histoloji Flashcards
(112 cards)
robert hook
ilk hücre tanımı 1665
odacık anlamına gelen cellula
meşe kabuğu-şişe mantarı incelemiş
leeuwanhoek
mikrobiyoloji babası
pokaryot hücre
daha küçük 5 mikrometre ilkel kromozomları nükleoz içinde değil sitoplazmada membranlı organel yok hücre duvarı var
ökaryot hücre
nispeten büyük
5-200 mikrometre arası
nükleus ile korunmuş genetik materyal
sitoplazmik organellere sahip
farklılaşma ile _ olarak da değişim olur
morfolojik
insanda _ farklı tip toplmada ise _ hücre var
203 farklı tip
10^14 hücre
nükleus şekli ve hücre şekli ilişkisi
nükleus şekli genelde hücreye uyumludur ama istisnalar var
membranöz organeller
plazma membranı endoplazmik retikulum golgi kompleksi endozom lizozom peroksizom mitokondriyon
non-membranöz organeller
ribozom
sentriyol
mikrofilamentler
mikrotübüller
filamentler ve mikrotübüllerin oluşturduğu yapı
hücre iskeleti
inkluzyonlar
hücrede organel gibi bir işlevi yok atık ürünler serbesyon granülleri pigment granülleri yağ damlaları glikojen dalgaları
histolojik teknik
organizmadan ayrılan dokuların mikroskopla görülebilecek duruma getirilmesi için uygulanan işlemlerin tümü
canlı ve cansız inceleme yapılabilir
vital boyalar
hücreyi öldürmeyen az toksik boyalar
canlı incelemede kullanılır
immun sisteme ait makrofaj gibi fagositoz yapan hücreler belirgin boyanırlar
tripan mavisi, çini mürekkebi, lityum karmin, metilen mavisi, toluidin mavisi, yanus yeşili, nötral kırmızısı, krezil viyole
Rezolüsyonları İnsan gözü IM SEM TEM
İnsan gözü 0,2 mm
IM 0,2 mikrometre
SEM 2.5 nm
TEM 0.005 nm
Fiksasyon
Histolojik teknik ilk adımı
Amaç dokunun alındığı o halini koruma, otolizini engelleme.
Canlıya en yakın halde tutulur
Kimyasal ve fiziksel(dondurma)
Yumuşak bağlar sertleştirilir, doku sertleşir, taşınması kolaylaşır
ışık mikroskobik doku takibi
hücreler kolay incelenmek için genelde cansız inceleme tercih edilir.
aslına yakın takip edilmek için hemen histolojik takibe alınır
aşamalar:
fiksasyon, dehidratasyon, seffaflaştırma, gömme, kesit alma, boyama
fiksasyon
doku takibinin ilk basamağı
dokuları canlıdakine en yakın tutmak
amaç: otolizin ( kendi enzimleri tarafından organizmanın parçalanması) engellenmesi
bakteri mantar gibi mikroorganizmalar ortadan kaldırılır
protein moleküllerinin denatüre olmaları veya çapraz bağlar oluşturmalarıyla dokuların sertleşip kesilebilecek kıvama gelmesini sağlar
kimyasal ve fiziksel(dondurma) olabilir
fiksatif
fiksasyon yapma yeteneğine sahip kimyasallar
en sık kullanılan fiksatifler (ışık, em ve acil durumlarda)
formaldehit : ışık
gluteraldehid ve osmiyum tetroksid: EM
aseton ve alkol: acil durumlarda
fiziksel fiksasyon
-80/-196 arası dondurulup -20/-40 arası kriostatla kesilir
enzim ve lipidlerde kullanılır
10dkdan kısa sürebilir
acil durumlarda (cerrahi müdahelelerde histopatolojik inceleme) ve kimyasalda çözünen/ yok olan maddelerde kullanılır
kriostat denen mikrotomla 5-10 mikrometre kesilir
dehidratasyon
fiksasyondan sonra dokular yıkanıp fiksatiften arındırılır
sonra dehidratasyonla suyu alınır
dokunun derecesi artan seri alkolde bekletilmesi (%70> %100) (anında yükseğe konsa doku hızlı su kaybedip parçalanır)
aseton: elektron mikroskobu
şeffaflaştırma
alkol parafinle etkileşmediği için dokudaki alkolün gömme materyali ile karışabilecek çözücüyle yer değiştirilmesi
gömme materyali parafinse: ksilen kullanılır
kloroform ya da benzen de olabilşir
bu süreçte şeffaflaştığı için şeffaflaştırma denmiş
gömme
dokunun kesilmesi için uygun ortama yerleştirilmesi
ışıkta: parafin
em: epoksi resinler (sert maddeler)
kesit alma
parafin bloklardan mikrotom adlı aletle 3-10 mikrometre kalınlığında kesitler
emda ultramikrotom(cam veya elmas bıçak) ile 50-150 nm kalınlığında kesilir
10^-3 mili, 10^-6 mikro, 10^-9 nano, 10^-12 piko, 10^-10 angstrom