BfE-P5-WBT4-L03: Rekombinante DNA-Technologie Flashcards

(18 cards)

1
Q

Was sind Plasmide?

A

Kleine, doppelsträngige DNA-Moleküle, die unabhängig von der chromosomalen DNA in vielen Bakterienarten und einigen Eukaryoten existieren

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2
Q

Welche Struktur haben Plasmide?

A

Ringförmige DNA-Moleküle mit 1.000 bis 200.000 Basenpaaren

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3
Q

Welche Gene tragen Plasmide typischerweise?

A

Gene für ihre eigene Replikation und oft vorteilhafte Eigenschaften wie Antibiotikaresistenz

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4
Q

Wofür werden Plasmide in der Gentechnologie verwendet?

A

Als Vektoren zum Einschleusen fremder DNA in Wirtszellen

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5
Q

Welche Anwendungen ermöglichen Plasmide in der Biotechnologie?

A

Klonierung von Genen, Produktion von Proteinen und genetische Veränderung von Organismen

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6
Q

Nenne ein wichtiges medizinisches Beispiel für die Anwendung von Plasmiden

A

Die Herstellung rekombinanter Proteine wie Insulin in Bakterien

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7
Q

Was ist der erste Schritt bei der Genklonierung?

A

Das gewünschte Gen wird aus einer DNA-Bibliothek isoliert und in einen Vektor (meist ein Plasmid) eingefügt

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8
Q

Was bedeutet Transformation in der rekombinanten DNA-Technologie?

A

Das Einschleusen des Vektors mit dem Zielgen in Wirtszellen wie E. coli oder Hefe

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9
Q

Welche Wirtszellen werden häufig für die Expression rekombinanter Proteine verwendet?

A

E. coli-Bakterien oder Hefezellen

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10
Q

Wie wird das rekombinante Protein nach der Expression gewonnen?

A

Durch Zelllyse wird das Protein freigesetzt und anschließend aufgereinigt

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11
Q

Welche Chromatographie-Verfahren werden zur Proteinaufreinigung eingesetzt?

A

Affinitäts-, Ionen- und Größenausschlusschromatographie

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12
Q

Worauf wird das Endprodukt bei der Qualitätskontrolle geprüft?

A

Auf Reinheit, Aktivität und mögliche Verunreinigungen

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13
Q

Warum ist die Optimierung von Wachstumsbedingungen wichtig?

A

Für hohe Ausbeuten bei der Proteinproduktion

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14
Q

Was ist die alkalische Lyse?

A

Ein gängiges, effizientes und leicht durchführbares Verfahren zur Isolierung und Reinigung von Plasmid-DNA

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15
Q

Welche Bestandteile werden bei der Plasmid-Isolierung entfernt?

A

Chromosomale DNA, Proteine und andere Zellbestandteile

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16
Q

Wofür werden gereinigte Plasmide verwendet?

A

Für Anwendungen wie Klonierung oder Sequenzierung

17
Q

Welche medizinischen Bereiche hat die rekombinante DNA-Technologie revolutioniert?

A

Die Behandlung von Diabetes und Wachstumsstörungen

18
Q

Was sind die Vorteile der rekombinanten Proteinproduktion?

A

Herstellung großer Mengen an therapeutischen Proteinen mit hoher Reinheit und spezifischer Aktivität