BfE-P5-WBT4-L03: Rekombinante DNA-Technologie Flashcards
(18 cards)
Was sind Plasmide?
Kleine, doppelsträngige DNA-Moleküle, die unabhängig von der chromosomalen DNA in vielen Bakterienarten und einigen Eukaryoten existieren
Welche Struktur haben Plasmide?
Ringförmige DNA-Moleküle mit 1.000 bis 200.000 Basenpaaren
Welche Gene tragen Plasmide typischerweise?
Gene für ihre eigene Replikation und oft vorteilhafte Eigenschaften wie Antibiotikaresistenz
Wofür werden Plasmide in der Gentechnologie verwendet?
Als Vektoren zum Einschleusen fremder DNA in Wirtszellen
Welche Anwendungen ermöglichen Plasmide in der Biotechnologie?
Klonierung von Genen, Produktion von Proteinen und genetische Veränderung von Organismen
Nenne ein wichtiges medizinisches Beispiel für die Anwendung von Plasmiden
Die Herstellung rekombinanter Proteine wie Insulin in Bakterien
Was ist der erste Schritt bei der Genklonierung?
Das gewünschte Gen wird aus einer DNA-Bibliothek isoliert und in einen Vektor (meist ein Plasmid) eingefügt
Was bedeutet Transformation in der rekombinanten DNA-Technologie?
Das Einschleusen des Vektors mit dem Zielgen in Wirtszellen wie E. coli oder Hefe
Welche Wirtszellen werden häufig für die Expression rekombinanter Proteine verwendet?
E. coli-Bakterien oder Hefezellen
Wie wird das rekombinante Protein nach der Expression gewonnen?
Durch Zelllyse wird das Protein freigesetzt und anschließend aufgereinigt
Welche Chromatographie-Verfahren werden zur Proteinaufreinigung eingesetzt?
Affinitäts-, Ionen- und Größenausschlusschromatographie
Worauf wird das Endprodukt bei der Qualitätskontrolle geprüft?
Auf Reinheit, Aktivität und mögliche Verunreinigungen
Warum ist die Optimierung von Wachstumsbedingungen wichtig?
Für hohe Ausbeuten bei der Proteinproduktion
Was ist die alkalische Lyse?
Ein gängiges, effizientes und leicht durchführbares Verfahren zur Isolierung und Reinigung von Plasmid-DNA
Welche Bestandteile werden bei der Plasmid-Isolierung entfernt?
Chromosomale DNA, Proteine und andere Zellbestandteile
Wofür werden gereinigte Plasmide verwendet?
Für Anwendungen wie Klonierung oder Sequenzierung
Welche medizinischen Bereiche hat die rekombinante DNA-Technologie revolutioniert?
Die Behandlung von Diabetes und Wachstumsstörungen
Was sind die Vorteile der rekombinanten Proteinproduktion?
Herstellung großer Mengen an therapeutischen Proteinen mit hoher Reinheit und spezifischer Aktivität