IVa cultivo celular

Question 1

conjunto de técnicas que permiten el mantenimiento de las células in vitro, manteniendo al máximo sus propiedades fisiológvicas, bioquímicas y genéticas

Answer 1

cultivo celular

Question 2

a que se refiere in vitro

Answer 2

a una técnica para realizar un determinado experimento en un ambiente controlado fuera de un organismo vivo

Question 3

cultivo bacteriológico

Answer 3

-microrganismos
-bacterias, hongos y parásitos

Question 4

cultivo celular

Answer 4

• celulas eucariotas (ej. organismos pluricelulares)
• protozoarios (paramecios, plasmodium, amebas)
  -levaduras (hongos microscopicos unicelulares)

en medicina se referiría a celulas representantes de un tipo celular específico (humano o especie de interés)

Question 5

fase de latencia

Answer 5

tiempo que tarda en comenzar el crecimiento de un microorganismo tras ser inoculado en medio fresco

depende de la historia del inoculo, la naturaleza del medio y las condiciones de crecimiento

Question 6

fase latencia
si un cultivo en fase exponencial se transfiere a un medio fresco bajo las mismas condiciones de crecimiento:

Answer 6

no hay esencialemente fase de latencia y prosigue en fase exponencial

Question 7

fase latencia
si el inóculo proviene de un cultivo viejo:

Answer 7

las células están depletas de constituyentes esenciales para el crecimiento, se llevara tiempo sintetizarlos

Question 8

fase latencia
si el medio cambia y se disponen de otros sustratos como fuentes de carbono por ejemplo, :

Answer 8

se requiere sintetizar las enzimas que permitirán aprovecharlo, eso lleva tiempo

Question 9

estado más saludable de las células

Answer 9

fase exponencial

ideal para el estudio de enzimas u otros componentes celulares

Question 10

fase exponencial

Answer 10

el numero de celulas se duplica en intervalos constantes de tiempo

en un cultivo por lote (tubo cerrado), los organismos no crecen indefinidamente de forma exponencial

Question 11

un cultivo solamente permanece en fase exponencial por un tiempo limitado

Answer 11

menos de 10 generaciones

1 bacteria pesa 1 x 10-15 kg

Question 12

fase estacionaria

Answer 12

comienza por agotamiento de nutrientes o acumulación de desechos

Question 13

crecimiento críptico en la fase estacionaria

Answer 13

no hay incremento neto en el numero de células. algunas crecen mientras otras mueren

Question 14

fase de muerte

Answer 14

tambien es exponencial, pero típicamente más lenta que la exponencial de crecimiento

las células pueden permanecer viables durante meses o incluso años

Question 15

monitoreo del rendimiento de cultivos por espectrofotometría

Answer 15

celulas dispersan luz
la turbidez de una suspension celular aumenta en medida en q hay más celulas presentes
se mide la luz que atraviesa la suspensión sis ser dispersada

Question 16

dos organismos pueden tener densidades ópticas dif a tiempos similares de medición por diferencias en tamaños, formas o velocidades de crecimiento:

Answer 16

el mismo valos de densidad óptica NO necesariamente correponte al mismo numero de celulas

Question 17

espectro
cuando la turbidez es excesiva:

Answer 17

se pierde la correspondencia entre el numero de celulas y la densidad optica pq la luz dispersada de la fotocelda por una celula puede ser nuevamente enviada a la fotocelda por otra celula

Question 18

ha sido considerada como mezcla de ciencia y arte

Answer 18

cultivo celular

Question 19

gracias a que se ha desarrollado el cultivo celular?

Answer 19

-medios de cultivo (mucho más complejos que para cultivo bacteriológico)
-disponibilidad de antibióticos
-instalaciones aséptica (salas, cabinas de flujo laminar, incubadoras)
-dispositivos de cultivo (frascos T, caja petri)

Question 20

medios de cultivo

Answer 20

tamponados para mantener un ph alrededor de 7.4
-indicadores de ph (rojo fenol), cambian de color a medida que aparecen catabolitos ácidos resultando del metabolismo celular
-antibioticos (ej penicilina, estreptomicina) y antimióticos (anfotericina) para impedir contaminación

Question 21

mezcla poco definida de macromoléculas adicionadas bajo la forma de suero fetal bovino o equino, o extracto crudo de embriones de pollo

Answer 21

medio de cultivo con suero

Question 22

quimicamente definidos con moleculas necesarias para la supervivencia y proliferación como los factores de crecimiento

