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Flashcards in Quiz lab 9 Deck (25)
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1

Principaux glucides dans organisme

Glycogène
Mucosubstances

2

Glycogène

Précurseur du glucose dans métab de l'organisme
Polysaccharides
Plus grand réservoir dans foie et muscles skelettiques
Largement distribué

3

Pathologies

Glycogène dans tubules rénales ou cellules de foie = signe de diabète
Anormal dans cancer métastatique du rein, carcinome du foie et désordres congénitaux

4

Mucines

AKA mucosubstances épithéliales
Produit glucidique riche en glucides
(mucopolysaccharides = mucosubstances conjonctives)
Role de protection
Produites par cellules épithéliales, fibroblastes et mastocytes
2 principales catégories: acides et neutres
Partout dans l'organisme (surtout dans conduits qui ouvrent sur environnement interne)
Présence ou absence peut être utilisée comme indice pour trouver origine de la source d'une carcinome

5

APS

Méthode acide périodique de Schiff
Colo plus répandue pour indiquer présence de glucides dans tissus

6

2 étapes APS

1. oxydation par acide périodique
2. détection des glucides

7

Oxydation par acide périodique

Ac. périodique = oxydant sélectif qui brise liens entre 2 carbones et libère des aldéhydes réactifs (CHO)

8

Détection des glucides

Par réactif de Schiff: produit de réduction de la fuchsine basique (ou pararoaniline) par un ac. sulfureux (brise les groupes chromophores de la fuchsine basique par sulfuration) ---> donne composé incolore (leucofuchsine qui est un leucocolorant)
Réactif de Schiff combine aux groupes aldéhydes ce qui redonne une couleur en recréant un chromophore dans la molécule
Nouveau groupe coloré = slightly différente couleur de fuchsine basique

9

Modification avec Diastase

Méthode APS-D
APS pas spécifique pour glycogène (mucines acides, LH, TSH, FSH, mucine gastriques, réticuline peuvent aussi réagir)
Diastase digère glycogène alors traite une des deux lames données pour le même tissu avec cet Z avant la coloration
Compare les 2 lames au microscope
Si APS-D nég et APS pos --> présence de glycogène
Si APS-D pos et APS pos --> autre que glycogène

10

Contre-colo utilisé dans notre lab

Hématoxyline de Harris acidifié

11

Solutions nécessaires

1. ac. périodique 1%
2. Réactif de Schiff
3. Hématoxyline de Harris
4. alpha-amylase

12

Résultats attendus

APS
Glycogène, membrane basale, mucines neutres: Magenta (APS pos)
Noyau, cytoplasme, GR: bleu pâle
Mucines acides: incolore-magenta (variable)
APS-D
Même chose sauf glycogène non coloré

13

Temps d'exposition ac. périodique

Si over 20 min PR- deviennt APS pos

14

Lavage eau courante

Suite au réactif de Schiff
Enlève excès réactif qui pourrait s'oxyder et produire de faux positifs
Métabisulfite de potassium 0.55% peut remplacer eau courante pour enlever excès

15

Substances APS pos

Glycogène
Amyloide
Mycose
Membranes basales
Mucines épithéliales
Cartilage
Amidon
Cellulose
Collodion thyroidien

16

Fonctions des mucines

Plupart des surfaces recouvertes de mucines --> lubrification
Recouvrement peut aussi favoriser diffusion ionique et moléculaire
Augmentation d'adhésion cellule-cellule avec implcation des mucines dans détermination de la spécificité de surface de la cellule
Anti-adhésif sur bactéries dans la vessie

17

Mucines neutres

Pas de radical acide présent
Dans l'estomac, prostate et cellules caliciformes
Bleu alcian: neg
APS: pos

18

Mucines acides sulfatées

Contiennt groupe sulfate
Glande bronchique
Mucines du gros intestin
Bleu alcian: pos pH 1.0 et 2.5
APS: pos (parfois)

19

Mucines acides carboxylées

Groupe carboxyle
Glandes salivaires et bronchiales
Mucines du petit et gros intestin
Bleu alcian pH 2.5: pos
Bleu alcian pH 1.0: neg
APS: pos (parfois)

20

Bleu alcian (BA)

Colo basique
Base de cuivre (donne couleur bleu) soluble dans l'eau

21

BA pH 2.5

Solution ac. acétique 3% pH 2.5
Colore mucopolysaccharides acides sulfatés et carboxylés ainsi que les sialomucines (glycoPR-) sulfatés et carboxylés

22

BA pH 1.0

Solution HCl 0.1 M pH 1.0
Colore seulement les mucopolysaccharides acides sulfatés et les sialomucines sulfatés

23

BA pH 0.5

Solution HCl 0.2 M pH 0.5
Colore seulement mucopolysaccharides et sialomucines fortement sulfatés

24

Rincage à acide avant BA

Permet de protéger la solution colo contre variation pH

25

Rincage à acide après BA

Éviter colo non spécifique
Pas vrm considéré différenciation