Vb enzimas de restricción, ligasas y polimerasas Flashcards
(41 cards)
enzima q cortan o degradan los ácidos nucleicos hidrolizando el enlace fosfodiéster de nucleotidos continuos
nucleasas
exonucleasas actuan sobre los extremos -5´-3´
endonucleasas actuan sobre los enlaces nternos
enzimas que unen moleculas de DNA
ligasas
enzimas que sintetizan ácidos nucleicos
polimerasas
ezma rstr*
endodeoxiribonucleasas
tienen la capacidad de cortar DNA doble cadena en una SECUENCIA ESPECÍFICA
endonucleasas de restricción
ezm rstrn*
Werner Arber, Hamilton Smith y Daniel Nathans ganaron el premio nobel en
1978
*endonucleasas restriccion ¿
ezms rstrn*
en la actualidad se conocen miles de ellas con más de ______ diferentes sitios de reconocimiento
100
*endonucleasas de restricción¿
sistema de defensa bacteriano contra patógenos, protegiéndolos del ataque de DNA foráneo (ej bacteriofago)
sistema de restricción-modificacion
sistema restr-modif*
endonucleasa q corta DNA de doble cadena rompiendo uniones fosfodiester DENTRO O FUERA de la secuencia de reconocimiento
restricción
sistema restr-modif*
metilasa q modifica el DNA por metilación en una base determinada siempre DENTRO de la secuencia de reconocimiento
metilación
sistema r-m*
ambas enzimas reconocen la misma secuencia de bases
v o f
verdadero
sistema r-m*
la metilación en las dos hebras del DNA evita que:
la enzima de restricción pueda cortar la molécula de DNA
sistema r-m*
la metilación protege al DNA genómico y plasmídico bacteriano del:
ataque de sus propias enzimas
cuando ambas cadenas están metiladas:
no hay metilación ni restricción
cuando sólo una cadena está metilada:
(hemimetilada)
hay metilación y no restricción
cuando ninguna cadena está metilada:
no hay metilación, si restricción
el sistema R-M sirve como sistema inmune
v o f
verdadero
corte de manera escalonada en dos puntos diferentes. pueden ser unidos (ligado) nuevamente. si provienen de la digestión de dos secuencias dif (ya sea con la misma enzima o con enzimas con extremos compatibles), se generará una nueva secuencia final (DNA recombinante)
extremos COHESIVOS O PEGAJOSOS
corte en un sólo punto en ambas cadenas
extremos ABRUPTOS (ROMO)
son distintas enzimas de restricción que reconocen la misma secuencia, con distintas especificaciones
isoesquizómeros
enzimas de restricción que reconocen distintas secuencias, pero dejan los mismos extremos
enzimas con extremos compatibles
muestra una secuencia de bases todos los posibles sitios de corte para las enzimas de restricción conocidas
mapa de restricción
se emplean programas informaticos para obtenerlos
mapas de restricción
nos permite seleccionar la enzima adecuada para editar la secuencia original y al final obtener la secuencia deseada
mapa de restricción
los sitios de reconocimiento de enzimas de restricción pueden verse alterados por:
variaciones en la secuencia de DNA