Answer 22

medios de cultivo libres de suero

Question 23

condiciones de cultivo celular

Answer 23

incubación a 37°C en una atmosfera de 5% CO2, 95% aire

Question 24

frasco T

Answer 24

recipiente típico de 175 cm2 que puede contener aprox 1x10^7 células adheridas, y unas 1x10^8 celulas cuando se trata de lineas que crecen en suspensión

Question 25

cultivos primarios

Answer 25

-se preparan DIRECTAMENTE DEL TEJIDO U ORGANO -con o sin fraccionamiento previo para separar los distintos tipos celulares -celulas conservan sus caracteristicas originales y su PROLIFERACION ES LIMITADA -pueden ser removidas del recipiente de cultivo para formar cultivos secundarios

Question 25

cultivo primario monocapa

Answer 25

-mayoría de células que forman los tejidos no pueden vivir en suspensión, y requieren una superficie sólida sobre la cual crecer y multiplicarse (ANCLAJE - DEPENDIENTES) -excepto celulas hematopoyeticas maduras -este soporte es la base de una placa o frasco de plástico

Question 26

el área de anclaje disponible se haya toda cubierta de células

Answer 26

confluencia

Question 27

/cultivo primario monocapa a veces los requerimientos son más complejos y el plástico debe recubrirse con:

Answer 27

COMPONENTES DE LA MATRIZ EXTRACELULAR que rodea a las células en los tejidos, como por ejemplo colageno y laminina

Question 28

cultivos secundarios

Answer 28

las celulas en monocapa confluente detienen su crecimiento hasta que se las subcultiva (resiembra) a un recipiente con medio fresco las celulas frecuentemente mostrarán distintas propiedades según su origen

Question 29

lineas celulares transformacion

Answer 29

inmortales, crecimiento aberrante (sin inhibición por contacto, ni anclaje-dependientes), malignas (diseminan e invaden), geneticamente inestables -ej. se puede inmortalizar un fibroblasto si se les provee el gen q codifica para telomerasa no todas las células humans se transforman asi -otra forma es introducir ciertos oncogenes obtenidos de virus (ej HPV)

Question 30

las celulas de los roedores experimentan cambios genéticos espontaneos que:

Answer 30

las inmortalizan cuando son cultivadas

Question 31

HeLa

Answer 31

Henrietta Lacks 1952 primera línea celular humana. Adenocarcinoma

Question 32

ventajas del cultivo celular

Answer 32

condiciones controladas, representan tipos celulares especificos, acreditación de su pureza, reproducibilidad experimental, consumo reducido de reactivos, utiles en las primeras etapas de la investigación (modelo más sencillo) que evita el uso de animales, pueden ser conservadas y almacenadas en nitrógeno líquido (a -196°C) por un largo tiempo reteniendo su viabilidad

Question 33

desventajas del cultivo celular

Answer 33

se requiere experiencia para evitar contaminación y/o mala identificación, espacio de trabajo y equipos especializados, manejo de desechos plasticos y biológicos peligrosos, inestabilidad genetica (heterogeneidad), perdida de diferenciación

Question 34

premio nobel de medicina 1984

Answer 34

cesar milsten

Question 35

hibridomas

Answer 35

producción de anticuerpos monoclonales -fusión de linfocitos B secretores de inmunoglobulinas (anticuerpos) y células derivadas de una línea tumoral de linfocitos B

Question 36

fusógeno

Answer 36

ej POLIETILENGLICOL ***permite las membranas estén muy cerca y se fusionen

Question 37

heterocarionte

Answer 37

célula con núcleos geneticamente diferentes separados pero con los contenidos citoplasmáticos compartidos

Question 38

medio selectivo HAT HAT

Answer 38

hipoxantina, aminopterina y timidina

Question 39

aminopterina

Answer 39

es un antagonista competitivo del ácido dihidrofólico, vitamina necesaria para la sintesis de nucleotidos -las celulas deben utilizar vías alternas para la síntesis de dna estas vias alternas son defectivas en la linea celular tumoral pero estan intacta en la células del bazo. SOLO CÉLULAS HÍBRIDAS SOBREVIVEN

Question 40

HGPRT

Answer 40

hipoxantina guanina fosforibosil transferasa

Question 41

TQ

Answer 41

timidinoquinasa

Question 42

un heterocarionte puede entrar en mitosis, produciendo:

Answer 42

una célula híbrida en la cual las envolturas de ambos núcleos se han disgregado, permitiendo juntar los cromosomas de ambos en un único gran núcleo

Question 43

anticuerpo monoclonal

Answer 43

reconoce un único antígeno epitope antigénico