintesi proteica.
o RNA transfer (tRNA): Trasferisce gli amminoacidi specifici ai ribosomi durante la sintesi proteica, decodificando il messaggio dell’mRNA.
o RNA ribosomale (rRNA): Componente strutturale e funzionale dei ribosomi.

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22
Q

: Qual è l’enzima principale responsabile della trascrizione? Richiede un innesco?

A

L’RNA polimerasi. A differenza della DNA polimerasi, non richiede un innesco (primer) per iniziare la sintesi.

23
Q

: Cos’è un “promotore” e un “terminatore” nella trascrizione?

A

o Promotore: Regione specifica del DNA a cui si lega l’RNA polimerasi per iniziare la trascrizione.
o Terminatore: Sequenza specifica del DNA che segnala la fine della trascrizione, causando il distacco dell’RNA polimerasi e dell’RNA neosintetizzato.

24
Q

Cos’è il “fattore sigma (σ)” e quale ruolo svolge nella trascrizione batterica?

A

È una subunità proteica dell’RNA polimerasi batterica che riconosce specificamente la sequenza del promotore sul DNA, permettendo l’inizio della trascrizione. Diversi fattori sigma possono riconoscere diversi set di promotori.

25
Come avviene la terminazione della trascrizione (menziona i due meccanismi principali)?
o Terminatori intrinseci (Rho-indipendenti): Sequenze di DNA ricche in GC che formano una struttura ad ansa-stelo (hairpin) nell'RNA trascritto, seguita da una serie di uracili, che causano il distacco dell'RNA polimerasi. o Terminazione Rho-dipendente: Richiede l'intervento del fattore proteico Rho, che scorre lungo l'RNA e, incontrando specifiche sequenze, causa il distacco dell'RNA polimerasi.
26
Cos'è un "operone" e un "mRNA policistronico"? Sono presenti negli eucarioti?
o Operone: Gruppo di geni strutturali correlati (spesso coinvolti nella stessa via metabolica) che vengono cotrascritti e controllati da un'unica regione regolatrice (promotore e operatore). o mRNA policistronico: Singola, lunga molecola di mRNA prodotta dalla trascrizione di un operone, che codifica per più proteine. Queste strutture non sono tipicamente presenti negli eucarioti.
27
Cos'è la "traduzione"?
È il processo di sintesi proteica in cui l'informazione genetica contenuta nell'mRNA viene decodificata e utilizzata per assemblare una catena polipeptidica con una specifica sequenza di amminoacidi.
28
Cos'è un "codone" e un "codone di stop"?
o Codone: Sequenza di tre nucleotidi sull'mRNA che codifica per un amminoacido specifico (o per un segnale di inizio/fine). o Codone di stop (o non senso): Codone (UAA, UGA, UAG) che non codifica per alcun amminoacido e segnala la terminazione della sintesi proteica.
29
Qual è il codone di inizio nei batteri e per quale amminoacido modificato codifica?
: Il codone di inizio è AUG, che codifica per la N-formilmetionina.
30
: Descrivi brevemente la struttura e la funzione del tRNA (RNA transfer).
È una piccola molecola di RNA a singola elica con una caratteristica forma a quadrifoglio (dovuta ad appaiamenti interni). Ha un'estremità accettrice (3'-OH, sempre CCA) a cui si lega l'amminoacido specifico, e un'ansa dell'anticodone che riconosce e si appaia al codone complementare sull'mRNA. Alcune basi possono essere modificate.
31
Come avviene il "caricamento" del tRNA con l'amminoacido corretto?
Avviene in due passaggi catalizzati dall'enzima aminoacil-tRNA sintetasi: 1) attivazione dell'amminoacido con ATP (formazione di aminoacil-AMP); 2) trasferimento dell'amminoacido attivo al tRNA specifico.
32
Quali sono i componenti essenziali per l'inizio della traduzione nei batteri?
Le due subunità ribosomiali (30S e 50S, che formano il ribosoma 70S), l'mRNA con il codone di inizio AUG, l'aminoacil-tRNA iniziatore (formilmetionil-tRNA), fattori di inizio e GTP.
33
Cos'è la "sequenza di Shine-Dalgarno"?
È una sequenza sull'mRNA batterico, situata a monte del codone di inizio AUG, che presenta complementarietà con una sequenza sull'rRNA 16S della subunità ribosomiale 30S. Facilita il corretto posizionamento del ribosoma sull'mRNA per l'inizio della traduzione.
34
Descrivi brevemente le tre fasi della sintesi proteica (traduzione).
