BfE-P5-WBT4-L05: Agarose-Elektrophorese Flashcards
(17 cards)
Was ist die Agarose-Elektrophorese?
Eine weit verbreitete Methode zur Trennung und Analyse von DNA-Fragmenten basierend auf ihrer Größe
Auf welchem Prinzip beruht die Agarose-Elektrophorese?
Moleküle werden in einem elektrischen Feld nach ihrer Größe aufgetrennt
Warum bewegen sich DNA-Moleküle im elektrischen Feld?
DNA-Moleküle sind wegen der Phosphatgruppen im Rückgrat negativ geladen und bewegen sich zur positiv geladenen Anode
Was ist Agarose?
Ein natürliches Polysaccharid, das beim Erkalten ein Gel mit Poren bildet
Wie beeinflusst die Fragmentgröße die Wanderung durch das Gel?
Kleinere Fragmente bewegen sich schneller und weiter durch das Gel als größere Fragmente
Welche Funktion hat die Pufferlösung?
Sie leitet den Strom und hält die pH-Bedingungen während der Elektrophorese stabil
Was stellen die Banden im Gel dar?
Durch das Gel gewanderte DNA-Fragmente, die an bestimmten Positionen angehalten haben
In welche Richtung bewegen sich die DNA-Fragmente?
Vom Minuspol zum Pluspol (zur Anode)
Welche Puffer werden für die Agarosegel-Herstellung verwendet?
TAE-Puffer (TRIS-Acetat-EDTA) oder TBE-Puffer (TRIS-Borat-EDTA)
Wozu dient der Kamm bei der Gel-Herstellung?
Um Taschen für die Proben im Gel zu erzeugen
Was wird zusammen mit den DNA-Proben in die Taschen pipettiert?
Ladepuffer mit Glycerin oder Ficoll und einen Farbstoff
Welche Funktion hat der Ladepuffer?
Glycerin oder Ficoll halten die Proben in den Taschen, Farbstoff visualisiert den Lauf
Wie werden die DNA-Fragmente nach der Elektrophorese sichtbar gemacht?
Das Gel wird unter UV-Licht betrachtet, nachdem es mit einem DNA-bindenden Farbstoff behandelt wurde
Welche Farbstoffe werden zur DNA-Visualisierung verwendet?
Ethidiumbromid oder sicherere Farbstoffe
Wie wird die Größe der DNA-Fragmente bestimmt?
Durch Vergleich mit einem DNA-Längenstandard
Was bestimmt, wie leicht DNA-Fragmente durch das Gel wandern?
Die Porengröße des Agarosegels
Wie erscheinen die DNA-Fragmente bei der Analyse?
Als Banden im Gel