o Inizio: Assemblaggio del complesso d'inizio (mRNA, tRNA iniziatore, subunità ribosomiali, fattori d'inizio) sul codone AUG. o Elongazione: Aggiunta sequenziale di amminoacidi alla catena polipeptidica nascente, con il tRNA carico che entra nel sito A, formazione del legame peptidico, traslocazione del ribosoma lungo l'mRNA. o Terminazione: Riconoscimento di un codone di stop nel sito A, rilascio del polipeptide completato e dissociazione delle subunità ribosomiali.
35
Cosa sono i "polisomi" (o poliribosomi)?
: Struttura in cui più ribosomi traducono simultaneamente la stessa molecola di mRNA, permettendo una rapida sintesi di copie multiple di una proteina.
36
Quali sono i due meccanismi principali di controllo del metabolismo cellulare?
1) Regolazione dell'attività enzimatica (immediata, su enzimi già sintetizzati); 2) Regolazione della sintesi enzimatica (più lenta, controllando trascrizione e/o traduzione).
37
Cos'è un "enzima allosterico" e come funziona la "regolazione feedback" (o da prodotto finale)?
Un enzima allosterico ha, oltre al sito attivo, un sito allosterico a cui può legarsi una molecola effettrice (spesso il prodotto finale di una via metabolica). Questo legame modifica la conformazione dell'enzima, inibendo (feedback negativo) o attivando la sua attività. Nella regolazione feedback, il prodotto finale di una via inibisce l'attività del primo enzima della via stessa.
38
Qual è la differenza tra "induzione" e "repressione da prodotto finale" nel controllo della trascrizione?
o Induzione: La sintesi di enzimi di una via metabolica viene attivata (indotta) solo quando è presente il substrato specifico (induttore). o Repressione da prodotto finale: La sintesi di enzimi di una via biosintetica viene bloccata (repressa) quando il prodotto finale è già disponibile in quantità sufficiente (agisce come corepressore).
39
Spiega il meccanismo di regolazione dell'"operone lac" in E. coli (induzione).
L'operone lac codifica per enzimi del metabolismo del lattosio. In assenza di lattosio, una proteina repressore (codificata dal gene lacI) si lega all'operatore, bloccando la trascrizione. In presenza di lattosio (o del suo isomero allolattosio, che agisce da induttore), l'induttore si lega al repressore, che cambia conformazione e si stacca dall'operatore, permettendo all'RNA polimerasi di trascrivere i geni dell'operone.
40
Cos'è la "regolazione positiva della trascrizione"? Fai un esempio.
Il meccanismo di regolazione è determinato dall'attività di una proteina regolatrice "attivatore" che promuove il legame dell'RNA polimerasi al DNA e quindi la trascrizione. Esempio: l'operone maltosio, la cui trascrizione richiede il legame dell'attivatore trascrizionale MalT (in complesso con l'induttore maltosio) al DNA.
41
Cos'è la "repressione da catabolita" (o controllo da glucosio)? Come interviene il cAMP?
È un meccanismo di regolazione globale che assicura che la cellula utilizzi preferenzialmente il substrato migliore (solitamente il glucosio) anche se altri zuccheri sono presenti. La presenza di glucosio inibisce l'attivazione di operoni per altri zuccheri (es. lac, mal). Il glucosio regola la concentrazione intracellulare di cAMP (adenosin monofosfato ciclico). In assenza di glucosio, il cAMP aumenta e si lega alla proteina CRP (Cyclic AMP Receptor Protein), formando un complesso cAMP-CRP che agisce da attivatore per la trascrizione di vari operoni, incluso lac.
42
: Elenca almeno tre tipi di "elementi genetici accessori" (o mobili) nei procarioti.
Plasmidi, Genomi virali (batteriofagi), Sequenze di inserzione (IS), Trasposoni, Integroni.
43
Qual è la differenza tra "trasmissione verticale" e "trasmissione orizzontale" di materiale genetico?
o Trasmissione verticale: Trasferimento di DNA da cellula madre a cellule figlie durante la divisione cellulare. o Trasmissione orizzontale (HGT): Trasferimento di DNA tra cellule diverse (anche di specie diverse) indipendentemente dalla divisione cellulare (es. trasformazione, coniugazione, trasduzione).
44
Cosa sono i "plasmidi"? Quali tipi di capacità fenotipiche possono conferire?
Molecole di DNA extracromosomiali, generalmente circolari e a doppio filamento, capaci di replicazione autonoma. Possono conferire capacità come resistenza agli antibiotici, produzione di tossine (virulenza), utilizzo di composti complessi, produzione di batteriocine.
45
Cosa sono gli "elementi IS" (sequenze di inserzione) e i "trasposoni"?
o Elementi IS: Piccoli segmenti di DNA, i più semplici elementi trasponibili, che codificano principalmente per la trasposasi (enzima per la loro mobilità) e hanno sequenze ripetute invertite alle estremità. Possono causare mutazioni inserendosi in un gene. o Trasposoni: Elementi trasponibili più complessi che, oltre ai geni per la mobilità, portano anche geni accessori (es. resistenza agli antibiotici). Possono essere compositi (delimitati da due IS) o semplici.
46
Cosa sono le "isole genomiche" (o isole di patogenicità/fitness)?
Sono larghe frazioni di genoma, spesso acquisite per trasferimento orizzontale, che differiscono dal resto del genoma ancestrale per contenuto G+C e frequenza di codoni. Contengono spesso geni per la virulenza, resistenza agli antibiotici, o altre funzioni che favoriscono l'adattabilità.
47
Cos'è la "ricombinazione genetica"? Qual è la differenza tra ricombinazione omologa e non omologa (sito-specifica)?
È un processo che determina riarrangiamenti in molecole di DNA. o Ricombinazione omologa: Avviene tra frammenti di DNA con elevata similarità di sequenza (crossing-over), mediata dal gene recA. o Ricombinazione non omologa (o sito-specifica): Avviene tra sequenze non omologhe, spesso mediata da integrasi (es. integrazione di DNA virale).
48
Descrivi brevemente i tre principali meccanismi di trasferimento genico orizzontale nei batteri
o Trasformazione: Acquisizione di DNA extracellulare nudo dall'ambiente da parte di una cellula competente. o Coniugazione: Trasferimento di DNA (generalmente plasmidico, ma anche cromosomico) da una cellula donatrice a una ricevente attraverso un contatto fisico diretto (mediato da pili sessuali). o Trasduzione: Trasferimento di DNA batterico da una cellula all'altra mediato da un batteriofago (virus batterico).
49
Qual è la differenza tra "trasduzione generalizzata" e "trasduzione specializzata"?
o Trasduzione generalizzata: Qualsiasi gene batterico può essere impacchettato accidentalmente nel capside fagico e trasferito. o Trasduzione specializzata: Solo specifici geni batterici adiacenti al sito di integrazione del profago nel cromosoma vengono trasferiti, a seguito di un'escissione imprecisa del DNA virale.
50
Cos'è una "mutazione"? Qual è la differenza tra un ceppo "mutante" e uno "wild-type"?
o Mutazione: Cambiamento ereditabile della sequenza nucleotidica del DNA. o Mutante: Ceppo cellulare che presenta una mutazione (sequenza genotipica alterata). o Wild-type (selvaggio): Ceppo parentale da cui deriva il mutante (sequenza genotipica originale).
51
Qual è la differenza tra mutazioni "indotte" e "spontanee"?
o Indotte: Causate dall'azione di agenti ambientali (mutageni). o Spontanee: Dovute a errori occasionali durante la replicazione o altri processi cellulari.
52
Definisci i seguenti tipi di mutazioni puntiformi: transizione, transversione, missenso, non senso, silente.
o Transizione: Sostituzione di una pirimidina con un'altra pirimidina (C↔T) o di una purina con un'altra purina (A↔G). o Transversione: Sostituzione di una purina con una pirimidina o viceversa. o Mutazione missenso: Una sostituzione nucleotidica causa il cambiamento di un codone che specifica un amminoacido diverso. o Mutazione non senso: Una sostituzione nucleotidica trasforma un codone senso in un codone di stop, causando la terminazione prematura della proteina. o Mutazione silente: Una sostituzione nucleotidica cambia un codone in un altro codone che specifica lo stesso amminoacido (a causa della degenerazione del codice genetico), quindi non c'è cambiamento nella proteina.
53
Cosa sono le "mutazioni frameshift" (o di slittamento della cornice di lettura)? Come sono causate?
: Sono causate dalla delezione o inserzione di un numero di nucleotidi non multiplo di tre. Questo altera la cornice di lettura di tutti i codoni a valle della mutazione, portando generalmente a una proteina completamente diversa e spesso non funzionale. Le sequenze di inserzione (IS) possono causare mutazioni frameshift.